为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划5ml甘油,5ml乙醇葡萄糖溶血实验报告分析 细胞膜的渗透性实验报告 一、实验目的: 1.了解细胞膜的渗透性 2.了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度二、实验原理: 1.细胞膜具有对物质选择透过的生理功能脂溶性越高通透性越大,水溶性越高通透性越小;非极性分子比极性容易透过,小分子比大分子容易透过水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层,不带电荷的极性小分子,如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层,尽管速度较慢,分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过,而膜对带电荷的物质如:H+、Na+、K+、Cl–、HCO3–是高度不通透的 2..hemolysis:渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压,使水进入细胞,引起细胞吸水胀破;即红细胞膜破裂,血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象3.isotonicsolution:渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液solution:渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗溶液solution:渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。
膜或膜状结构只允许溶剂(通常是水)或部分溶质(一般为小分子物质)透过,而不允许其他溶质(一般为大分子物质)透过的特性 :膜两侧溶液浓度存在差异,造成化学势能差,在势能差的驱动下,溶剂穿过对溶质不透膜的过程 三、实验材料及作用:150mmol/LNaCl,蒸馏水,5mmol/LNaCl,65mmol/LNaCl,mol/L甲醇,mol/L乙醇,mol/L丙醇,mol/L乙二醇,mol/L丙三醇,2%TritonX-100,氯仿(三氯甲烷) 的作用:将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中:等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形;渗透压递减的一系列溶液中,红细胞逐步胀大并双侧凸起,当体积增加30%时成为球形;体积增加45%~60%则细胞膜损伤而发生溶血,这时血红蛋白逸出细胞外,仅留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳,称为血影细胞正常人的红细胞一般在%NaCI溶液中时开始出现溶血,在%NaCI溶液中时完全溶血. 2.甲醇:小分子、亲脂性的非极性分子甲醇为低渗溶液,容易溶解于脂双层,并迅速透过,提高红细胞的渗透压,促使水分进入细胞,引起溶血 3.乙醇:乙醇是脂溶性小分子,可以自由扩散进出细胞。
红细胞外有相对高浓度的乙醇,大量乙醇分子顺浓度差进入红细胞,使红细胞内渗透压高于红细胞外渗透压,水通道开放,大量水分子进入红细胞,发生溶血 4.丙醇,丙二醇,丙三醇的作用与甲醇,乙醇的作用相似,都是脂溶性分子,随着分子量的增加,分子的增大,溶血时间增加 5.去垢剂是一些具有亲水的极性基团和疏水的非极性基团的长链分子非离子型去垢剂如TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团,它们主要与蛋白质疏水部位相互作用,一般不会引起蛋白质变性而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋白质结构,使之变性,尤其是加热后可使蛋白质解离为单体,如十二烷基磺酸钠等多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物,从而使细胞膜破裂,释放出细胞内物质6.