【2017年整理】北五味子有效成分提取分离方法的研究进展

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1、【摘要】 概述了近年来常用中药北五味子有效成分的提取分离方法,以利于其进一步的研究与开发利用。 【关键词】 北五味子 有效成分 提取分离北五味子为木兰科植物五味子 Schisandra chiesis(Turcz.)Baill 的干燥成熟果实,主产于我国东北地区,故称北五味子,其以果实和种子入药,有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效。北五味子有效成分为木脂素类化合物,木质素类中生理活性研究最多的是对肝脏有作用的成分,现代将有效成分做成各种制剂,临床主要用于治疗慢性肝炎。但五味子中的主要有效成分五味子乙素存在于种子中1,常与大量树脂状物共存,一般制备过程不易提出,给工业生产造成很大困难,同时也浪

2、费了大量药材。因此,迫切需要能够降低生产成本、提高制剂质量的提取工艺。1 溶剂提取法溶剂提取法是根据中药中各种成分在溶剂中的溶解性质,选用对有效成分溶解度大,对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流法及连续回流提取法等。王成梅2以五味子乙素含量为指标,用正交设计优选醇提工艺:6 倍量 80%乙醇提取 3 次,每次 3 h。袁胜英3以五味子乙素含量为指标,用正交试验法选择五味子提取的最佳工艺:4 倍量 85%乙醇提取 3 h,共提取 2 次。袁海龙等4 以五味子甲素的含量作为考察指标,采用均匀设计法优选出最佳提取工艺:乙醇浓度为 9

3、0%,回流时间为 1 h,固液比为 15。王茹等5采用正交设计安排实验,以五味子乙素、五味子醇甲的含量和出膏率为指 标,考察了溶剂用量、提取时间及提取次数的影响,优选出合理的提取工艺为:以生药重量 10 倍的乙醇回流提取 2 次,每次提取 4 h。李奉勤等6考察了溶剂浓度、溶剂用量、回流时间和 pH 值对五味子中五味子乙素提取效果的影响,采用正交实验法优选出五味子乙素的最佳提取条件:提取溶剂为 85%乙醇、液固比为 51 ,pH 值为 5.5,回流时间为 2 h,五味子乙素含量为291.04 mg/100 g。2 超临界 CO2 萃取法超临界流体萃取技术是以超临界流体(SCF)为溶剂,可应用于

4、多种液态或固态混合物中待分离组分的萃取。CO2 为最常用的一种超临界流体。程康华等7应用超临界 CO2萃取五味子中五味子醇甲,在温度 45、压力 15.0 MPa、时间 180 min 的条件下,五味子醇甲的提取率为 12%,原药材中五味子醇甲的得率为 0.4813%,而乙醇萃取(加 85%乙醇恒温水浴上回流 3 h)原药材中五味子醇甲的提取率为 0.1955%,前者提取率比后者高出 1 倍多。聂江力等8 通过正交设计的实验方法,探讨了超临界 CO2 法萃取五味子果实中木脂素的工艺条件,确定了最佳工艺条件:萃取压力 30 Mpa、温度 50、时间 120 min,总木脂素得率为 1.015%。

5、刘本等9考察了不同温度和压力对超临界 CO2 提取五味子甲素的提取效率的影响。结果表明,在温度为 60,压力为 25.3 MPa 的条件下,有最快的提取速度,最大提取量达 90%以上,并且提取率和夹带 10%甲醇的超临界 CO2 有相近(约 0.5%,w/w)。吴艳玲10等以北五味子提取物出率及其五味子甲素、乙素、总木质素等指标对北五味子乙醇回流提取法、乙醇渗滤提取和超临界流体萃取进行了对比研究。结果显示,虽五味子浸膏率无显著变化,但超临界流体萃取方法总木质素、乙素、甲素的含量均高于传统回流和渗滤提取方法。张怡11研究超临界 CO2 萃取法在北五味提取工艺中的研究,采用正交设计实验法,以北五味

6、子中提取的五味子醇甲总量为评价指标,对萃取温度、萃取压力、分离温度 3 个因素进行考察。优化北五味子粗粉经超临界 CO2 流体萃取的提取工艺为萃取压力 25 MPa,萃取温度 50,分离压力 7 MPa,分离温度 60,萃取 25 h,CO2 流量 15 Kg/h。3 超高压提取法超高压提取法是在常温或较低温度(通常低于 100) 的条件下,对原料液迅速施加1001 000 MPa 的流体静压力,保压一定时间,溶剂在超高压作用下迅速渗透到固体原料内部,有效成分溶解在溶剂中,并在短时间内达到溶解平衡,然后迅速卸压,在超高渗透压差下,有效成分迅速扩散到组织周围的提取溶剂中;同时在超高压作用下,细胞

7、的细胞壁、细胞膜以及细胞内液泡等结构发生变化,细胞内溶物和提取溶剂充分接触,从而达到快速、高效地提取目的12。刘长姣等13用超高压提取法提取五味子总木脂素,利用均匀设计方法确定最佳提取工艺:提取压力 350 MPa,溶剂 70%乙醇水溶液,固液比190 ,总木脂素得率为 3.54%,常规回流提取方法的总木脂素得率为 2.593%,超高压提取更有利于总木脂素的提取。4 超声提取法超声提取技术是超声和传统溶剂提取法相结合,利用超声能来提高萃取率的一项新技术。裴毅等14采用超声提取法提取五味子甲素和五味子乙素,以五味子甲素和五味子乙素含量的均值为指标采用 HPLC 法分析 2 种成分,以提取溶剂、超

