草乌炮制前后化学成分论文最终版2900字 草乌炮制前后化学成分、毒性比较吕岩（南京中医药大学中药学 江苏 南京 210046 ）摘 要 通过实验比较炮制前后草乌的化学成分、药效作用、毒性的变化 关 键 词 草乌 炮制 化学成分 毒性前 言 中药草乌为毛莨科乌头属植物北乌头(Alkusnezoffii)的块根味辛、苦；性热；有大毒具有祛风除湿、温经止痛的功效现代药理学研究表明，乌头的提取物具有镇痛、消炎、麻醉、降压及对心脏产生刺激等作用,其有效成分为生物碱这类生物碱有很强的毒性，人口服乌头碱0.2mg即可引起中毒，乌头碱的致死量为3~4mg；常见的中毒症状主要以神经系统、循环系统和消化系统的表现为主[1]为了降低乌头药材的毒性,历代医家分别采用了不同的炮制方法[2]，如草乌：唐代有姜汁煮、醋煮、山矾灰汁浸等的炮制方法，宋代有炒焦、炒黑存性等现通过实验比较炮制前后草乌化学成分、药效作用、毒性的变化1、草乌药材的炮制1.1草乌炮制的目的草乌炮制的目的是为了降低药材中所含的毒性物质，以减少在用药过程中的风险，达到安全用药的目的1.2草乌炮制降毒原理草乌中含有双酯型生物碱（乌头碱、中乌头碱、次乌头碱等），具有强毒性，但该类双酯型生物碱性质不稳定，遇水、加热易被水解，使极毒的双酯型乌头碱C8 位上的酯基水解，生成单酯型生物碱：苯甲酰乌头胺（乌头次碱Benzoylaconine）、苯甲酰中乌头胺（Benzoylmesaconine）、苯甲酰次乌头胺（Benzoylhypaconine），其毒性为双酯型乌头碱的1/50~1/500。
再进一步水解，使C14位上的酯基水解，生成醇胺型乌头原碱类：乌头胺（乌头原碱Aconine） 、中乌头胺（Mesaconine）、次乌头胺（Hypaconine），其毒性仅为双酯型乌头碱的1/2000~1/4000另一原因可能是炮制过程中脂肪酰基取代了C8位上的乙酰基，生成脂碱，从而降低毒性1.3草乌炮制方法制草乌 按《中国药典》制草乌“制法”项下方法炮制：取草乌，大小分档，用水浸泡至内无干心，取出，加水煮沸，至取大个及实心者切开内无白心，口尝微有麻舌感时，取出，晾至六成干，切厚片 ,干燥生草乌 草乌晾干,切厚片,干燥分别取上述炮制品各30g，用适量水煮2次，约四十分钟，共制得100ml，即为30%的草乌煎液（每ml煎液相当于生药0.3g）分别即为生品水煎液A、煮品水煎液B用于药理实验分别取上述生草乌和煮草乌20g，粉碎，过三号筛，备用用于含量测定2、酯型生物碱的含量测定[3]2.1色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相[乙腈-四氢呋喃（25:15）](A)-[0.1mol/L乙酸铵（1000ml加乙酸0.5ml）（]B）梯度洗脱（0~15min,16%~19%A；15~45min,19%~22%A；45~60min,22%~35%A,65~75min,35%A），流速0.8ml/min；柱温30℃；检测波长235nm。
2.2对照品溶液的制备 分别精密称取新乌头碱2.37mg，乌头碱2.04mg，次乌头碱1.61mg，苯甲酰新乌头原碱4.02mg，苯甲酰乌头原碱 3.04mg，苯甲酰次乌头原碱 3.19mg，置于 10ml 量瓶中，加0.05%盐酸-甲醇溶液，稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品 溶液2.3标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液2,4,6,8,10,12,16,20μL，分别注入液相色谱仪，峰面积为纵坐标，进样量(μl)为横坐标，绘制标准曲线2.4供试品溶液的制备 分别称取草乌及其炮制品粉末( 过三号筛) 2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入氨试液 3ml 与异丙醇-乙酸乙酯( 1:1) 混合溶液 50ml，摇匀，称定质量，放置16h，连续超声 30min，冷却，称定质量，用混合溶液补足减失质量，摇匀，滤过，精密移取续滤液 25ml，于 40℃ 以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入 0.05%盐酸-甲醇溶液 5ml溶解，摇匀0.45μm 滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液2.4样品含量测定 分别吸取供试品溶液生草乌和煮草乌各10μl及对照品溶液10μl注入液相色谱仪,进行测定每份样品重复测定3次,取其平均值。