氯仿:氯仿是很好的脂类萃取剂,不能够发生溶血现象四、实验过程: 1.取新鲜羊血,加入适量抗凝剂备用2.观察加入不同溶液之后的溶血现象3.渗透性计时比较五、实验结果分析: 1.蒸馏水和150mmol/LNaCl: 结论:Na+和Cl-不能以自由扩散方式通过细胞膜,/LNaCl不能导致溶血;而H2O可以很快地进入细胞内,使细胞膨胀溶血 2.不同浓度的NaCl 结论:150mmol/LNaCl溶液与羊血细胞是等渗溶液,所以不能溶血,5mmol/LNaCl与65mmol/LNaCl溶液为低渗溶液,能够是红细胞吸水涨裂。
浓度越低,与细胞的渗透压相差越大,渗透作用越强,越容易发生溶血3.相同浓度的甲醇,乙醇,丙醇 结论:血细胞在相同浓度的甲醇,乙醇,丙醇中都能溶血,但是时间不同,随着分子量的增加,分子增大,溶血时间增长,这说明溶血时间的长短不但与分子的极性有关,还与分子的大小有关 4.相同浓度的丙醇,丙二醇,丙三醇 结论:丙醇,丙二醇,丙三醇都是极性分子,都能使红细胞溶血,但是丙三醇的分子较大,所以溶血时间较长5.2%TritonX-100,氯仿 结论:非离子型去垢剂TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团,主要与蛋白质疏水部位相互作用,不会引起蛋白质变性,从而是红细胞内物质渗出,发生溶血现象而氯仿根本无法溶解红细胞六、讨论 1.试分析水进入红细胞膜的速度是由于扩散吗?如果不是,,如何证明? 答:不是因为水进入红细胞的速度很快,而渗透作用不能这么快红细胞膜上存在水通道,控制水的进出 证明方法:可以用同位素标记的方法,将水通道蛋白标记,如果发现其中有水通过,说明水不是仅仅通过渗透作用进入细胞的 2.为什么溶液中微量的去垢剂可对活细胞产生严重的影响? 答:因为去垢剂是一些具有亲水的极性基团和疏水的非极性基团的长链分子。
非离子型去垢剂如TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团,它们主要与蛋白质疏水部位相互作用,一般不会引起蛋白质变性而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋白质结构,使之变性,尤其是加热后可使蛋白质解离为单体,如十二烷基磺酸钠等多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物,从而使细胞膜破裂,释放出细胞内物质3.实验结果并分析不同类型的醇透过细胞膜的速度不同的原因七、参考文献 成都师范学院 课题:不同性质物质细胞膜通透性的观察比较 系院:化学与生命科学学院专业:生物科学1301姓名:刘茹 学号:1 XX年11月 不同性质物质细胞膜通透性的观察比较 陈海英高迪李婷婷陈韬何春霞刘茹张珲玲 摘要:相对分子质量、脂溶性大小,电解质和非电解质溶液对细胞膜通透性的影响由于各种溶质进入细胞的速度不同,所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同可以通过测量溶血的时间来粗略比较细胞膜对不同物质通透能力的强弱关键词:溶血细胞膜通透性1.前言: 细胞膜的存在将胞内物质与细胞周围环境隔开,为细胞内发生的各种代谢反应提供了一共相对封闭、稳定的内环境但这种屏蔽作用是相对的,因为细胞要与周围环境间进行物质和能量的交换,因此细胞膜也是细胞与外界环境进行物质交换的结构。
