血 栓 与 止 血 检 验第一节 血栓与止血的筛选检验一、一期止血缺陷的筛选检验二、二期止血缺陷的筛选检验三、纤溶活性增强的的筛选检验四、抗凝物质检验一期止血的筛查检验出血时间测定血小板计数束臂试验血块收缩试验 毛细血管抵抗力试验血小板计数 (platelet count , PC或plt)正常值:(100~300)×109/L危险PC<20×109/L可引起自发性出血出 血 时 间 测 定bleeding time,BT一、原理:测定在皮肤受特定条件外伤后,出血自然停止所需的时间即为出血时间此过程反映了毛细血管与血小板的相互作 用,包括内皮下组织与血小板粘附(通过vWF 的作用)、血小板的聚集和释放等反应,以 及PGI2与TXA2的动态平衡二、方法 Ivy法、出血时间测定器法(卫生部推荐方法)三、试剂与器材:1、血压计,秒表,干净滤纸2、出血时间测定器四、操作: 1、 血压计袖带缚于测定上肢的上臂,加压并维持在40mmHg,儿童减半2、在肘前窝下5cm处的尺侧做局部消毒 后,将测定器垂直贴于皮肤表面,按下按钮,同时启动秒表,移开测定器3 、每隔30s,用干净滤纸吸去流出的血液,直 至流血自然停止,并记录秒表读数。
五、参考值 : 2.5-9.5 min六、临床意义:延长:1、出血时间延长见于血小板减少症 2、 血小板功能异常3、血管性血友病4、血管壁异常5、某些严重的凝血因子缺乏缩短:高凝状态和血栓性疾病血小板检测一、血小板生存时间检测 二、血小板相关抗体检测 三、血小板粘附试验 四、血小板聚集试验 五、血小板第3因子有效性检测 六、血小板膜糖蛋白检测 七、血小板活化指标检测(血浆β-TG、PF4、血 小板P选择素检测)诱聚剂PPPPRP血 小 板 聚 集 试 验 platelet aggregation tset,PAgT临床意义:血小板无力症、巨大血小板综合症、血小板贮存池病、低(无)纤维蛋白原血症、肝硬化、使用血小板抑制剂等高凝状态、血栓形成性疾病、糖尿病、口服避孕药、人工瓣膜移植术、吸烟等聚集率减低聚集率增高质量控制:1.采血要顺利,避免组织液混入,抗凝剂使用合理(不用 EDTA抗凝)2.采集后3h内室温下完成3.试验前十天停用一切抑制血小板聚集的药物;试验前禁食高脂类食物4.注意PRP:800~1000r/min离心10minPLT(200~400)X109/LPPP :3000r/min离心20minPLT<20X109/L血 小 板 粘 附 试 验platelet adhension test,PAdT原理:受检者血液一定速度通过一定量玻璃珠的塑料管,测定通过玻璃珠前后血液中血小板数的差值,即为粘附于玻珠和塑料管的血小板数,由此可计算出其占血小板总数的百分比,即为血小板粘附率。
方法:玻球法、玻璃滤器法、玻珠法临床意义:血管性血友病、巨大血小板综合症、血小板无力症、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血小板药物等见于血栓前状态和血栓性疾病、妊高症、口服避孕药等粘附率减低粘附率增高二期止血缺陷的筛选检验全血凝固时间测定活化部分凝血活酶时间测定血浆凝血酶原时间测定活 化 部 分 凝 血 活 酶 时 间 测 定activated partial thromboplastin time,APTT一、原理APTTCa2+脑磷脂白陶土Ca2+脑磷脂部分凝 血活酶二、操作(一)APTT手工法(试管法)血浆0.1ml+APTT试剂各0.1ml +CaCl20.1ml (混匀计时)结果观察:缓慢倾斜试管,观察液体流动状态,流动 停止停止计时参考值 25∼45s(二)仪仪器法37℃水浴5min37℃温浴APTT延长缩短因子VIII、IX、XI活性减低高凝状态三、临床意义肝素抗凝监测APTT纠正试验于患者血浆中分别加入1/4 的正常新鲜血 浆、硫酸钡吸附血浆、正常血清,再作APTT试验硫酸钡吸附血浆 VIII、XI、XII正常血清 IX、XI、XII新鲜血浆 VIII、IX、XI、XII 血友病甲血友病乙FⅪ缺乏正常血浆硫酸钡吸附血浆(缺Ⅸ)正常血清(缺Ⅷ)APTTAPTT纠正试验纠正试验--------血友病血友病纠正不纠正纠正纠正纠正纠正不纠正患者血浆纠正纠正凝血酶原时间测定Prothrombin time ,PT一、原理Ca2+脑磷脂PT组织因子Ca2+ 磷脂1、直接报告患者及正常对照的PT秒数2、报告凝血酶原时间比值(PTR)PTR=受检者PT(秒)/正常对照PT(秒)3、报告国际标准化比值(INR) INR=PTRISI二、报告方式PT延长缩短因子II、V、VII、X、Fg活性减低高凝状态三、临床意义口服双香豆素类抗凝药物监测要保证止凝血检验的质量必须做好以下十点:v1. 采血须顺利,尽量用大号针头,动作要轻柔; v2. 标本用加盖有刻度标记的塑料试管或硅化管收 集 ;v3. 抗凝剂用109mmol/L的枸橼酸钠,抗凝剂与血液的比例为1:9;当Hct 增高>55% 或40mg/L,见于原发性纤溶症、DIC、M3、应用链激酶等溶栓治疗时。
血浆D-二聚体测定 D-Dimer 一、原理:1、胶乳凝集法2、ELISA法 二、临床意义:1、DIC时呈阳性或明显增高,另见深静脉 血栓、心梗、肺栓塞、重症肝炎等2、可作为原发纤溶和继发纤溶鉴别的重要 依据生理性抗凝蛋白检验一、抗凝血酶检测1、血浆抗凝血酶活性检测2、血浆抗凝血酶抗原检测 二、蛋白C检测1、血浆蛋白C活性检测2、血浆蛋白C抗原检测 三、血浆蛋白S抗原检测 四、组织因子途径抑制物检测病理性抗凝物质检验一、复钙交叉试验二 、凝血酶时间检测及甲苯胺蓝纠正试验三、普通肝素和低相对分子质量肝素检测四、凝血因子Ⅷ抑制物检测五、狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验thrombin time,TT一、原理:凝血酶TT二、结果判断:正常人凝血酶时间一般在16-18s,超过正常对照3s或在20s以上视为延长;如正常对照在20s以上,则超过5s为延长加甲苯胺蓝后TT明显缩短,与未加甲苯胺蓝的TT比较相差5s以上,视为纠正TT延长血浆抗凝物质增多纤维蛋白原异常甲苯胺蓝能纠正甲苯胺蓝不能纠正链激酶、尿激酶溶栓治疗监测指标 纤维蛋白原异常高纤维蛋白原血症为心脑血 管血栓形成的独立危险因素。
量增高严重肝病 营养不良 DIC减低老年人、慢性感染 肿瘤、应激、 口服避孕药期间等。