《食用菌菌种生产流程讲义》由会员分享，可在线阅读，更多相关《食用菌菌种生产流程讲义（97页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、食用真菌学,第四章、食用菌菌种生产,食用真菌学,第一节、菌种生产流程和设备：,一、生产流程 种菇（种木）选择 种菇（种木）处理，孢子收集 斜面培养基制备 分离培养 母种培养 原种培养基制备 原种培养 栽培种培养基制备 栽培种培养,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,二、生产设备,1 接种设备： 用于分离和扩大各级菌种的专业设备 包括接种室、接种箱、超净工作台、 接种工具,食用真菌学,接种室,要求：内外两间，面积适宜，容易搞清洁，能进行灭菌,食用真菌学,内间为接种工作间：56平方米，门窗紧密，尽量减少灰尘积累，内置工作台 外间为缓冲间：23平方米，用于进接种间前换衣、帽、
2、鞋，同时为内间提供与外界相隔环境,食用真菌学,内外间均为拉门，位置相互错开 体积应尽量小，利于彻底灭菌 装过滤空气的通风设施 内外间墙、地板、天花板、室内用具应尽量光滑易擦洗,食用真菌学,接种箱,缩小的接种室 双人、单人操作型 易消毒、规模受限制,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,超净工作台,局部净化设备 空气过滤除菌 无论接种箱还是净化工作台，均应放在较干净、空气中尘埃少的环境中，最好置于接种室内,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,接种工具,接种针 接种环 接种刀 接种铲 镊子 接种器等,食用真菌学,食用真菌学,2 菌种培养设备,放置接种后各级菌种，并提供适宜温度和通气条件，使菌丝生长良
3、好的专用设备,食用真菌学,培养室,培养架：以操作方便为宜,宽0.71.2米，层间40cm 调温：电炉、红外线、暖气管、门窗、抽风机 测温：干湿球温度计 照明：避免使用蓝光 灭菌：紫外灯,食用真菌学,食用真菌学,培养箱（恒温箱）,根据需要使温度恒定在一定范围内,一般用于培养斜面试管和少部分原种,食用真菌学,食用真菌学,3、培养基加工设备,木材切片机 木片粉碎机 搅拌机 装瓶装袋机,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,4.灭菌设备：,灭菌：将环境中的所有微生物杀死。 一般采用热力灭菌设备 干热灭菌设备 原理:利用干燥热空气进行
4、灭菌 灼烧灭菌：酒精灯 电热恒温干燥箱：160 12小时 适宜玻璃器皿、金属用具灭菌,食用真菌学,湿热灭菌设备,利用潮湿热空气进行灭菌 高压灭菌 手提式高压灭菌锅： 9瓶 立式高压灭菌锅： 45瓶 卧室园形高压灭菌锅 270瓶 卧式方形高压灭菌锅（消毒柜）500瓶 121 20-60分钟,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,常压灭菌： 砖石 油桶 蒸笼等 105 68小时,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,5、制种容器和消毒药品,容器 750ml 无色、浅色菌种瓶 聚丙烯菌种袋 消毒药品 甲醛 75%洒精 高锰酸钾 漂白粉、来苏儿,食用真菌学,食用真菌学,三、菌种厂选建,交通方便
