实验一红细胞计数、白细胞计数 实验诊断学第一临床医学院检验医学系实验诊断学教研室实验内容实验内容n n红细胞计数红细胞计数（Red blood cell countRed blood cell count）n n白细胞计数白细胞计数（White blood cell countWhite blood cell count）手工显微镜计数法细胞计数仪法（直接计数法）（间接计数法）利用电阻抗和（或）光散射原理计数方法一、红细胞计数（手工显微镜法）一、红细胞计数（手工显微镜法） 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算求得每升血液中的红细胞数量 1. 原理显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板2. 器材手工显微镜计数法原理手工显微镜计数法原理改良Neubauer计数板充池显微镜观察细胞数/L等渗稀释液微量吸管检测试剂：检测试剂：RBCRBC稀释液稀释液Hayem Hayem 稀释液：稀释液：NaCl, NaNaCl, Na2 2SOSO4 4，HgClHgCl2 2枸橼酸钠甲醛盐水溶液枸橼酸钠甲醛盐水溶液: :枸橼酸钠，甲醛，枸橼酸钠，甲醛，NaClNaCl生理盐水或含生理盐水或含1%1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用上述两种稀释液时临时使用改良Neubauer计数板大方格大方格中方格中方格小方格小方格（9个）（25个） （16个）充液位置充液位置为红细胞计数区域压线细胞的计数原则：数左不数右，数上不数下为红细胞计数区域3.3.检测方法检测方法 小小试试试试管加管加RBCRBC稀稀释释释释液液2.0 ml2.0 ml。
采血，取血采血，取血10 10 l l 擦去管外的血，擦去管外的血，轻轻轻轻吹入吹入试试试试管底部，再清洗吸管管底部，再清洗吸管2323次，立即混匀次，立即混匀 混匀后充入混匀后充入计计计计数室，静置数室，静置35 min35 min，高倍，高倍镜镜镜镜下下计计计计数检测方法检测方法2ml稀释液 充分混匀 10l血液 充池、静止 镜下计数 4.4.计算计算男男 性：性：(4.0(4.05.5)105.5)101212L L女女 性：性：(3.5(3.55.0)105.0)101212L L新生儿：新生儿：(6.0(6.07.0)107.0)101212L LRBC/L5个中方格内RBC数510200106 5个中方格内RBC数/1001012 RBC：1012L 6.参考值5.报告方式 二、白细胞计数（手工显微镜法）二、白细胞计数（手工显微镜法）n nWBCWBC稀稀释释释释液液: : 冰醋酸冰醋酸3.0 mL3.0 mL（破坏（破坏红细红细红细红细 胞）胞） 蒸蒸馏馏馏馏水水97.0 mL97.0 mL 亚亚亚亚甲甲蓝蓝蓝蓝（染色）（染色）1. 1. 检测方法检测方法n n小小试试试试管加管加WBCWBC稀稀释释释释液液0.38 mL0.38 mL。
n n采血，微量吸管取血采血，微量吸管取血20 20 L Ln n擦去管外的血，擦去管外的血，轻轻轻轻吹入吹入试试试试管底部，再清洗管底部，再清洗吸管吸管2323次，立即混匀次，立即混匀n n混匀后充入混匀后充入计计计计数室，静置数室，静置23 min23 min，低倍，低倍镜镜镜镜下下计计计计数白细胞计数：用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数2. 计算WBC/L 3. 报告方式 4个大方格内WBC数/20109 4个大方格内WBC数41020106WBC : 109L 手工显微镜计数的注意事项手工显微镜计数的注意事项n n采血时不要过分挤压采血时不要过分挤压n n取血量须准确，动作要迅速，防止血液凝固取血量须准确，动作要迅速，防止血液凝固n n血液加入稀释液后，应立即混匀血液加入稀释液后，应立即混匀n n充池前要摇匀，一次性充池，不能产生气泡充池前要摇匀，一次性充池，不能产生气泡n n压线细胞应数上不数下，数左不数右压线细胞应数上不数下，数左不数右。