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实验:观察DNA和RNA在细胞中的分布

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人教版普通高中课程标准实验教科书《生物》(1)必修分了与细胞第二章笫三节观察DNA和RNA在细胞中的分布张荣政太原师范学院生物系122班教学目标知识:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布方法能力:学会制备口腔上皮细胞装片;能熟练使用显微镜情感态度与价值观,培养学生的动手能力,培养学生树立实事求是,认真严谨的 科学态度教学重点掌握实验原理、显微镜的使用教学难点甲基绿使DNA呈绿色,毗罗红使RNA呈红色实验原理(1) 真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中2) 甲基绿和毗罗红两种染色剂对DNA和RXA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和 力强,使DNA显现岀绿色,而毗罗红对R\A的亲和力强,使RNA呈现出红色用甲基 绿、I此罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布3) 盐酸的作用%1 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;%1 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合材料用具1、 实验材料:人的口腔上皮细胞(洋葱表皮细胞,根尖细胞,蛙或赡赊的血细 胞,果肉细胞)2、 仪器:大烧杯,小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架 台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜。

3、 试剂:质量分数为0・9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,毗罗红甲基绿 染色剂(取A液20mL、B液80mL配成染色剂,使用使用时现配A液:取毗罗红甲 基绿粉1 g,加入100 ml,蒸憎水中溶解,放入棕色瓶中备用B液:取乙酸钠16. 4 g,用蒸馅水溶解至1 000 mLo取乙酸12 mL,用蒸憾水稀释至1 000 mL0取配好的 乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 niL,加蒸憾水50 mL,配成pH为4・8的B液), 蒸懈水教学过程1 •取材%1 滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0. 9%的NaCl溶液;%1 舌IJ:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;%1 涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;%1 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干2. 水解%1 解:将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行 材料的水解;%1 保:将小烧杯放入装有30C温水的大烧杯中保温5分钟3. 冲洗涂片%1 冲:用缓缓的熬镭水冲洗载玻片10秒钟;%1 吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分4. 染色%1 染:用2滴毗罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;%1 吸:吸去多余染色剂;%1 盖:盖上盖玻片。

5. 观察%1 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野,将物像 调节清晰;%1 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色T青况 注意事项1 .材料的选择%1 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;%1 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色 的干扰,不可使用紫色表皮细胞)2. 取材要点%1 取口腔上皮细胞Z前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质;%1 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉纟R织细胞3. 冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌真接用水龙头冲洗4. 安全要点%1 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来|叫 移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;%1 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟5. 换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋 问题延伸1. 加入8%盐酸的目是:改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞;使染色剂中 的DNA与蛋白质分离;杀死细胞,有利于DNA与染色剂结合2. 为什么要进行水解:甲基绿和毗罗红不是活细胞所需要的物质,正常情况下, 无法穿过细胞膜进入细胞内,因此实验中使用盐酸破坏细胞膜,增加细胞膜的通透性, 以方便染色剂进入细胞,同时,盐酸还能使细胞中染色体中的DNA和蛋门质分离, 有利于DNA与甲基绿染色剂结合。

3. 将盛令盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有30C温水的大烧杯中保温伍分钟水浴 加热的日的是使小烧杯受热均匀。

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