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1、XN检测原理,XN机型,基本原理,WNRWDFWPCRETPLT-F通道,半导体激光+流式细胞术+核酸荧光染色,溶血剂：Lysercell WNR 染色液：Fluorocell WNR,WNR散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 WBC, NRBC, BASO 报警信息 PLT Clumps?, NRBC Present, WBC Abnormal Scattergram,原理：WNR通道,New,嗜碱性 粒细胞,淋巴细胞,单核细胞,粒细胞 （中性粒细胞 嗜酸性粒细胞等）,有核红细胞,红细胞,弱,中,强,极弱,极弱,中,中,强,侧向荧光(SFL),前向散射光(FSC),细胞膜通过
2、 溶血,荧光,NRBC为常规报告参数的临床意义,自动修正白细胞计数 新生儿白细胞计数的正确 溶血性贫血病人的诊断、治疗 放化疗病人的治疗监测 重症ICU病人的预后 有效降低推片复检率, 由于在CBC模式下该通道用于WBC测定，因此可以在全体样本中测得NRBC计数，以及由NRBC数修正过的WBC数据。 但是如果遇到白细胞散点图异常，仍然需要显微镜检查 由于采用荧光染色进行检测，红细胞没有被染色，所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响。 没有采用荧光染色的仪器做出来的结果会偏高 卫生部临检中心下发质控品的WBC结果上报： WBC+NRBC#（因为非配套质控品中的白细胞固化比较严重，不能正常染色，部分
3、白细胞当成了NRBC检测）,WNR通道的要点,原理：WDF通道,溶血剂：Lysercell WDF 染色液：Fluorocell WDF,WDF散点图,SSC：侧向散射光,SFL：侧向荧光,项目 NEUT, LYMPH, MONO, EO, IG 报警信息 Atypical lymph?, Blast/Abn Lymph?, IG present, PLT Clumps?, WBC Abnormal Scattergram,异淋出现在领域的细胞数可以参考HFLC (参考参数项目) 等同于XE-2100中的Other,HFLC代表什么细胞？,HFLC代表什么细胞？ 异型淋巴（正常白细胞分类散点图
4、正常，异常报警Atypical lymph?） 异常淋巴（散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警Blast/Abn Lymph?） 原始细胞（髓系） （散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警Blast/Abn Lymph? ） IG代表什么细胞？ 部分杆状核、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞（深蓝色散点，仪器报警IG present ，该报警需要在IPU中打开）,8,血小板聚集,PLT Clumps,Negative,WDF ch,Width - FSC,大量血小板聚集在一起,血小板聚集，直方图异常,白细胞聚集,仪器报警： Difference between
5、 WNR and WDF 对策： 采用3R功能，自动检测LW模式，采用WDF通道检测WBC 水浴重检,WNR(FSCW-FSC),WDF(FSCW-SFC), 可以监测大量血小板聚集和白细胞聚集 可以定量检测原始细胞和异型淋巴细胞（HFLC）、幼稚粒细胞(IG) 低值白细胞模式可以提高精密度为临床提供准确的停药时机，提高幼稚细胞的灵敏度,WDF通道的要点,原理：WPC通道,溶血剂：Lysercell WPC 染色液：Fluorocell WPC,WPC散点图,SSC：侧向散射光,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 HPC(参考参数) 标志 Abnormal lymph?, Blasts
6、?, Atypical lymph?, 在WPC通道，采用荧光染色可以区分Abnormal Lymph和Blast的异常细胞。 主要作用： 1）白血病的初步筛选， 2）降低复检率， 3）HPC的定量检测，用于PBSCT干细胞采集时间的判断,WPC通道的要点,原理：RET通道,稀释剂：CELLPACK DFL 染色液：Fluorocell RET,RET散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 RET, RET-He 标志 RET Abnormal scattergram, Fragments?,15,FRC#，FRC%,原来没有红细胞碎片没有标准 现在需要报告裂片红细胞的百分比需要镜
7、检至少500个红细胞 主要见于血栓性血小板减少性紫癜、DIC、微血管病性溶血性贫血、心源性溶血性贫血、化学中毒、肾功能不全,FRC Gate,Corrected area for small RBC,ICSH的形态学标准-2014年,16,现在需要报告裂片红细胞的百分比，需要镜检至少500个红细胞,高EPO浓度加速RET在骨髓中的释放速度，RET在骨髓中带网时间缩短，在外周血中带网时间延长，造成外周血RET增高的假象。 绝大部分贫血疾病，EPO与HCT或HGB呈规律性的反比，根据贫血程度对网织红细胞进行纠正，即RPI（网织红细胞生成指数）,RPI(网织红细胞生成指数),RPI的计算公式,Hem
