黄曲霉毒素Ml检测方案方案一、免疫亲和层析净化高效液相色谱法(GB 5413.37-2010 第二法)一、 原理:亲和柱内含有的黄曲霉毒素Ml特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当试样通过亲和柱时,抗体 选择性的与黄曲霉毒素MI(抗原)键合,形成抗体一抗原复合体用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗 脱吸附在柱上的黄曲霉毒素Ml,收集洗脱液用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉 毒素Ml含量二、 所需仪器1、 高效液相色谱仪(配荧光检测器一具有365 nm激发波长、435 nm发射波长,在适当的色谱条件下能够测定0.02 ng 的黄曲霉毒素MI(相当于5倍噪音))2、 离心机(转容50ml角转子,转速10000r/min)3、 氮吹仪4、 固相萃取装置(带真空系统)5、 水浴锅(温控 30C2C, 50C土2C;温范 25C~60C)6、 天平:感量为0.01 g7、 PH计:精度0.018、 旋转蒸发仪(奶油样品制备)9、 紫外分光光度计(标液浓度的校正,波长范围为200nm-400nm)三、 试剂及耗材1、 黄1111霉毒素Ml免疫亲和柱2、 黄曲霉毒素M1标准品3、 反相色谱柱C18 4.6*250加有反相色谱材料的保护柱5、移液管:lml, 2ml, 50ml6^ 烧杯:50ml, 250ml7、 分液漏斗:250ml (干酪和奶油样品制备)8、 容量瓶:100ml9、 一次性注射器:10ml, 50ml10、 针式过滤器(水系)0.22um, 0)1311>乙W (CH3CN):色谱醇12、 甲醇:分析醇13、 三氯甲烷:分析醇14、 石油瞇:分析醇15、 带刻度的磨口锥形玻璃试管:5mL、10 mL、20 mL16>离心管:50ml四、操作方法依据GB 541337-2010第二法五、供应产品明细品名规格报价品牌备注高效液相色谱仪荧光检测器黄曲寄毒素Ml 免疫亲和柱25支/盒5130.00徳国 R-Biopharm可供选择25支/盒3900.00agela离心机天平方案二、酶联免疫吸附法(可定性、定量检测牛乳及其他乳制品等样本中的黄曲霉毒素Ml)一、 原理标准溶液和样品试液加入备自板孔,游离的黄曲霉毒素Ml与微孔中包被的黄曲霉毒素Ml抗体结合, 没有结合的物质在洗涤中被清除。
再加入黄曲霉毒素Ml酶标记物,将没有结合的抗体位点全部覆盖,结 合的酶标记物通过显色液显示出来最示加入终止液,用酶标仪在450nm测定吸光度值,吸光度值与样品 中的黄I11T奇毒素Ml含最成反比二、 所需仪器和耗材1、 微孔板酶标仪450nm/630nm2、 冷冻离心机(转容10ml角转子和50ml角转子,转速不低与3500转/ min)3、 夭平:感量为0.01 g4、 微童移液器:单道20川〜20(加1、200|11〜10()0卩1、多道25()小5、 振荡器6、 刻度移液管:25ml7、 洗耳球8、 三角瓶:100ml9、 聚苯乙烯离心管:10ml/50ml10、 去离了水三、 操作方法详情见黄曲霉毒素Ml酶联免疫试剂盒说明书U!、供应产品明细品名规格报价品牌备注微孔板酶标仪35000.00徳国 R-Biopharm黄曲霉毒素Ml酶联 免疫试剂盒96孔4950.00徳国 R-Biopharm可供选择黄曲霉毒素Ml酶联 免疫试剂盒24孔2360.00徳国 R-Biopharm黄曲霉毒素Ml酶联免疫试剂盒96孔3000.00age la黄曲霉毒素Ml酶联 免疫试剂盒48孔1800.00agela离心机微量移液器20)11—200川1650.00Thermo微量移液器吸头20pl 〜200卩11000支/包40.00国产Thermo配套价 格:150.00,可选择微量移液器吸头盒20pl 〜200f.il15.00国产微暈移液器200川〜lOOOpl600.00Thermo微量移液器吸头200)11 〜lOOOpl500支/包40.00国产Thermo配套价 格:150.00,可选择微量移液器吸头盒200pl 〜1000pl15.00国产微量移液器多道250|il2600.00Thermo8道微量移液器吸头多道250^11000支/包40.00国产微量移液器吸头盒多道250^115.00国产振荡器。