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1、1泽兰提取物对乙醇致小鼠胃溃疡保护作用作者：贲亮，徐铁，周微，付宝慧，郝乘仪，李镐【摘要】 目的观察泽兰提取物对无水乙醇诱导小鼠胃溃疡的保护作用。方法 60 只雄性小鼠随机分为正常组，模型组，泽兰提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组和阳性对照组。泽兰提取物高、中、低剂量组分别按 1.0，0.5，0.2 g/kg 灌胃泽兰提取物;阳性对照组按 0.2 g/kg 灌胃西咪替丁，共 5 d。第 5 天，除正常组外，采用无水乙醇灌胃致小鼠胃黏膜损伤型急性胃溃疡，比较各组胃溃疡指数，计算溃疡抑制率;测定胃组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果高剂量组和中剂量组泽兰提取物能显著降低无水
2、乙醇引起小鼠胃溃疡的溃疡指数(P 0.05)，溃疡抑制率分别为 72.0%和 57.4%，并均能明显升高胃组织 SOD 的活性(P 0.05)，降低 MDA 含量(P 0.05)。结论泽兰提取物通过抗氧化活性对无水乙醇致小鼠胃溃疡具有一定的保护作用。 【关键词】 泽兰提取物;胃溃疡;抗氧化Abstract：ObjectiveTo observe the protective effect of Lycopus lucidus Turcz. methanolic extract against gastric ulcer induced by anhydrous ethanol in mice.
3、 Methods60 mice were randomly divided into normal control, model control group, high dosage, middle and low dosage group and positive control group. The drug groups were pretreated intragastrically with 1.0, 0.5, 0.2 g/kg extract. Positive control group was pretreated intragastrically with 0.2 g/kg
4、cimetidine. Control mice were given the same volume of physiological saline. On the 5th day of feeding, the mice except normal control group were orally treated with 0.1 ml/20g anhydrous ethanol for gastric-ulcer induction. The gastric ulcer index and ulcer inhibition were measured, and superoxide d
5、ismutases (SOD) and malondialdehyde (MDA) levels in gastric tissue were determined. ResultsThe 1.0 and 0.5 g/kg doses of methanolic extract of L. lucidus showed antiulcer effects of 72.0% and 57.4% with the increase of SOD activity and decrease of MDA content in gastric tissue, respectively, compare
6、d to the model control group.ConclusionThe methanolic extract of L. lucidus can prevent the ethanol-induced gastriculcer in mice through its antioxidation.Key words： Lycopus lucidus extract; Gastric ulcer; Anti-oxidation泽兰为唇形科植物毛叶地瓜儿苗 Lycopus lucidus Turcz. var. hirtus Regel 和地瓜儿苗 Lycopus lucidus Tu
7、rcz. 的干燥地上部分1,2，味苦、辛，微温，具有活血化瘀、行水消肿之功，用于治月经不调、经闭、经痛、产后瘀血腹痛、水肿1。泽兰中的主要化学成分为三萜酸类及酚酸类。文献报道三萜酸类具有抗肝炎病毒的药理作用，酚酸类成分则具有扩张血管及治疗心血管疾病活2性3。本实验通过体外筛选泽兰甲醇提取物的清除二苯代苦味酰自由基的能力强(浓度 50 g/ml 时，清除率为 48.0%)，进一步研究泽兰甲醇提取物对无水乙醇所致小鼠胃溃疡的保护作用，并对其抗氧化作用机理进行初步探讨。1 材料1.1 动物昆明种雄性小鼠 60 只，体质量(202)g，由延边大学医学部实验动物中心提供。1.2 药材泽兰采自吉林省长白山