通过标准曲线计算六种生物碱的含量3.炮制对草乌药理作用影响的研究草乌具有良好的镇痛、抗炎和免疫抑制作用,但因其毒性大,临床上常因用药不当而造成中毒甚至死亡现代对草乌进行了比较广泛的研究我们小组选择利用小鼠扭体反应，研究草乌炮制前后对镇痛效果的影响3.1药效试验—草乌炮制前后对镇痛效应的影响3.1.1器材和药品 注射器、秒表 ；0.3g/ml炮制前后的草乌水煎液A、B（炮制方法见前），0.6%醋酸水溶液，生理盐水， 0.4%哌替啶生理盐水溶液 ；实验动物为小白鼠（18-22g）3.1.2实验步骤 取体重18-22g的健康小白鼠40只，随机分成四组，每组10只，第一组腹腔注射0.4%哌替啶溶液20mg/Kg,第二组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g, 第三组腹腔注射0.003g/ml(吸取1ml水煎液A至100ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度)生品草乌水煎液0.1ml/10g,剂量为0.03g/kg第四组腹腔注射煮0.003g/ml（吸取1ml水煎液B至100ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度）制草乌水煎液0.1ml/10g,剂量为0.03g/kg药后半小时，每鼠均由腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/只，观察扭体潜伏期以及0-15min,15-30min的扭体次数。
实验结束后计算镇痛百分率4.炮制前后草乌的毒性比较我们通过小鼠死亡率来评价炮制前后草乌的毒性变化4.1毒性试验——草乌生品和炮制品的死亡率的变化4.1.1器材和药品 注射器、烧杯、计时器；0.3g/ml炮制前后得到的草乌水煎液（炮制方法见前）；动物为小白鼠（18-22g）4.1.2实验步骤 取小白鼠雌雄各半，随机分组各剂量每组10只，分别灌胃生品和炮制品的药物，注射量为0.1ml/10g体重,剂量为3g/kg，观察24小时内死亡率并记录总 结炮制是降低草乌毒性的第一步，是系统研究草乌的起点通过炮制草乌的毒性降低，是目前我们所能研究草乌的唯一契机目前草乌炮制方法仍以水煮、蒸制法为主，较少应用高压蒸制或微波炮制等方法虽然应用 2010 年版《中国药典》中方法炮制时，草乌中各含量的变化较稳定，但人力、物力、财力消耗大，且根据口尝的方法鉴定炮制终点的随意性比较大，所以对草乌的炮制进行全面的研究是当务之急参考文献〔1〕侯家玉,方泰惠主编.中药药理学〔M〕.北京:中国中医药出版社,2007,3(10):1141〔2〕龚千锋主编.中药炮制学〔M〕.北京:中国中医药出版社,2007,91:293-2961 〔3〕吴皓，蔡宝昌 中药炮制学实验〔M〕北京：中国中医药出版社，2010:70-72第二篇：决明子炮制前后化学成分变化研究 4700字DOC格式论文，方便您的复制修改删减决明子炮制前后化学成分变化研究（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】 目的研究决明子在炮制前后化学成分的整体变化，寻求炮制增效的物质基础，揭示炮制机理。
