谷胱甘肽对山葵愈伤组织诱导效 应的观察学院 成人教育与职业技术学院 专业 园林技术专业学号 08456057姓名 伊东晓指导老师 胡孝义汇报内容1. 实验目的及意义 2.技术路线 3.实验材料与方法 4.实验结果及分析 5.小结与结论 6.研究展望1.实验目的及意义Ø实验目的Ø 研究在山葵组织培养 中，谷胱甘肽对外植体 的愈伤组织诱导、发育 的影响Ø实验的意义Ø 谷胱甘肽对促进细胞 分裂有很大作用，如果 实验成功，则能培育出 更为茁壮的外植体2.实验的技术路线Ø通过方案对比的方法，即基本培养基（J1）和在J1 中分别加入硝酸银（AgNO3）、谷胱甘肽（GSH）、水 解酪蛋白（CH）构成的优化方案（YH），即YH1 、 YH2、YH3，通过对愈伤组织形态的观察，获得初步 结论3.实验材料与方法Ø实验材料 实验中选择的外植体是山葵的叶 片及叶柄Ø外植体消毒 将外植体放在灭菌纯水中冲洗 2~3次，用2.75%酒精浸泡30s，再用灭菌纯水 冲洗3~4次，用0.1%升汞浸泡10min，最后再 用灭菌纯水冲洗3~4次即可放在超级工作台上 备用。
Ø培养条件 培养温度为26摄氏度，暗光培养 Ø培养基配比Ø基本配方（J1）固体1/2MS+ 1.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA+ 3%蔗糖+ 0.7%AgarØ优化配方1（YH1）基本配方+ 3 mg/L AgNO3（ 硝酸银） Ø优化配方2（YH2）基本配方+0.1 mM GSH （谷 胱甘肽） Ø优化配方3（YH3）基本配方+500 mg/L CH（水 解酪蛋白） 4、结果与分析Ø实验结果Ø J1 外植体叶片及叶柄均长出了愈伤组织，但没有明显的 粗大，生长的速度也一般，没有褐化现象的产生Ø YH1 外植体叶片及叶柄长出愈伤组织的速度较快，并且 比J1中的要大，基本无褐化现象Ø YH2 外植体的叶柄由于谷胱甘肽的作用变得粗大，但是整 体上愈伤组织不多且较小，长势也较慢，并且有褐化现象的 产生Ø YH3 外植体基本未长出愈伤组织，只是膨大，并且 褐化 严重Ø在图片中可以 发现，叶柄由 GSH作用变得粗 大,但叶片长出 愈伤很小，褐 化很多，叶片 膨大也不厉害Ø基本培养基J1与加 入GSH的优化培养基 YH2相比，J1中叶柄 长出的愈伤组织较 多，但不及YH2中的 外植体粗大；YH2中 愈伤组织较少，但 是叶柄因了GSH的作 用很粗大，不过， 有褐化现象出现。
Ø优化方案1即YH1中愈 伤组织长势良好，而 且也无褐化现象的出 现；Ø优化方案2即YH2中愈 伤组织少而且生长缓 慢，并且有褐化产生 ，不过叶则比较粗大 Ø优化方案2（YH2 ）有愈伤组织产 生，叶柄粗大， 但又少量褐化产 生；Ø优化方案3（YH3 ）褐化严重，叶 片、叶柄均只有 膨大，基本未长 出愈伤组织5、结论（1）添加了AgNo3、GSH、CH的优化培养基从整体 讲比基本培养基对愈伤组织的诱导、外植体的生长 作用更明显 （2）在三种优化方案中，YH1（加入AgNo3）所起到 的效果是最好的，不仅能产生愈伤组织，而且也没 有明显的褐化现象 （3）YH3（加入CH）实验结果是最差的，外植体基 本上未长出愈伤组织，并且褐化现象严重 （4）YH2（加入GSH）实验结果差强人意，外植体能 够长出愈伤组织，也较粗大，但是褐化现象也挺严 重 讨论v谷胱甘肽在组织培养中对促进细胞分裂有明显的作 用，但是，实验过程中却易造成污染，出现褐化现 象因此，如果能很好的解决好这一问题，将会节 约很多时间，收到很好的效果，这是在以后的工作 中需要探讨的并努力的6.研究展望v谷胱甘肽被誉为“抗氧化物之王”，具有抗氧化作用 和整合解毒作用，对促进细胞分裂也有极重要的作 用；山葵是一种高级辛香调味品，发展山葵产业具 有很高的经济价值和社会价值。
v运用组织培养技术大力发展山葵产业，是必由之路 ，亦是捷径致谢v首先，要感谢胡孝义老师，他在我们论文写作过程中给予了 极大的帮助，指导，同时，也正因为有了老师的严格要求， 在论文写作过程中我们也有许多深刻的记忆v 还有大杨店实验室里的许工程师，她也给予了我们许多帮 助v 同时，也要谢谢各位给予过我帮助的同学们：邬萌萌师姐 ，小熊师姐，小郑师姐，崔珺同学，许红同学，叶洋国同学 ，葛德平同学，汪苗慧同学，彭嘉琪同学等等，是他们的帮 助与鼓励，让我能有饱满的精力来完成论文的写作，谢谢！v 最后，要感谢三年来一直关心支持着我们的院里的各位领 导及老师们v 感谢所有关心支持着我的人们！。