制作：蒋教授制作：蒋教授 四川农业大学动物免疫研究室动物微生物学与免疫学教学安排实验地点：动科大楼403教 材：兽医微生物学，陆承平主编，第四版(2007)参 考 书：1）郭万柱等主编：动物微生物学，四川科技出版社2）崔治中,崔保安主编：兽医免疫学，中国农业出版社第一版(2004)3）刘玉斌等：动物免疫学实验技术，吉林科学技术出 版社 课堂教学内容课堂教学内容绪 论 1第一篇 总 论 9第二篇 免疫学知识 16第三篇 细菌学各论 10第四篇 病毒学 10第五篇 真菌学 2实 验 27自 修 5合 计 48+27+5=80绪论一、微生物概念个体微小、结构简单、多细胞或单细胞甚至无细胞结构、繁殖快、分布广。
9大类：细菌、真菌（霉菌和酵母菌）、放线菌、螺旋体、支原体(霉形体)、立克次氏体、衣原体、病毒、朊病毒二、微生物学发展历史（一）形态学时期（17世纪后叶~19世纪中叶）：荷兰吕文虎克（ 1676 ）：显微镜 巴斯德的曲颈瓶实验（1861）：否定生物自然发生论微生物的开山鼻祖:吕文虎克巴斯德的著名曲颈瓶实验（二）生理学及免疫学时期： （1870~1920）巴氏消毒法厌氧菌发现（厌氧生命活动过程）疫苗研制（炭疽杆菌苗、狂犬病疫苗）（三）现代微生物学时期： （1920~至今）电镜认识微生物的亚细胞结构，发现病毒微生物的分离、培养、鉴定方法；酶标技术、细胞培养技术、单克隆技术；微生物核酸序列测定、核酸探针技术，PCR技术、基因工程研究，第一篇第一篇 总总 论论第一章 细菌形态结构 第二章 细菌的生长繁殖 第三章 细菌生态学 第四章 消毒、灭菌与动物微生物实验室生物安全 第五章 细菌感染和致病机理 第六章 细菌的分类第一章 细菌形态结构第一章 细菌形态结构第一节 细菌的形态第一节 细菌的形态第二节第二节 细菌的基本结构细菌的基本结构第三节 细菌的特殊结构第三节 细菌的特殊结构第一节 细菌的形态一、细菌的大小以最适温度、最适培养基培养的幼龄细菌为标准。
以微米（um）为单位球菌：直径杆菌和螺旋菌：长＊宽二、细菌的基本形态及变化（一）球菌1、双球菌2、四联球菌3、八叠球菌4、链球菌鸡血中兽 疫链球菌5、葡萄球菌（二）杆菌1、单在杆菌（大肠杆菌）2、链杆菌（炭疽杆菌）3、芽胞杆菌（破伤风梭菌）4、梭菌（魏氏梭菌）5、球杆菌（布氏杆菌）6、分枝杆菌（结核分枝杆菌）7、棒状杆菌（化脓棒状杆菌）8、弯杆菌（空肠弯曲菌）（三）螺形菌1、螺菌：几个弯曲2、弧菌（霍乱弧菌）：一个弯曲三、细菌的群体形态-菌落细菌均进行无性分裂繁殖，分同形分裂和异形分裂1、菌落概念：一个细菌在固体培养基上生长繁殖，形成肉眼可见的细菌群体堆积物又称“克隆”，根据菌落数量，进行细菌计数，用菌落形成单位（CFU:colony forming unit)表示2、菌落特征：菌落大小、 菌落形状、边缘形状、表面形状、隆起度、颜色、透明度、粘稠度、血平板上溶血情况细菌繁殖细菌菌落特征大肠杆菌粉红色菌落第三节 细菌的基本结构细胞壁细胞膜细菌的基本结构 细胞质核体细胞内含物细菌细胞结构示意图一、细胞壁（一）结构1、革兰氏阳性菌G+菌的细胞壁无分层结构 40~95%为肽聚糖(peptidoglycan)，磷壁酸(teichoic acid:TA;包括壁磷壁酸wall teichoic acid和脂磷壁酸lipoteichoic acid)、外膜蛋白（outer membrance protein:OMP)等充满于网状结构之中。
