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碱性铜盐法测还原糖含量

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碱性铜盐法测还原糖含量_第1页
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碱性铜盐法测还原糖含量目的:掌握碱性铜盐法测还原糖的原理和方法 原理:碱性酒石酸铜甲液和乙液等量混合,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物,加热条件下其可以将还原糖氧化成醛酸,本身还原成氧化亚铜沉淀反应终点用亚甲基蓝指示,其氧化型为蓝色,还原型为无色,还原糖将二价铜全部还原后,稍过量的还原糖则可以把亚甲基蓝还原,由蓝色变为无色,即为滴定终点 试剂 : 碱性酒石酸铜甲液: 称取15g硫酸铜(CuSO4•5H2O)及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL 碱性酒石酸铜乙液 :称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内 乙酸锌溶液 :称取21.9g乙酸锌,加3mL冰乙酸,加水溶解并稀释至100mL 亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4): 称取10.6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100mL 葡萄糖标准溶液(1mg/mL) 精密称取1.000g经过98~100℃干燥至恒量的纯葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸,并以水稀释至1000mL此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖 仪器:碱式滴定管,锥形瓶,电炉 操作步骤 : 1 样品处理 将样品捣碎混匀待用,样品应避免暴露在空气和阳光下,并尽可能迅速地进行分析。

称取约2.5~5g样品,置于250mL容量瓶中,加50 mL水,摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液5mL及亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4)5mL,加水至刻度,混匀静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用 2 标定碱性酒石酸铜溶液 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液,控制在2min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg) 3 样品溶液预测 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,控制在2min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每 两秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积 4 样品溶液测定 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少1mL的样品溶液,使在2min内加热至沸,趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定,直至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。

5 结果计算 按下式计算糖果中还原糖的含量: 还原糖的含量(以葡萄糖计) = m1/m2×v/250×1000 *100 式中: m1—10mL碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5mL)相当于还原糖(以葡萄糖计)的质量,mg; m2—样品质量,g; V—测定时平均消耗样品溶液体积,mL 6精密度 同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。

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