板蓝根药材质量生物评价与控制的方法和标准.doc板蓝根BaniangenRADIX ISATIDIS本品为十字花科植物茯蓝Tsatis indigotica Fort.的十燥根秋 季采挖，除去泥沙，晒干性状】 本品呈圆柱形，稍扭曲，长10〜20 cm,直径0・5~lcm 表而淡灰黄色或淡棕黄色，有纵皴纹及支根痕，皮扎横长根头略膨 大，可见暗绿色或暗棕色轮状排列的叶柄残基和密集的疣状突起体 实，质略软，断面皮部黄白色，木部黄色气微，味微甜后苦涩鉴别】 （1）本品横切面：木栓层为数列细胞韧皮部 宽广，射线明显形成层成环木质部导管黄色，类圆形，直径约至 80 um；有木纤维束薄壁细胞含淀粉粒2）取本品水煎液，置紫外光灯（365 nm）下观察，显蓝色荧光2）取本品粉末0.5 g,加稀乙醇20 ml ,超声处理20分钟，滤过, 滤液蒸干,残渣加稀乙醇1 ml使溶解,作为供试品溶液另取板蓝根 对照药材0.5 g,同法制成对照药材溶液再取精氨酸对照品，加稀 乙醇制成每1 nil含0. 5 mg的溶液，作为对照品溶液照薄层色谱法（附录VI B）试验，吸取上述三种溶液各1〜2 U1,分别点于同一 硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰酷酸-水（19:5:5）为展开剂，展开， 取出，热风吹干，喷以即三酮试液，在105C加热至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点3）取本品粉末lg,加80%甲醇20ml,超声处理30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇1沁使溶解，作为供试品溶液另取板蓝根对 照药材l.Og,同法制成对照药材溶液再取（R, S）-告依春对照品， 加甲醇制成每lml含0. 5 mg的溶液，作为对照品的溶液照薄层色 谱法（附录VI B）试验，吸取上述三种溶液各5~10 ul,分别点于 同一硅胶GF254薄层板上，以石油醴（60〜90C）—醋酸乙酯（1:1） 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视供试 品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点检查】 水分 不得过15.0% （附录IX H笫一法）总灰分 不得过9.0 % （附录IX K）o酸不溶性灰分 不得过2.0 % （附录IX K）浸出物】 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录X A） 测定，用45%乙醇作溶剂，不得少于25.0 %o【含量测定】（R,S）-告依春 照高效液相色谱法（附录VI D）测 定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 以甲醇一0.02%磷酸（7:93）为流动相；检测波长为245 nmo理论板 数按（R, S） -告依春峰计算应不低于5000o对照品溶液的制备 取（R, S）-告依春对照品适量，精密称定，加甲醇 制成每1 ml含40 u g的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末约1 g,精密称定，置100 ml圆底 瓶中，精密加入水50 ml,称定重量，煎煮2小吋，放冷，再称定重 量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10~20 U1,注入 液相色谱仪，测定，即得本品按干燥品计算，含（R,S）-告依春（C5H7N0S）不得少于0.020 %生物测定 依据红细胞与凝集活性成分结合后，在适宜的电解质、温 度、pH条件下，产生凝集反应，通过比较反应终点，测定供试品的 红细胞凝集活性供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约5g,精密称定，置 圆底烧瓶中，精密加入乙醇50ml,称定重量，充分搅拌，浸泡30分 钟，加热回流40分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量, 摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml,置80〜90C水浴上蒸干，残渣 加PBS 5ml使溶解，以每分钟6000转离心5分钟，取上清液用0. 22um 的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得（每lml相当于含药材0. 5g）o测定法 在“V”形、底角呈90的96孔微量板上，用PBS或0.9% 氯化钠注射液将供试品溶液做2倍系列稀释，每个浓度做双孔平行， 每孔加入50U1,最后1孔加入PBS或0. 9%氯化钠注射液50 U 1作为 阴性对照。
再向每孔加入1%红细胞混悬液5011 1,轻拍微量板30秒 混匀，4C静置2小时后观测结果结果判定将微量板置于白色背景之上进行肉眼观察，阴性管的红细 胞应集中在孔底中央，形成一个小团，边缘光滑，将板倾斜片刻，红 细胞如泪滴状滑动将供试品溶液孔与阴性对照孔比较以红细胞均 匀附着在孔壁上，底部仅有少量红细胞者（不超过阴性孔的1/4）判 为阳线（ + ）,其余为阴性（-）以供试品出现阳性的最高稀释倍数为本品的效价如同批供试品溶液 平行孔结果相差在1个以上稀释度吋应重试；相差1个稀释度吋，则 以平行孔结果中出现阳性的较低稀释度为该供试品的效价本品效价应不低于l：8o【炮制】除去杂质，洗净，润透，切厚片，干燥本品呈圆形的厚片外表皮淡灰黄色至淡棕黄色，有纵皱纹切面皮 部黄口色，木部黄色气微，味微甜后苦涩水分 同药材，不得过13.0 %o总灰分 同药材，不得过8.0 % (附录IX K)o【含量测定】同药材，含(R, S)-告依春(C5H7N0S)不得低于0. 030%鉴别】【检查】酸不溶性灰分【浸出物】同药材性味与归经】 苦，寒归心、胃经功能与主治】 清热解毒，凉血利咽用于温毒发斑，舌绛紫暗， 痒腮，喉痹，烂喉丹痂，大头瘟疫，丹毒，痈肿。
用法与用量】9~15 g o【贮藏】 置干燥处，防霉，防蛀注:未统稿)。