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1、第十二章 肾功能试验,本章内容,第一节：概述 第二节：血清尿素测定 第三节：血清肌酐测定 第四节：血清尿酸测定 第五节：内生肌酐清除率试验,第一节 概述,概 述,肾功能试验：主要用于评价肾脏的排泄功能和疾病时肾脏的 受损程度。 肾功能检查的目的： 1、明确有无肾功能损伤 2、肾脏损伤的程度和范围（累及肾小球、肾小管，或两者均累及） 3、借以制定治疗方案 4、观察其动态变化，判断预后,肾脏的解剖,肾单位结构图示意图,肾单位,肾小体,肾小管,肾小球,肾小囊,近端小管,细段,远端小管,近曲小管,降支粗段,远曲小管,升支粗段,髓襻,肾单位结构及功能,滤过功能,重吸收：2/3 水 电介质 小分子蛋白 葡
2、萄糖 氨基酸 排泌：蛋白、尿酶,逆流倍增：尿液浓缩 重吸收：少量水、钠 调节体液和酸碱平衡,集合管,远端肾单位,肾脏的排泄功能：,排泄（泌尿）功能：排出机体代谢产物和异物 调节功能： 水和体液渗透压、体液量； 电解质平衡 调节酸碱平衡； 内分泌功能： 肾素：参与动脉血压调节 促红细胞生成素：参与骨髓RBC生成， 2，5-羟VD3在近端小管1-羟化酶作用下转 化成1，25二羟VD3（1，25二羟胆钙化醇）,调节钙 的吸收和血钙水平 激肽、前列腺素：参与局部或全身血管活动调节,人体的排泄器官及其排泄物 排 泄 器 官 排 泄 物 肾 脏 水、尿素、肌酐、盐类、 药物、毒物、色素等 肺 脏 co2、
3、水、挥发性药物等 皮肤及汗腺 水、盐类、少量尿素等 消 化 道 钙、镁、铁、磷等无机盐, 胆色素,毒物等 唾 液 腺 重金属、狂犬病毒等 ,滤过概念: 血液流经肾小球时，血浆中的水和小分子物质经 过滤过膜进入肾小囊腔形成原尿的过程。,滤过基本条件 ： 1.半透膜 2.滤过动力膜两侧必须存在滤过压 （有效滤过压）,（一） 肾小球的滤过作用,衡量肾小球滤过功能的指标：,肾小球滤过率（GFR）： 指单位时间内两肾生成的原尿量。 正常成人安静时，约为125 ml/min. 滤过分数： 指肾小球滤过率与每分钟的肾血浆流量的比值。 肾血浆流量为660 ml/min 滤过分数125/660100%19%,有
4、效滤过压,滤过膜的面积和通透性,肾血浆流量: 肾血浆流量与肾小球滤过率呈正变关系。,影响肾小球滤过的因素,2019年7月25日星期四11时43分2秒,滤过膜及其通透性滤过屏障,机械屏障：由滤过膜的三层组织各种孔、裂构成。,静电屏障：由各层含有带负电荷的糖蛋白构成。,2019年7月25日星期四11时43分2秒,（二）肾小管与集合管的重吸收,重吸收: 指小管上皮细胞将原尿中某些成分 重新摄回血液的过程。,重吸收的第一段：近曲小管 (主要部位),肾阈：能够被重吸收的物质在小管液中浓度过高，超 过肾小管重吸收能力在尿中出现。 近曲小管液渗透压与血浆保持等渗,几乎全部的葡萄糖、氨基酸 6570%的水和N
5、a+、K+、Cl- Ca 、P 、尿素部分重吸收 肌酐完全不吸收,吸收,重吸收的第二段：髓绊 降支 对水的通透性很高 水的重吸收NaCl的重吸收 髓绊 升支 对水的通透性很低 但对NaCl的重吸收高,重吸收的第三段：远曲小管 远曲小管能继续重吸收水和Na+,远曲小管的重吸收作用 受抗利尿激素(ADH)和醛固酮的调节和控制,属于调节性重吸 收,对维持机体内环境的相对恒定具有重要意义.,肾脏疾病的实验室检查,尿液检查：常规检查、细菌学检查、 特殊生化检查 （蛋白、 酶学） 肾功能检查：肾小球滤过功能 肾小管功能检查 肾血流量测定 肾脏活体组织病理检查 肾脏内分泌功能检查 肾素血管紧张素系统 激肽释