8、atocrit Retis-residence in the Blood 45 % 1 day 35 % 1,5 days Shift 25 % 2 days 15 % 2,5 days,RPI = Reti % x Hct 0,45 (Ideal Hct) x residence Retis in the Blood,RPI的临床意义,正常人RPI为1.0（建议建立适合自己的参考范围） 若RPI为0.1，表示骨髓有效造血能力为正常的10%，如重度再障、巨细胞性贫血。 若RPI为3.0，表示骨髓有效造血能力为正常的3倍，这是诊断溶血状态的可靠依据。 若RPI为2.0左右，表示造血代偿能力不足，
9、或贫血治疗有效后的恢复过程中。, 可以定量检测红细胞碎片。 增加了RET-He报告参数。 可以检测RPI（网织红细胞生成指数） PLT-O可以排除大部分碎片的干扰，用于报告PLT,RET通道的要点,稀释剂：CELLPACK DFL 染色液：Fluorocell PLT,PLT-F散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 PLT, IPF 标志 PLT Abnormal scattergram, PLT Clumps?,原理：PLT-F通道,Fluorocell PLT主要对含核酸丰富的细胞内构造进行染色 小胞体（核糖体RNA） 线粒体（MtDNA）,红细胞,红细胞,1m,原理：PLT
10、-F通道,SFL,SFL,FSC,PLT-O (XE),PLT-F (XN),FSC,PLT-F,PLT-O,IPF,IPF,Lower size PLT,Lower size PLT,PLT-F与PLT-O的差异,PLT-F通道的染液对PLT的染色效果更敏感 检测颗粒数是PLT-O或PLT-I的5倍,24,IPF（RP）的临床意义,血小板减少症的病因学诊断 生成减少：再障、白血病及肿瘤，由于骨髓受抑制，血小板总数减少， RP比例大致正常，而RP绝对值明显低于正常。 破坏增加：ITP，骨髓生成血小板加快，外周血中新生血小板增多，使RP比例升高。但由于血小板寿命缩短，使RP绝对值减少。脾亢虽有血
11、小板减少，但RP比例接近正常，RP绝对值亦低于正常水平 消耗增加：TTP，DIC，虽有血小板减少，但RP比例接近正常，RP绝对值亦低于正常水平。,血小板聚集,25,血小板聚集散点图,血小板未聚集散点图, 由于选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色。另外，也不会受到红细胞碎片的影响。5倍计数，即使是血小板低值样本，也可高精度检测。结果与参考方法几乎一致 IPF仅在PLT-F通道可以检测。 鉴别血小板减少的原因 敏感的监测血小板聚集,PLT-F通道的要点,血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测 当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号 信号的大小与通过的细胞体积呈正比 电阻变化的次数细胞数,感应区域(感应电
12、阻变化的区域）,时 间,电阻值,红细胞,血小板,基本原理：直流阻抗法,通道：RBC/PLT,计数粒子较多，重复性好 正确测定体积信息,阻抗法的优点,RBC/PLT通道,鞘流电阻抗法直接测量： RBC:红细胞数 PLT:血小板数,根据脉冲信号解析测量： HCT:红细胞压积 PCT：血小板压积,根据直方图解析测量： RDW-SD：红细胞分布宽度 RDW-CV：红细胞分布宽度 PDW：血小板分布宽度 P-LCR：大血小板比率,计算： MCV:平均红细胞体积 MCH:平均血红蛋白含量 MCHC:平均血红蛋白浓度 MPV:平均血小板体积,RDW-CV 点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，
13、使用下列方程计算RDW-CV：,RDW-SD/RDW-CV,RDW-SD 假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为RDW-SD。单位用fL表示，其中1fL = 10-15L。,RDW-CV (%)=, 100,L2-L1,L2+L1,MCV/MCH/MCHC,MCV(红细胞平均体积)=HCT/RBC MCH(平均红细胞血红蛋白含量)=HGB/RBC MCHC(平均红细胞血红蛋白浓度)=HGB/HCT,血小板直方图,分布范围：LD(26)Fl;UD(12-30）fl之间 反映参数：PLT、MPV、PDW 高位干扰：小RBC、大血小板，血小板聚集 低位干扰：电流、尘埃等,PDW/ P-LCR,PDW 假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为PDW。单位用fL表示，其中1 fL = 10-15L。 P-LCR P-LCR为由12 fL界标或更大界标得到的巨型血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间的粒子数，同低界标与高界标之间的粒子数相比而得到一个比值。,2-2.基本原理： SLS-血红蛋白法,HGB通道,白细胞通道监测疟原虫,34,WDF-ch 散点图 (SSC-SFL),WDF-ch 扩展散点图 (SSC-FSC),疟原虫散点,疟原虫区域,RET通道监测疟原虫,35,