5、、水电充足 地势干燥、环境干净 空气清新、30米内没有畜禽圈舍、饲料仓库、排废工厂 有堆放、摊晒原料地,食用真菌学,布局,食用真菌学,第二节、母种的分离和培养,一、母种培养基配制 1 配制原则 营养成分含量与比例适合食用菌生长发育 pH、EV适宜 有一定pH缓冲能力,食用真菌学,2 配方,PDA（马铃薯葡萄糖琼脂培养基） 适合各种食用菌 马铃薯 200g G 20g 琼脂(Agar) 20g 水 1000ml pH自然,食用真菌学,合成培养基,适宜保藏菌种 MgSO4 0.5g K2HPO4 1g G 0.46g 蛋白胨 20g Agar 15g 水 1000ml,食用真菌学,苹果琼脂培养基,
6、特别适合草菇菌丝生长 苹果 100g（压碎取汁） 蔗糖 20g 琼脂 2g 水 1000ml,食用真菌学,高梁琼脂培养基：,对平菇生长有利 高梁粉 30g 琼脂 10g 水 1000ml,食用真菌学,酱油洋葱琼脂培养基,宜香菇、平菇、金针菇、木耳 酱油 50ml 洋葱煎汁 100ml (500g洋葱+水500ml煮沸30分钟后补足水) 取滤液 琼脂 20g 水 850ml,食用真菌学,3 配制,称量 调配 马铃薯、洋葱、稻草等，水煮30分，双层纱布过滤 淀粉、易溶物质，加少量水，调成糊状（避免成团） 难溶物质，加水、加热、搅拌,食用真菌学,按食用菌所需 试纸测定 用IN NaOH or IN
7、HcL,pH测定与调整,食用真菌学,加入琼脂并溶解,预湿 加入培养基 加热搅溶,食用真菌学,过滤分装：,双层纱布过滤 1/5试管（5ml） 严禁沾试管口、上壁,食用真菌学,食用真菌学,加棉塞、包扎,棉塞过滤空气、防污染 松紧适宜 内2/3 外1/3 牛皮纸包扎,食用真菌学,食用真菌学,灭菌,高压蒸汽灭菌锅进行 0.05mPa 放汽阀打开 0 0.05Pma 放汽阀打开 0 0.15mPa 维持1520分 0,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,二、母种的分离培养,介绍组织分离法 种菇选择： 个体健壮 菇形典形美观 无病虫害 适度成熟 种菇处理：75%酒精擦表面（草菇）,食用真菌学,分离操作：,
8、菌柄与菌盖交界处取组织块 木耳经无菌水冲洗，切成小块放入培养基 纯化培养 将菌丝块移入PDA平板培养 若纯：四周辐射状生长，外缘整齐一致 否则：边缘参差不齐，色素分布不均匀 将较一致的菌丝的前端，切割新培养皿,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,培养温度,大部分2528 草菇 30,食用真菌学,第三节、原种、栽培种的生产,一、配方与制配 1 木屑、竹屑培养基 木屑（阔叶树） 78% 麸皮或米糠 20% 蔗糖 1% 石膏粉 1% 木生类菌：香菇、平菇、木耳、金针、猴头、灵芝,食用真菌学,制配,称料糖溶于水中 混料加入糖水 6065% pH,食用真菌学,2 棉籽壳蔗渣培养基,配方 棉籽壳 78%
9、麸皮 20% 蔗糖 1% 石膏粉 1% 金针、平菇、风尾菇、草菇、银耳、木耳、猴头,食用真菌学,配方,甘蔗渣 75% 麸皮或米糠 24% 石膏粉 1% 平菇、风尾菇、金针、毛木耳,食用真菌学,制法,称料 棉籽壳或甘蔗渣堆1224小时（均匀吸水） 辅料 6065% pH,食用真菌学,3 谷粒培养基,以小麦、高梁、玉米等为主料制作的培养为谷粒培养基 小麦 98% 碳酸钙 2% 银耳外、其它木生型、粪草型均适合,食用真菌学,配方,稻谷 50% 棉籽壳 40% 麸皮 8% 石膏粉 2% 平菇、风尾菇,食用真菌学,制作,麦粒： 清水或0.1%多菌灵水浸泡1624小时，捞起，摊开，底部无积水时，加辅料，调