肽聚糖由N—乙酰葡萄糖胺，N—乙酰胞壁酸形成网状结构TA是特异的表面抗原革蓝氏阳性菌细胞壁2、革兰氏阴性菌细胞壁具有分层结构 外膜由外膜蛋白（OMP）（包括微孔蛋白、脂蛋白）、脂多糖（LPS) 构成；周质间隙（外膜与细胞膜之间的间隙）中有1-2层肽聚糖及多种蛋白酶、核酸酶肽聚糖占细胞壁干重的10~20%LPS由类脂A、核心多糖、侧链多糖组成类脂A是内毒素的主要毒性成份，侧链多糖为菌体O抗原革蓝氏阴性菌细胞壁肽聚糖结构（二）革兰氏染色原理1、染色步骤结晶紫（紫色） 1－2分钟，冲洗革兰氏碘液 2－3分钟，冲洗95％酒精 30－60秒，冲洗 稀释石炭酸复红（红色）10－30秒，冲洗镜检G+菌染成紫色结晶紫与G氏碘液形成复合物充斥于肽聚糖网状结构之中95%的酒精具有收缩肽聚糖和溶解脂质作用，收缩肽聚糖使网眼缩小，溶解脂质使网眼扩大G + 菌因肽聚糖多（40~60%） 、脂质少，网眼缩小的力量大于网眼扩大的力量，最终使网眼缩小，将紫色复合物牢固固着，不被洗脱稀释石炭酸复红不被染上，故呈紫色革蓝氏阳性菌G—菌染成红色G—菌肽聚糖少，脂质多；95%酒精脱色时，收缩肽聚糖使网眼缩小的力量小于溶解脂质使网眼扩大的力量，最终网眼扩大；结晶紫与G氏碘液的复合物不能固着而被脱去，然后被红色的稀释石炭酸复红染色而呈红色。
革蓝氏阴性菌（三）功能1、定形作用2、保护作用3、选择性屏障作用4、对鞭毛支撑作用5、分裂繁殖上起作用（四）原生质体与原生质球G+菌经青霉素或溶菌酶处理，完全失去细胞 壁，仅由细胞膜包围细胞质的菌体，称为原生质 体（protoplast)G-菌经溶菌酶处理，仅能失去细胞壁内层的 肽聚糖，形成仍有外膜包围的菌体，称为原生质 球（spheroplast)将两个不同的原生质体或原生质球融合，生 成一个细菌的技术，称为原生质体融合技术二、细胞膜1、结构：脂质双层结构亲水基向外、疏水基向内 2、功能：渗透屏障、参与菌体新陈代谢、参与细菌分裂繁殖 3、间体：细胞膜向内凹陷形成的囊状或管状物细胞膜结构模式图细胞膜结构三、细胞质粘稠、透明胶体主要成分是水、蛋白质、类脂、多糖、核酸及少量无机盐四、核体与质粒1、核体：无核膜、核仁、无线状染色体，属原核细胞细长、共价闭合、环状双链的大型DNA分子一搬均是单倍体与真核细胞染色体相似，有将细菌核体称为细菌染色体的有的致密，呈球状、卵形或哑铃形；有的疏松，似网状或海绵状2、质粒：细菌核体外的环状双链、小型DNA分子与细菌的生命无关，但携带一定量的基因，如抗药性基因。
核体五、细胞内含物1、异染颗粒：多聚偏磷酸盐贮存磷酸盐2、类脂质：β-羟基丁酸多聚体或脂肪小滴，贮存碳源和能源 3、肝糖和淀粉粒：贮存碳源和能源碘染色肝糖呈红棕色，淀粉呈兰色4、空泡和气泡空泡内含液体，调节细胞渗透压气泡内含气体，降低菌细胞比重，浮于液体表面生长，形成菌环或菌膜5、核糖体：由2/3的核糖核酸rRNA和1/3蛋白质组成小颗粒样物质，蛋白质合成场所细菌rRNA有5S、16S、23S三种，各细菌种属的16S rRNA高度保守，常用于细菌鉴定由50S和30S两个亚基组成，有些药物，如红霉素、链霉素，能与亚基结合，干扰蛋白合成，杀死细菌第三节 细菌的特殊结构一、荚膜（capsule)一些细菌在生活过程中在细胞壁外面产生一种黏液样物质包围整个菌体，称荚膜多个细菌的荚膜融合成一团胶状物，内含多个细菌称为菌胶团1、组成：90%水分，有的含多糖，有的含多肽2、形成：动物体内或营养丰富（加血、血清或腹水）的培养基上初代分离易形成荚膜3、功能保护功能；贮存碳源和能源；处理代谢废物；具有抗原性4、观察：不易染色，普通染色法，只见菌体周围一圈透明环，特殊荚膜染色法，可染上色 细菌荚膜细菌荚膜 二、细菌S层（s-layer)是某些细菌的特殊表层结构，完整包围菌体，由单一蛋白质亚单位组成，规则排列，呈类晶格结构。
