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1、抗核抗体检测及其意义,沭阳县人民医院 检验科 刘玲玲,自身抗体定义,自身抗体是指针对自身组织，器官、细胞及细胞成分的抗体。正常的免疫反应有保护性防御作用，对自身组织、成分不发生反应。旦自身耐受的完整性遭到破坏，则机体视自身组织、成分为“异物”，而发生自身免疫反应，产生自身抗体。正常人体血液中可以有低滴度的自身抗体，但不会发生疾病，但如果自身抗体的滴度超过某水平，就可能对身体产生损伤，诱发疾病。,自身免疫性疾病相关自身抗体,抗核抗体谱（ANAs） 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 抗自身免疫性肌炎谱 自身免疫性肝病相关抗体谱 抗磷脂抗体谱,抗核抗体谱（
2、ANAs）,ANAs,抗核不溶成分 抗核可溶成分 （抗ENA） 抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体,抗DNA抗体 抗核小体抗体 抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4,抗Sm,U1RNP,SSA,SSB 抗Scl-70,Jo-1,PM-1 抗rRNP,PCNA.,dsDNA ssDNA,抗着丝点抗体（ACA),抗5sRNA,ANA是一类能与多种细胞核抗原反应的自身抗体，许多自身免疫性疾病都可以出现阳性。如系统性红斑性狼疮(SLE)、混合结缔组织病（MTCD）、干燥症(SS）、全身性硬皮症(PSS）。ANA测定在许多胶原病病人均可呈阳性，需进一步作抗DNA抗体和抗ENA抗体测定鉴别。,抗核抗
3、体(ANA),抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）,脱氧核糖核酸分为双链DNA（dsDNA）和单链DNA（ssDNA）两种。 针对前者的自身抗体为系统性红斑狼疮的标记性抗体，而后者则见于多种风湿性疾病。,抗核提取物抗体，是抗小分子细胞核核糖核蛋白（snRNPs）和小分子细胞浆核糖核蛋白（scRNPs）的自身抗体，不含组蛋白。包括：抗nRNP抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体等。对诊断和鉴别诊断有重要意义，与疾病严重程度和活动性无明显相关。,抗ENA抗体,抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）,靶抗原为丝氨酸蛋白酶PR3、MPO等，是系统性血管炎的血清标
4、记物。ANCA主要表现两种核型：胞浆型（c-ANCA）：主要与韦格氏肉芽肿血管炎有关；核周型（p-ANCA）主要见于血管炎、Churg-Strass综合症和少免疫沉积型节段坏死性肾小球肾炎和新月体肾炎。,ANA检测方法-IIF法,ANA滴度 ANA核型,荧光显微镜下ANA的染色型别,均质型 颗粒型 核膜型 核仁型 着丝点型 胞浆型 混合型等,核均质型,核粗颗粒型,HEp-2：间期细胞核呈颗粒样荧光，核仁阴性；分裂期细胞浓缩染色体阴性，染色体周围呈颗粒样荧光,肝片：肝细胞核呈颗粒样荧光。核仁阴性；荧光强度与HEp-2基本一致,靶抗原：nRNP、Sm,核膜型,抗dsDNA检测方法,以短膜虫或马疫锥
5、虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。 优点：特异性好,抗dsDNA抗体临床意义,SLE 的血清特异性抗体 多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关 与LN（狼疮肾炎）和SLE疾病活动性相关，活动期达90 可用于SLE 疾病活动期判断药物疗效观察 与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关,抗ENA抗体 extractable nuclear antigen,可提取性核抗原 成分：核酸与核蛋白，不含染色质成分 功能：参与细胞内DNA复制、RNA转录、蛋白翻译 合成 来源：无种属
6、差异，有组织不均一性 理化特性：对温度和RNA酶敏感（U1RNP、SS-A） 意义：抗ENA抗体是ANAs中范围最广、最为重要的 一簇抗体，与疾病活动性大多无相关,抗ENA抗体检测方法,免疫双扩散法(ID) 对流免疫电泳法( CIE) 免疫印迹法(IBT) 酶联免疫吸附法(ELISA) 蛋白芯片（Protein chip）,抗RNP抗体,高达50%的SLE病人和95%的MCTD病人血清中可检测到此抗体，典型的MCTD病人血清中可检测到高滴度的针对Sm/RNP免疫复合物的抗-RNP抗体，而往往检测不到抗-Sm抗体。,抗Sm抗体,30%的SLE病人可检测到抗-Sm抗体，在肾炎病人和某些中枢神经严重
7、损伤的病人也可检测到。,抗SSA抗体,在SLE、风湿性关节炎（RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-A抗体，此外在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可检测到。,抗SSB抗体,在SLE、风湿性关节炎(RA）、干燥综合症病人血清中常常可以检测到SS-B抗体，在硬皮病、新生儿红斑性狼疮（NLE）病人也可检测到。SS-B抗体一般与SS-A抗体同时出现。若病人血清中可检测到SS-A抗体而不伴有SS-B抗体的出现，此病人继发肾炎的风险较大。,抗Jo-1抗体,20-30%的多发性肌炎/皮肌炎，30-40%的多发性肌炎患者和高达60%的多发性肌炎伴有间质性肺疾病患者血清中可检测到抗-Jo-1抗体。其它胶原性疾病中很少检出此抗体。,抗ScL-70抗体,靶抗原：DNA拓朴异构酶I的降解产物 主要存在核仁中 40%的硬皮病和20-30%的全身性硬皮病患者中可检测到此抗体，很少在其它自身风湿性疾病中出现。,
