细菌鉴定一、标本的处理：1、先按标准操作规程（SOP）对标本进行接种（一般种普通血平板和选择性麦康凯平板；真菌-沙保弱；链球菌-巧克力平板，CO2温箱；结核菌-罗氏;粪-SS）o一般细菌置于35°C培养24h;真菌置于30°C培养2、后将标本涂片，进行革兰染色，判断是革兰阴性或阳性，杆状，球状，短杆，球杆及弧状革兰氏染色液-在细菌学里最普遍的染色方法步骤G(-)G(+)•染色前，所有细胞是透明的0°0•结晶紫着色後用碘增加染料与菌体结合■・■・•乙醇从G(-)菌体洗脫结晶紫0°■・•用复红液复染，革兰氏阴性菌呈粉红色，革兰氏阳性菌呈兰紫色••吊兰染色原理:检件细储细胞壁的渗透性革兰阳性单层厚肽聚糖细胞壁革兰阴性不紧密外壁层｛透乙醇）薄内壁层肽聚糖革兰氏染色液2（ColorGram2）•特性o稳定化的碘液PVP（聚氯乙烯毗咯烷酮）可以防止因碘挥发而变质，同时也增强了媒染效果t更容易分别g（+）及G（-）mO高质量的结晶紫和复红，无沉淀二、根据菌落形态，颜色，光滑与否，边缘，大小，是否有溶血环等初步判断所属菌属三、生化鉴定（最主要的依据）俸状杆鬧朋挨状蘇杆WI界抱杆菌磷李斯特肾属丙戦杆菌廣乳捋菌属丹議罐激展金黄色—腐生菌薊菌赚菌慚萄球菌立溶血：肺炎讎球阳草堀色轻球蔚晦血;牝駆性链球前无乳讎球菌寻帮血；肠球菌离细菌^6-2临床常见革兰阴性菌的一盟鉴定盅程区驗阳性谎整嗜亂杆茵眸炎军团繭百日咳證待II3"~~、¥嗖不动杆■、臭崔舗:十飞卡枪跟枪瞞Mutjiutai酔鯛巒布髀曲屈上热捷弗05WS—-一助琳尔壺閑左获巴斯播菌巴通体属定向实验（最重要两实验）触酶试验用丁分辨葡萄球菌及链球菌API微生物鉴定系统生理生化鉴定：根据微生物对各种生理条件（温度、pH、氧气、渗透压）、生化指标（唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性）代谢反应进行分析，并将结果转化成软件可以识别的数据，进行聚类分析，与已知的参比菌株数据库进行比较，最终对未知菌进行鉴定的一种技术。
杆菌完幣的鉴定谱微主物鉴定革兰氏革兰氏杆菌生物梅里埃API试剂类型• API20E革兰氏阴性杆菌鉴定「• API20NE非发酵菌鉴定• APISTAPH葡萄球菌及微球菌J常用5种• APISTREP链球菌鉴定• APICORYNE棒状杆菌• API20CAUX酵母菌• API20A厌氧菌APILISTERIA李斯特菌APICAMPY弯曲菌属APICH芽胞杆菌/乳酸杆菌CMWJS±W革兰氏阳性杆菌分类延长状杆閑细小不透光曲落更小脱色含佇旦染颗粒slightdiscoloration(granulations)粽状杆菌鉴定孚斯特菌鉴定APICoryneAPiListeria愆球村菌20-25"C右动力3厂C龙动力氈駿斎緊定API50CHL芽抱菌鉴定API50CHB加遇指定的①化乱内石腊油（容比125ml）眾盖在指定小孔上PSIpettes接和擁挑繭落，泯匀及按种三、药敏试验（辅助鉴定及指导临床用药）最常用的纸片扩散法即K-B法原理：该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。
同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关结果分为敏感S、耐药R及中介I利用某些菌对某些药物天然耐药进而辅助鉴定结果正确与否，如嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南（碳青霉烯类）天然耐药/\/\/V菌落特征镜下形态生化反应药敏选择颜色、G+c结合菌落特征结合菌落特征形状、G+b和镜下形态和镜下形态•透明度、G-c选择相应生化选择药敏试验'母逖滑、砸润或干燥、G-bIJ反应「丿V丿。