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1、血液学一般检查,【目的】 掌握显微镜红细胞(red blood cell count, RBC)计数的原理及操作方法。 【原理】 用等渗稀释液将血液以一定倍数(200倍)稀释并充入计数池，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。,【器材】 试管、试管架。 2 ml吸管、吸耳球。 微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。 玻璃棒。 改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布。 显微镜。,Micropipettes,Markers: 10ul 20ul Warning line,【试剂】 红细胞稀释液：枸椽酸钠1.0 g ，36%甲醛液1.0ml，氯化钠0. 6 g，加蒸馏水至1
2、00 ml，混匀，过滤两次后备用。 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,【操作】 1加稀释液 红细胞稀释液2 ml 于小试管。 2采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血10l，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中红细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层红细胞稀释液清洗吸管23次。 3充池 充入计数池，放置23 min 。 4计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用高倍镜计数中央大方格内4角和正中，共5个中方格内的红细胞数。 5计算,红,红,红,红,红,红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6 =(N/100)*1012 【参考值】 成年人：男
3、性（4.095.74）1012/L，女 性 (3.685.13) 1012/L。 新生儿：(5.26.4) 1012/L。 婴儿：(4.04.3) 1012/L。 儿童：(4.04.5) 1012/L。,五个中方格计数和求均值乘以中方格数量乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,1器材 2试剂 3标本 4稀释液及稀释倍数 5采血 6充池 7计数,白细胞计数,【目的】 掌握显微镜法白细胞计数（white blood cell count）的方法。 【原理】 采用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白
4、细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,【器材】 同红细胞计数,0.5ml吸管 【试剂】 白细胞稀释液：2冰乙酸溶液 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。,【操作】,1加稀释液 吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。 2采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血20l，擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管23次。 3混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色。 4充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬液1滴，注入计数板的计数池中，室温下静置23min，待白细胞完全下沉后再做白细胞计数。 5计数 将光圈调到最小，光线调
5、暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用低倍镜（或高倍镜）下计数四角4个大方格内的白细胞总数。,6计算 白细胞数/L=（N/4）*20*10*10E6=(N/20)*109 【参考值】 成人：（410）109/L 儿童：（1520）109/L；6个月2岁：（1112）109/L。 新生儿：（1520）109/L,四个大方格计数和求均值后乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,类似于红细胞计数。 应注意白细胞较红细胞少，因此充池更加注重均匀。 稀释倍数，因细胞多少而异。,试验结束后,将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到大垃圾桶 将玻璃试管用水冲洗干净倒插入试管架中 将牛鲍计数板冲洗干净放入盒中 将显微镜按照背后的号码还原至盒中 关闭电灯，拔下插线板,