8、声时间、超声次数、溶剂用量为因素,采用 L9(34)正交设计表,确定最佳超声提取工艺为:以 8 倍体积甲醇为溶剂,超声提取 3 次,每次 10 min。5 法多索溶剂提取法法多索溶剂是一类新的溶剂系统, 主要有 1,1,1,2四氯乙烷组成,具有不破坏臭氧层、无环境污染、耗能低且常温等优点,可作为五味子甲素这类化合物的提取溶剂。刘本等15用法多索溶剂(phytosol A,B 和 D)提取五味子甲素,结果表明法多索溶剂能有效地提取五味子甲素,提取率为 0.45%,与 10%甲醇调节的超临界 CO2 的提取率 0.48%接近。6 高速逆流色谱技术高速逆流色谱技术是一种不用任何固态载体或支撑体的液液

9、分配色谱技术,目前已成功地开发出分析型、生产型两大类高速逆流色谱仪,可分别用于中药有效成分的分离制备和定量分析。Huang T 等16应用高速逆流色谱分离纯化五味子甲素和五味子乙素,以正己烷甲醇水 (3530 3,v/v) 为溶剂系统,从 100 mg 五味子石油醚提取物中分离得到五味子甲素 8 mg,五味子乙素 12 mg,纯度分别在 98%和 96%以上。Peng J 等17用高速逆流色谱技术分离纯化五味子中五味子醇甲和五味子醇乙。在用 D101 大孔树脂进行初步纯化后,用高速逆流色谱技术,以正己烷醋酸乙酯甲醇水 (10.90.91,v/v) 为两相溶剂系统,从 400 mg 初纯物中分离

10、得到 107 mg 五味子醇甲和 36 mg 五味子醇乙,纯度分别为 99.5%和 99.1%,且用时少于 3 h。综上所述,溶剂提取法的提取率相对其它几种提取方法较低,但以生产成本低、操作简单、适合工业化大生产而广泛应用于生产中。超临界 CO2 萃取法安全无污染且提取效率高,也逐渐被采用,目前研究的也比较多。超声提取法、高速逆流色谱技术、法多索溶剂提取法是提取分离方法中的新技术,是目前研究和发展的方向。【参考文献】1 陈延镛,舒增宝,黎莲娘, 等.五味子的研究北五味子降谷丙转氨酶有效成分的分离和鉴定J.中国科学 A 辑,1976,(1):98110.2 王成梅.正交试验法优选五味子的提取工艺

11、J. 齐鲁药事,2007,26(5):306307.3 袁胜英.正交试验法研究五味子的提取工艺J. 天津中医学院学报,2001,20(1):4546.4 袁海龙,谭锐,李仙逸,等.均匀设计法优选五味子的提取工艺 J. 中国中药杂志,2002,27 (5):355 358.5 王茹,张琰,程建峰,等.五味子活性成分提取工艺的优选 J. 华南国防医学杂志,2005,19 (6):4 6.6 李奉勤,史冬霞,张瑞红,等.五味子中五味子乙素提取工艺研究 J. 中国医药,2006,15 (7):46.7 程康华,刘幸平,朱凯.CO2 超临界液体萃取五味子中五味子醇甲的研究J.南京中医药大学学报:自然科学

12、版, 2001,17(6):363 364.8 聂江力,裴毅,祖元刚.北五味子果实超临界 CO2 萃取工艺的研究J.植物研究,2005,25(2) : 213216.9 刘本,John R Dean.超临界 CO2 流体提取五味子中的五味子甲素J.中国医药工业杂志,2000,31(3):101103.10 吴艳玲,朴惠善.北五味子活性成分提取工艺的研究J.时珍国医国药,2007,18 (5):11761177.11 张怡.北五味子的超临界 CO2 萃取研究J. 中成药,2005,27 (8):880 883.12 Shouqin Z,Junjie Z,Changzhen W.Novel hig

13、h pressure extraction technologyJ .Int J Pharm,2004,278(2):471474.13 刘长姣,张守勤,吴华,等. 超高压技术在五味子饮料加工中的应用J.农业工程学报,2006,22(6):227230.14 裴毅等.正交试验法优选五味子甲素和五味子乙素的超声提取工艺J.国外医药:植物学分册,2007,22(3):111 113.15 刘本,Dean J R,Price R.法多索溶剂提取五味子中的五味子甲素J.中成药,2000,22 (7):507 509.16 Huang T,Shen P,Shen Y.Preparative separa

14、tion and purification of deoxyschisandrin and gammaschisandrin from Schisandra chinensis (Turcz.)Baill by highspeed countercurrent chromatographyJ.J Chromatogr A,2005,1066(12):239242.17 Peng J,Fan G,Qu L,et al.Application of preparative highspeed countercurrent chromatography for isolation and separation of schizandrin and gomisin A from Schisandra chinensisJ.J Chromatogr A,2005,1082(2):203207.

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