细胞膜可以选择性的让某些物质进出细胞各种物质进出细胞的方式不同,大体可以分为三种方式:第一种是被动运输,疏水性小分子和某些极性小分子以自由扩散的形式通过细胞膜;第二种是主动运输,离子通过离子通道进入细胞,需要载体和能量;第三种是胞吞和胞吐 单纯考虑细胞膜的脂双层性质,仅疏水性小分子和某些极性小分子可以依浓度差自由通过细胞膜,绝大多数的极性分子和离子不能自由通过,但细胞膜的脂双层上分布有丰富的功能各异的膜转运蛋白,使得这些极性分子和离子的跨膜运输得以实现膜转运蛋白包括两大类:载体蛋白和离子通道细胞所需的营养如葡萄糖、 氨基酸、核酸等极性分子通过载体蛋白的转运进入细胞;离子通道则是离子通过细胞膜的特有方式 红细胞师观察膜通透性差异的良好材料,是因为红细胞没有细胞核,这样也就缺乏一个贯穿质膜与细胞核之间的细胞骨架的网络系统其他有核细胞,因为其质膜成分与骨架成分的相互结合,而使细胞膜抗低渗的机械强度大大增加,低渗溶液中这些细胞会吸水膨胀,显微镜下可以观察到细胞体积显著增大,但很难像红细胞那样在短时间内胀破 由于各种溶质进入细胞的速度不同,所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
2.材料与方法: 材料:鸡血的稀释液/L的氯化钠溶液,/L氯化铵,/L 醋酸铵,/L硝酸钠,/L草酸铵,/L硫酸钠,/L葡萄糖,/L甘油,/L乙醇,/L丙酮 实验仪器:15ml玻璃试管,5ml移液管,计时秒表等方法:取试管2支,各加入5ml蒸馏水,再分别加入 稀释的鸡血,轻轻摇匀,注意观察溶液颜色变化,如发生溶血,记录溶血时间 取试管2支,各加入/L的氯化钠溶液5ml, 再分别加入稀释的鸡血,轻轻摇匀,注意观察溶液颜色变化,如发生溶血,记录溶血时间 分别在以下几种等渗溶液中重复同样实验,观察有无 溶血现象以及溶血时间 /L的氯化钠、/L的氯化铵、/L醋酸钠、/L的硝酸钠、/L的草酸铵、/L硫酸钠、/L的葡萄糖、/L的甘油、/L乙醇、/L丙酮 3.结果与分析:结果: 分析: 通过对比实验数据,得到各个组溶血时间快慢排序如下:水<丙酮()<乙醇()<甘油()<草酸铵()<氯化铵() 鸡血红细胞在氯化钠、醋酸钠、硝酸钠、硫酸钠、葡萄糖溶液中在10min内没有观察到溶血现象)4.分析讨论: 鸡血中的红细胞在不同的溶液中表现为一些溶一些不溶,但是溶血的时间除了蒸馏水中时间较短之外,在其余溶液中溶血的时间都超过了5min,因此我们可以从两者的生理结构及组分进行解释。
鸡血的红细胞为有核细胞,其质膜成分与骨架成分相结合,使细胞膜抗低渗的机械强度大大增加,细胞会吸水膨胀,在显微镜下会发现体积明显增大,但很难像红细胞那样在短时间内胀破通过电解质与非电解质间进行比较 通过对实验结果的分析,得到非电解质的溶血速度整体上比电解质要快电解质 本实验中,电解质部分能产生溶血现象,部分不能,根据阳离子的不同,可以分为铵盐和钠盐两类钠盐与铵盐 在电解质中,铵盐出现溶血现象,钠盐不出现溶血现象原因在于铵盐为弱电解质,溶液中存在电离平衡,有许多分子形式存在的氨氨通过与水结合形成一水合氨,作为分子形式的一水合氨小分子,可自由扩散进出红细胞实验中,红细胞外氨浓度相对高,氨分子顺浓度差进入红细胞,使红细胞内渗透压升高,促使水通道开放,大量水分子进入红细胞发生溶血而钠离子为强电解质,在溶液中完全电离, 细胞生物学实验手册 授课教师:毛晓霞 成绩 1、实验占期末总成绩30%,即30分;取七个实验的平均成绩为实验最终成绩 2、分组名单:分AB两班,每班5组,每组6人3、请假:员签字的假条+提前一天请假 实验要点 实验一光学显微镜使用及显微摄影技术 一、实验目的 1、了解光学显微镜结构原理并熟练掌握其操作方法;2、掌握显微摄影技术操作流程 3、了解部分细胞生物学中所使用的大型仪器设备的操作流程及用途。
二、实验原理 显微镜的放大效能是由其照明系统所使用光的波长和透镜系统的数值孔径决定,缩短使用的光波长或增加数值孔径可以提高分辨率 可见光的光波振幅较窄,因此使用较短波长的紫外光作为光源系统,可以提高分辨率三、实验内容 1、双目显微镜的操作规范: 2、NIKON80i显微摄影系统的操作流程 3、胶片放大洗印技术流程4、部分大型仪器设备介绍 荧光显微镜Fluorescencemicroscope暗视野显微镜darkfieldmicroscope相差显微镜微分干涉差显微镜 倒置显微镜inversemicroscope显微操作仪 透射电子显微镜TEM四、作业 1、双目显微镜操作流程规范 五、思考题 1、暗视野显微镜的定义与应用2、相差显微镜的定义与应用 实验二血涂片的制备及细胞大小的测量 一、实验目的: 1、掌握血涂片的制备技术 2、认识血液中红细胞和各类白细胞的形态3、掌握目镜测微尺的使用方法二、实验原理: 将血液样品制成单层。