方法取决明子生品和炮制品，分别用甲醇和水提取，将提取液进行高效液相色谱分析比较决明子生品和炒制品醇提液和水提液的色谱图结果决明子炒制品醇提液中，有1种原有成分消失，产生了2种新成分，同时有1种成分含量显著下降，有1种成分含量显著上升;决明子炒制品水煎液中，产生了3种新的成分，同时有3种物质的含量显著下降，有2种物质含量显著上升在醇提液和水提液中都有同一种新成分产生结论决明子炮制后缓和药物性能，增强疗效的物质基础很可能是药性猛烈的成分(蒽醌类)被部分破坏，含量减少或转变成了新的成分，因而缓和药性;同时炒制更利于一些成分溶出，其含量增加而致疗效增强关键词】 决明子;高效液相色谱;化学成分;炮制炮制是中药的一大特色[1]中药炮制是根据中医药理论,依照辨证施治的需要和药物自身的性质以及调剂、制剂的不同要求所采取的一项制药技术中药成分复杂，常常一药多效，但中医治病往往又不是DOC格式论文，方便您的复制修改删减要利用药物的所有作用，而是根据病情有所选择这样就需要通过炮制对药物原有的性能予以取舍，权衡损益，使某些作用突出、某些作用减弱，即改变药物的性能，力求符合疾病的实际治疗要求如降低或消除药物的毒性或副作用[2，3]，改变或缓和药物的性能，增强药物的疗效等[4]。
从现代科学角度来分析，中药炮制过程中疗效的提高、毒性的降低及药性的改变必然有其发生物质基础，这就应该是药物内部化学成分发生了变化，物质基础改变了，药性自然改变多年来对中药的炮制作用的机理进行了大量研究,取得了很多重要成果[5，6]例如马钱子的炮制作用研究，其制后的减毒作用是由于其内含有的毒性成分士的宁碱受高温破坏易分解，而使其毒性降低再如大黄、附子、乌头、巴豆的炮制研究等等但是以往的研究都是以中药中的有效成分或者毒性成分作为指标来探讨中药炮制的机理中药的作用不仅与所谓的有效成分有关,与其他共存成分的关系也很密切中药的毒性不仅与所谓的毒性成分有关,很可能也与其他成分有关况且有些中药的有效成分或毒性成分尚不清楚因此研究中药炮制的机理不仅仅应考虑某个成分或者某几个成分,而应该考虑整体成分,研究炮制对中药整体成分的影响,这样才能比较全面的评价炮制对中药活性、毒性、药性等方面的影响,揭示炮制的物质基础及其变化机理[7]本项研究以决明子为例[8]，应用高效液相色谱研究其炮制前后整体化学成分的变化，为中药炮制原理深入研究作方法学方面的探索，进而揭示中药炮制的科学内涵《本经》曰：“决明，味苦性寒，可泄热;甘咸走血，可益阴”。
可见生决明苦寒，甘咸，强于清泄肝火，又兼益肾阴，DOC格式论文，方便您的复制修改删减且其性质凉润，又有清热润通便之效而决明子经炒制后寒泻，凉润之性大为缓和，清泄肝火，润肠通便之力减弱，而长于平肝养肾 1仪器与材料1.1仪器岛津LC-10A高效液相色谱仪，配二级管阵列检测器，色谱柱phenomenex C18(4.0 mm×25.0 mm，5μm )1.2试剂甲醇(色谱纯)，美国Fisher公司，水为二次蒸馏水1.3药材饮片生决明子,炒决明子由西安市药品检定所谢志民研究员提供其中炒决明子是其按照2005版《中国药典》炮制标准制备得到的1.4色谱条件色谱柱为phenomenexC18 ; 流动相为甲醇-水(1∶2); 流速0.8 ml/min; 检测波长230 nm(决明子); 柱温30℃ 2方法2.1样品的提取与分析2.1.1炒决明子醇提取样品精密称量炒决明子2 g，加入10 ml甲醇溶解，室温下放置2 h，再超声波振荡提取20 min，过滤、定容到10 ml容量瓶中备用(1号样品)2.1.2生决明子醇提取样品精密称量生决明子2 g，加入10 ml甲醇溶解，室温放置2 h，再超声波振荡提取20 min，过滤，定容到10ml容量瓶中备用(2号样品)。
2.1.3炒决明子水提取样品精密成取炒决明子2 g，加150 ml蒸馏水煮沸提取1 h，趁热过滤，减压浓缩至干加适量甲醇溶解(必要时可用超声波振荡助溶)定容至10 ml容量瓶中备用(3号样品)DOC格式论文，方便您的复制修改删减2.1.4生决明子水提取样品精密称取生决明子2 g，加150 ml蒸馏水煮沸提取1h，趁热过滤，浓缩至干加适量甲醇溶解(必要时可用超声波震荡助溶)定容至10 ml，容量瓶中备用(4号样品)将1～4号样品依次上。