许多致病菌或菌株有S层功能：分子筛、离子通道、类荚膜作用三、鞭毛(flagellum)细菌细胞外面的毛状的、波浪状的丝状物比菌体长细，光镜下不易见，用特殊鞭毛染色法，人为增大其直径方能见到 1、组成：蛋白质（鞭毛素），少量糖类、脂类 2、功能：鞭毛收缩、菌体运动 3、类型：单端单鞭毛、单端丛鞭毛、双端单鞭毛、双端丛鞭毛 、周鞭毛 各种鞭毛单端单鞭毛单端丛鞭毛单端丛鞭毛周鞭毛周鞭毛微免课件音影\总论音影\鞭毛类型.swf四、菌毛(pilus)位于菌体外，比鞭毛短细较硬的毛发状细丝1、化学组成：空心的蛋白质管2、分类：稍长而数量少的（1~4根）为性菌毛，其余为普通菌毛3、功能吸附功能：吸附于寄主细胞吸取营养，致病菌失去菌毛就失去致病性彼此黏附：利于表面生长，以吸取更多氧气在表面形成菌膜凝集动物红细胞性菌毛在细菌接合传递中起通道作用菌毛菌毛性菌毛五、芽胞(spore)细菌在生长发育的一定阶段，胞浆浓缩而成 的一个内生孢子称芽孢1、形成旺盛生长后，培养基中营养物质耗尽时形成2、性质强大抵抗力；只需极少营养物质（休眠）；不易染色3、大小、形状、位置大小：比菌体小（炭疽）或比菌体大（梭菌）形状：圆形、卵形或椭圆形位置：菌体中央、偏端、极端4、出芽：条件适宜，出芽形成新的细菌。
一个芽孢只能产生一个菌体，不是细菌繁殖器官非染色芽胞染色芽胞第二章 细菌的生长繁殖第二章 细菌的生长繁殖第一节 细菌细胞的代谢过程 第二节 细菌的生长繁殖 第三节 细菌的人工培养 第四节 细菌新陈代谢及其产物 第五节 细菌生化反应第一节 细菌细胞的代谢过程一、物质摄取1、单纯扩散：高浓度到低浓度，不需能量O2 、CO2、H2O、甘油等小分子物质2、促进扩散：与膜蛋白暂时合，构象变化而促 进物质扩散入细胞内，不需能量3、主动运输：低浓度到高浓度泵入细胞内，需 要能量4、基团转位：物质在运输时受到化学修饰而输入细胞二、生物合成从摄取的物质合成多种氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸及其他大分子所需物质磺胺类药物干扰细菌所需的叶酸的合成而抑菌三、聚合作用细菌DNA的聚合作用称为复制，新生霉素可抑制细菌DNA复制过程中所需促旋酶的活性而抑菌RNA的转录、蛋白质的翻译四、组装自我组装方式：鞭毛、核糖体以此方式进行指导组装方式：表面膜结构以互方式进行杆菌肽、万古霉素干扰细菌细胞成份组装所需的载体的功能；多粘菌素影响细胞膜的级装第二节 细菌的生长繁殖（一）缓慢生长期：活菌数不增加，甚至稍减少 （二）对数生长期：活菌数以几何级数增加。
（三）稳定期：繁殖的活菌数与衰亡菌数相当 （四）衰亡期：活菌大量衰亡第三节 细菌的人工培养一、培养基基础培养基与营养培养基固体、半固体、液体培养基鉴别培养基、选择培养基、厌氧培养基二、气体：氧气、CO2、厌氧三、温度：嗜冷菌：10－20oC嗜温菌：20－40oC嗜热菌：50－60oC四、酸碱度：多数病原菌适于PH7.2-7.6第四节 细菌新陈代谢及其产物一、细菌呼吸1、概念细菌通过呼吸酶的作用，以氧化还原的方式使营养物质还原而获得能量，并形成中间产物的过程2、细菌呼吸类型（1）厌氧呼吸：脱氢酶使基质中脱下的氢，经辅酶传递给氧以外的物质2）需氧呼吸：脱氢酶使基质中脱下的氢，经辅酶传递给氧化酶活化的氧，并形成水3）兼性厌氧呼吸：既有脱氢酶又有氧化酶，有氧环境下进行需氧呼吸，无氧。