6、放酶激肽系统 前列腺素 1,25-二羟胆骨化醇,三 、肾功能试验的选择与评价,肾功能试验除反应肾脏本身病变外，常常还受各种肾外 因素的影响，如心功能不全、水肿、休克、贫血、肾后梗阻、 药物等。因此，在临床判断时，必须结合临床实际情况。,（一）肾功能试验方法的选择,（二）主要肾功能试验的评价,1、尿素测定 检查肾小球滤过功能的试验 主要用于肾功能障碍晚期或严重损害，对氮质血症和尿毒症诊断有特殊 价值，但对早期诊断无意义。 方法简便，但敏感性差 2、内生肌酐清除率 反应肾小球滤过功能的试验 可粗略估计有效肾单位数量 敏感性较尿素高，方法简单，试验干扰因素较少 临床上常用于测定肾功能损害较好的定量试
7、验之一 3、菊糖清除率和对氨基马尿酸清除率 菊糖清除率反应肾小球滤过功能 对氨基马尿酸清除率反应肾血流量 操作复杂，会给患者带来一定的痛苦 临床上不作为常规的肾功能试验，一般只在研究工作中应用,（二）主要肾功能试验的评价,4、血清肌酐、肌酸测定 在严重肾功能不全尿量明显减少时，血清肌酐、肌酸测定在一定程度上可帮助判断肾功能损害的程度 5、酚红排泌试验 由于受肾血流量影响，中等以上程度肾损害时酚红排泌量试验才有所改变 可反映近曲小管功能 虽敏感性差，但操作简便，曾广泛在临床上应用。 6、肾小管的最大功能试验 属于对肾小管功能进行定量的试验，是肾小管功能的重要指标。 反映有效肾单位总数 试验方法准
8、确性好、灵敏度高，但操作繁琐，要求条件高。 不适用于临床常规肾功能试验。,第二节 血清尿素测定,概述,尿素(Urea，ure)是哺乳动物蛋白质分解代谢的终产物。 在肝脏通过鸟氨酸循环合成 主要由肾脏排泄 由于尿素的分子量小又易于溶解，扩散力极大 故脑脊液、浆膜腔积液、唾液、汗液中的尿素浓度基本一致 血尿素浓度主要受肾功能和蛋白质摄入量和分解代谢情况的 影响。,测定方法,1、直接法 如：二乙酰-肟法 2、间接法 如：脲酶比色法 酶偶联法 电导法 离子选择电极法 指示染料法,脲酶比色法,【原理】 脲酶 尿素+H2O 氨基甲酸+NH3 自发 安基甲酸 NH3+CO2 OH- NH3+NaClO 游离
9、型吲哚酚（蓝色） 亚硝基铁氰化钠,【试剂与器材】,1、酚显色剂 2、碱性次氯酸钠溶液 3、脲酶贮存液 4、脲酶应用液 5、尿素标准贮存液 6、尿素标准应用液 7、器材 试管、试管架、刻度吸管、37恒温水浴箱、分光光度计,实践步骤,加入物（ml） 测定管 标准管 空白管 脲酶应用液 1.0 1.0 1.0 血清 0.01 - - 尿素标准液 - 0.01 - 蒸馏水 - - 0.01 混匀，在37恒温水浴箱中保温15min 酚显色剂 5.0 5.0 5.0 碱性次氯酸钠 5.0 5.0 5.0 混匀后，置37水浴保温20min，用分光光度计在波长620nm处，以空白管调 零，读取各管吸光度。,计
10、算 测定管吸光度 尿素（mmol/L）= - 5（mmol/L） 标准管吸光度 参考范围 1.787.14 mmol/L,注意事项,1、若用血浆测定尿素时应避免用高浓度氟化物、草酸盐作抗凝剂，因其能抑制尿素酶活性，引起结果假性偏低。 2、空气中氨对试剂或玻璃器皿的污染可使结果偏高，使用铵盐抗凝剂也可使结果偏高。 3、本法亦能测定尿液中的尿素，但需将尿液稀释并去除尿中游离铵盐。,临床意义,生理性因素 血清尿素的浓度与摄入的蛋白质量密切相关。 血浆中尿素增高见于： 肾前性因素：肾血流量不足；体内蛋白质分解过盛； 主要见于心力衰竭、消化道或手术大出血、创伤等疾病引起的休克和剧烈呕吐、幽门梗阻、肠梗阻