8、东北坡一带，经延边大学药学院吕惠子副教授鉴定为唇形科植物地瓜儿苗 L.lucidus。材料采集后晾干、切碎，于 60恒温干燥箱中干燥至恒重，用粉碎机粉碎后过 40 目筛，准确称取 50 g，加约 10 倍量的甲醇浸提 48 h，提取 2 次，合并 2 次滤液，过滤后减压浓缩至浸膏，4冰箱中保存备用4。1.3 试剂与仪器 西咪替丁购自黑龙江蓝天制药有限公司，超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所，其他试剂均为国产分析纯。使用的仪器有小型离心机(Sigma 1-13)，UV-2001 型紫外-可见分光光度计(日本 Shimadzu)和生化分析仪(SPOTCHEM
9、E 2, SP-4430)等。2 方法2.1 动物分组及给药将 60 只小鼠随机分为 6 组，每组 10 只：正常对照组和无水乙醇模型组灌胃等体积生理盐水;泽兰提取物高中低剂量给药组分别按1.0，0.5，0.2 g/kg 灌胃泽兰提取物;阳性对照组按 0.2 g/kg 灌胃西咪替丁;2次/d，连续 5 d，于末次给药后 1 h，除正常组外，其余均灌胃无水乙醇 0.1 ml/20 g。1 h 后全部脱颈椎处死，剖腹，分别结扎贲门、幽门端后取出胃，向胃内注入 10%甲醛 6 ml，将全胃置于甲醛溶液中固定 15 min，沿胃大弯剪开，生理盐水冲洗，用滤纸吸干水分。利用游标卡尺测定胃腺区条状损伤的长
10、度大于1 mm 者，测量长度，每毫米记 1 分，其宽度大于 1 mm 者计分加倍，长度与宽度均小于 1 mm，计 0.5 分，将计分相加即为该动物的溃疡指数，计算溃疡抑制率 溃疡抑制率 (%)= (模型组溃疡指数 - 给药组溃疡指数)/模型组溃疡指数 100%5,6。2.2 生化检测按试剂盒说明测定胃组织 SOD 活性和 MDA 含量。2.3 统计学处理数据以s 表示，组间差别的假设性检验用方差分析(ANOVA)，P 0.05 认为有统计学意义。3 结果3.1 溃疡评定从胃标本看，正常组胃黏膜表面光滑;模型组溃疡多呈现条索状或点状出血;与模型组比较，给药组的胃黏膜点状出血和损伤程度均有不同程度
11、减轻。结果见表 1。结果表明，泽兰提取物高、中剂量组能明显对抗乙醇所致的胃黏膜损伤，与模型组比较溃疡指数明显降低(P 0.05)，溃疡抑制率分别为 72.0%和 57.4%，对胃黏膜具有一定的保护作用。表 1 泽兰提取物对小鼠无水3乙醇型胃溃疡的影响与模型组比较，*P0.05;n=103.2 泽兰提取物对胃组织 SOD 活性和 MDA 含量的影响结果见表 2。模型组小鼠 SOD 活性较正常组降低(P 0.01)，MDA 含量升高(P 0.01);与模型组比较，泽兰提取物高剂量组、中剂量组和低剂量组 SOD 值均升高(P 0.05)，高剂量组和中剂量组 MDA 含量降低(P 0.05)，说明泽兰
12、醇提物能升高乙醇引起急性胃溃疡小鼠胃组织的 SOD 活性，同时降低小鼠组织的 MDA 含量。表 2 泽兰提取物对小鼠乙醇型胃溃疡模型胃组织 SOD 活性和 MDA 含量的影响(与模型组比较，*P0.01，*P0.05;n=104 讨论近年来，随着 H2 受体拮抗剂和质子泵抑制剂相继应用于临床，胃溃疡的近期愈合率得到明显提高，但这些药物的副作用及停药后胃溃疡的复发仍是急待解决的问题。而传统中医中药则在增强胃黏膜防御力、提高胃溃疡愈合质量、减少复发等方面逐步发挥出了优势7。小鼠灌胃无水乙醇诱发溃疡，可导致其机体抗氧化能力下降，自由基形成增多，从而造成胃黏膜保护作用受到损伤8。超氧化物歧化酶(SOD
13、)广泛存在于机体各组织中，是催化清除氧自由基的酶类，是生物体内氧自由基清除系统的首要防线，将 SOD 直接输入体内可直接清除细胞内自由基，并且具有保护细胞 DNA、蛋白质与细胞膜的功能。氧自由基诱导细胞和组织损伤的机制主要是使生物膜中的不饱和脂肪酸过氧化，形成多种脂质过氧化物，破坏线粒体和溶酶体膜，形成溃疡，造成细胞死亡9，MDA 是脂质过氧化的最终产物，可严重破坏细胞膜结构，导致细胞肿胀、坏死，目前大多通过测定 SOD 活性及 MDA 含量的变化来反映整个机体的脂质过氧化反应和抗脂质过氧化反应的能力10。本实验结果显示模型对照组溃疡面积显著高于正常对照组，表明急性胃溃疡模型造模成功。泽兰提取
14、物高、中剂量组能显著减少乙醇所致小鼠急性胃溃疡的面积(P 0.05)，表明药物具有一定的胃保护作用。通过测定 SOD 活性和 MDA含量，泽兰甲醇提取物高、中剂量组显著升高乙醇引起急性胃损伤小鼠胃组织SOD 的活性(P0.05)，降低小鼠胃组织的 MDA 含量(P0.05)。本研究结果说明泽兰提取物可能通过保护细胞膜，清除氧自由基抑制脂质过氧化而对胃组织起到保护作用。综上所述，泽兰醇提取物具有很强的抗氧化活性，且对小鼠乙醇型胃溃疡具有明显的保护作用，通过实验可以看出，泽兰提取物是通过提高 SOD 活性，阻止胃黏膜脂质过氧化反应，增强清除氧自由基的能力，从而起到胃组织保护作用。【参考文献】1 中
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16、草药，2008, 39 (3): 397.7 丁志山，蒋福升. 姜黄素对动物实验性胃溃疡的影响研究J. 中华中医药学刊，2008, 26(10): 2225.8 Mutoh H，Hiraishi H，Ota S，et a1. Role of oxygen radicals in ethanol induced damage to cultured gastric mucosal cellsJ. Am J Physio, 1990，258: 603.9 董亚琳, 邢建峰. 舒肝丸抗实验性胃溃疡的作用J. 西安交通大学学报(医学版), 2004, 25(1): 79.10 谢振家，黄美星. 荆花胃康胶丸对实验性胃溃疡及幽门螺杆菌的抑制作用J. 中国新药杂志, 2001, 10(3): 221.
