革兰氏染色的过程

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1、细菌的革兰氏染色,目 的 要 求,学习并掌握革兰氏染色法。 了解革兰氏染色原理。 巩固显微镜的使用方法及无菌操作技术。,实 验 材 料,菌种 参考菌：金黄色葡萄球菌(G+), 大肠杆菌 (G-) 仪器 显微镜 材料 载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、染色缸等 染料 草酸铵结晶紫染色液、卢戈氏碘液、95%乙醇、0.5%番红染色液,涂片制备过程,革兰氏染色的过程制片,制片 初染 媒染 脱色 复染 镜检,主要操作步骤,细水冲洗,结晶紫初染1-2min,碘液媒染1min,95%酒精脱色 20s-30s,蕃红复染 2-3min,细水冲洗,细水冲洗,染色示范,革兰氏染色的基本原理,根据细菌细胞壁的组

2、分和结构不同，通过革兰氏染色法可将所有的细菌区分为两大类G+和G-,革兰氏染色是丹麦医生 C.Gram（革兰）于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法,肽聚糖,脂蛋白,磷壁酸,外膜,革兰氏染色原理.mp4,革兰氏染色成败关键：,酒精脱色，脱色不够将G-转变为G+，脱色过度将G+变成G-； 涂片要均匀、薄； 菌龄影响染色，菌龄老、陈旧的细菌培养物，往往G+转变成G-，一般做革兰氏染色用18小时左右的细菌培养物，不要超过24小时，以免影响染色性。,革兰氏染色.mp4,革兰氏染色注意载玻片要洁净，滴无菌水和取菌不宜过多，涂片要均匀，不宜过厚；热固定温度不宜过高，否则会改变甚至破坏细胞形态；水洗时不要直接冲洗涂面，而应使水从载玻片的一端流下，水流不宜过急，过大，以免涂片薄层脱落。 革兰氏染色结果是否正确，乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节，脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌，脱色过度，阳性菌被误染为阴性菌。,注意事项,实验报告,1绘图说明染色结果。,实验报告,2思考题： 你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？ 你的染色结果是否正确？如果不正确，请说明原因。 进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色出现什么问题？,