10、匀即可。 稻谷： 冷水浸23小时，煮开2030分，待大部分稍开裂，即可起锅。沥干拌料。,食用真菌学,4 粪草培养基,以畜粪和稻草为主料的培养基 干稻草 63% 干牛粪 25% 玉米粉 4% 过磷酸钙 3% 大豆粉 3% 硫酸镁 2% 蘑菇、草菇,食用真菌学,制法,稻草切成3cm长，浸透捞起，沥干至不滴水 混合 堆制20天，中间翻34次,食用真菌学,5 木块木条培养基,以阔叶树毛竹为主料配以辅料制成的培养基 .配方 枝条 1000g 麸皮或米糠 250g 石膏粉 10g 营养液 (蔗糖1%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%）,食用真菌学,制法,毛竹或枝条，截成1012cm长，34mm宽，一头削
11、尖，晒干 浸入0.1%多菌灵或0.1%高锰酸钾液泡30分钟 4050营养液中泡1小时 捞出沥干 装瓶（尖头朝下，200支/750ml瓶） 上盖1.5cm厚木屑培养基,食用真菌学,二、装瓶装袋,要求松紧适宜，瓶至颈，袋40%， 洗净瓶口、打园洞, 塞棉塞, 灭菌,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,食用真菌学,三、接种,无菌条件：每立方米10ml甲醛+5g高锰酸钾，24小时后开紫外灯30分 1支母种 56瓶栽培种 1瓶原种 5080瓶栽培种,食用真菌学,食用真菌学,四、培养,平菇25 25-35天 草菇32 1周 3-5天内直立放置,然后倒卧叠放，适时转动（水分，菌丝生长均匀） 定期检查，剔污
12、3个月内必须使用 最多不能超过半年,食用真菌学,第四节、食用菌的菌种质量鉴定与保藏,1、母种质量鉴定： 形态鉴定： 合适培养基，适宜温度培养,菌丝生长快，整齐，浓而健壮,食用真菌学,出菇（耳）检查,菌丝爬料快，满袋快 出菇时间适合周期 出菇多而整齐 菇形美观,食用真菌学,2原种、栽培种质量鉴定：,外观要求 菌丝已长满培养基，草菇有少量或没有红褐色厚垣孢子，银耳菌种在培养表面出现子实体或子实体原基 菌丝生长健壮，绒状菌丝多，分布均匀，色泽符合，该菌类菌丝的色泽 无杂菌污染、无杂色出现,食用真菌学,代数符合要求：,母种转管45次内。,食用真菌学,菌龄适合,常温下，3个月内有效。 （满瓶后存放时间）
13、草菇、风尾菇最好1个月内使用。,食用真菌学,重量和酸碱度符合要求,依不同食用菌 重量要求400克/瓶,食用真菌学,3、保藏,斜面低温保藏： 4左右 6个月转管 草菇：5死亡，1012保存 用牛皮纸包扎试管口，再用黑纸密封试管 干净、阴凉的环境中保存，10-12C为宜，3-4月转管一次 温度不能低于5C，培养基中琼脂用量可适当加大，以增加保存期,食用真菌学,液体石蜡保藏：,把液体石蜡装入三角瓶内，塞上棉塞，高压蒸汽灭菌1小时，放入30C左右的温箱内培养24小时，再灭菌1小时，放入40C环境中，使水份蒸发，至石蜡透明 倒入斜面菌种试管内，淹过斜面1cm 然后直立于试管架上放在常温条件下保藏，1-2
14、年转管一次。,食用真菌学,使用方法,倒去液体石蜡，用无菌水冲洗斜面2-3次，挑取少许菌丝接入斜面培养基上培养，至菌丝长满斜面即可用于生产。 不倒去石蜡，直接用接种针从斜面上挑取少量菌丝接入斜面培养基上培养，菌种仍可继续保藏。,食用真菌学,麦粒保藏：,麦粒泡812小时，稍沥干，装入大试管 塞好棉塞，灭菌1小时-2837置24小时-灭菌1小时 接种 长满后于干燥器干燥1个月 4或凉爽、干燥、干净处，1年以上 使用时，在每支斜面培养基上接入一粒麦粒，培养至菌丝长满斜面即可,食用真菌学,第五节、菌种的衰退与复壮,1 衰退 优良性状退化，典型症状变异，质量负变 预防衰退措施 控制菌种传代次数 采用有效的菌种保藏方法 创造菌种生长的良好营养条件和外界环境,食用真菌学,2复壮,从衰退群体中找出尚未衰退的少数个体，达到恢复菌种优良性状的一种措施。,食用真菌学,复壮方法,淘汰已衰退个体：无菌条件下，将试管菌丝刮入100ml无菌水中，振荡，分散，稀释10倍，摊于平皿中生长，挑选萌发快，生长健壮的菌丝接种。 定期重新分离菌种，12年后分离一次 木生菌类要定期接入木材中，重新分离,