11、 肾脏疾病：尿素轻度升高（7.0mmol/L）; 中度增高（17.921.4mmol/L）；尿毒症时尿素21.4mmol/L。 主要见于慢性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾肿瘤等疾病 肾后性因素：肾小管内高压，肾小管内尿素逆流扩散入血液。见于前列腺增生、 尿路结石、尿路狭窄等。,临床意义,尿素减少： 1、血液稀释 2、严重肝病,二乙酰一肟法【原理】 尿素与二乙酰在酸性环境中加热可缩合成红色的二嗪衍生物，颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定，故通常用二乙酰一肟代替，它与强酸作用，产生二乙酰。后者再与尿素反应，缩合生成红色的二嗪衍生物。,【试剂与器材】,1、酸性试剂 2、二乙酰一肟溶液 3、尿素
12、标准贮存液 6、尿素标准应用液 7、器材 试管、试管架、刻度吸管、37恒温水浴箱、分光光度计,【操作步骤】 加入物(ml) 测定管 标准管 空白管 血清 0.02 - - 尿素标准液 - 0.02 - 蒸馏水 - - 0.02 二乙酰一肟溶液 0.5 0.5 0.5 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 各管混匀后，置沸水中加热12min，取出置冷水中冷却5min，分光光度计波长540nm，以空白管调零比色，读取各管吸光度。,计算 测定管吸光度 尿素（mmol/L）= - 5（mmol/L） 标准管吸光度 参考范围 1.787.14 mmol/L,【注意事项】 1试剂中加入硫氨脲和镉离子可增加显色
13、强度和色泽的稳定性，还可消除 羟胺的干扰，但仍有轻度退色现象，故应及时比色。 2尿液中尿素亦可用此法测定，但因尿液中尿素浓度较高，需将尿液作50 倍以上稀释后再行测定。 3尿素浓度以前习惯用尿素氮表示，尿素分子中含有二个氮原子，因此 1mmol/L尿素等于2 mmol/L尿素氮。世界卫生组织推荐使用尿素，并以 mmol/L表示浓度单位，我国卫生部也已规定一律使用尿素，不再使用尿 素氮一词。,【临床意义】 1血液尿素浓度增高，可分生理性与病理性因素二个方面。 (1) 生理性因素：高蛋白的饮食可引起血清尿素浓度和尿液排出量显著增高。血清尿素浓度男性比女性高0.30.5mmol/L，且随年龄增加有增
14、高的倾向。成人日间生理变异平均为0.63mmol/L。 (2)病理因素： 1) 肾前性：最重要的是失水而导致血液浓缩，可引起肾血流量减少，肾小球滤过率减低而致血液尿素浓度增加。常见于剧烈呕吐、幽门梗阻、肠梗阻、长期腹泻；消化道大量出血后等。 2) 肾性：肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等影响肾小球滤过的疾病，都可使血液尿素含量增高。 3) 肾后性疾病：所有使尿路阻塞的因素都可引起血液尿素含量增加，如前列腺肿大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤致尿道受压等。 2.血液尿素浓度降低较为少见，除婴儿、妊娠（血容量增加）及低蛋白高糖饮食外，常见于严重肝病患者，如肝炎合并广泛性肝坏死、肝功能衰竭等。,第一三节 血清肌酐测定,概述,肌酐是肌酸和磷酸肌酸代谢的终产物 它主要由肌肉中磷酸肌酸的非酶促反应生成 对正常成人来说，每日产生肌酸酐的量是恒定的，而且肌酸 酐的产生量与肌肉量成正比，因此一般男性的数值比女性高 一点。 肌酐的产生量一定，而且不会在过滤后被肾小管重吸收。它 的排泄量反映肾脏的机能。,速率法原理： 肌酐+苦味酸 碱性 橘红色苦味酸复合物,【试剂与器材】,1、苦味酸溶液 2、氢氧化钠溶液 3、碱性苦味酸溶液 4、肌酐标准应用液 5、器材 试管、试管架、刻度吸管、37恒温水浴箱、分光光 度计,【操作步骤】 加入物(ml) 测定管 标准管 样品 0.1
