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1、胰蛋白酶 Trypsin,生物技术,EC号和来源,胰蛋白酶Trypsin (Parenzyme) 为蛋白酶的一种 EC3.4.21.4。 牛的胰蛋白酶氨基酸残基223个，分子量为23300，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。除存在于脊椎动物外，还存在于蚕、海盘车、蝲蛄、放线菌等范围广泛的生物体中。,适应条件,胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。 胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在 pH 为 8.0 、温度为 37 时，胰酶溶液的作用能力最强。 使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。
2、因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ，如： D-Hanks 液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。,基本作用,在脊椎动物中，作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌，受肠激酶，或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶，是肽链内切酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。 它不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。是特异性最强的蛋白酶，在决定蛋白质的氨基酸排列中，它成为不可缺
3、少的工具。,识别序列,胰蛋白酶水解精氨酸或赖氨酸的羧基和别的氨基酸形成的肽键 蛋白质水解酶，能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，能消化溶解变性蛋质，对未变性的蛋白质无作用,酶活力,胰蛋白酶活力单位的定义规定为：以BAEE为底物反应液pH8.0，25，反应体积3.0ml，光径1厘米的条件下，测定A253，每分钟使A253增加0.001，反应液中所加入的酶量为一BAEE单位。 以N-苯甲酰-L精氨酸乙酯为底物，用紫外吸收法进行测定的原理是：BAEE在波长253nm下的紫外吸收远远弱于苯甲酰L精氨酸（英文缩写为BA）。在胰蛋白酶的催化下，随着酯键的水解，苯甲酰L精氨酸逐渐增多，反
4、应体系的紫外吸收宜随之相应增加。,生活应用,碱性蛋白酶是目前市场上流行的洗涤添加剂，能大幅度提高洗涤去污能力，特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等蛋白类污垢,具有独特的洗涤效果。 使用条件 底物浓度1025%，温度5060，PH值6.08.5，反应时间36小时（根据要求可长可短）添加酶0.030.06%（以水解溶液重量计）保存：5保藏，保质期一年；25储存，酶活保存期至少3个月以上,医学上应用,能使脓、痰液、血凝块等分解、变稀，易于引流排除，加速创面净化，促进肉芽组织新生，此外还有抗炎症作用。 临床上用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、瘘管等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等。 喷雾吸入，用于呼
5、吸道疾病。 也可用于治疗毒蛇咬伤。 还常用于动物细胞培养前对组织的处理。,胰蛋白酶系自牛、羊或猪胰中提取的一种蛋白水解酶。中国药品标准规定按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于2500单位。 由牛、羊、猪胰脏提取而得的一种肽链内切酶，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。白色或米黄色结晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。分子量24 000，pI 10.5，最适pH值7.88.5左右。pH9.0不可逆失活。Ca2+对酶活性有稳定作用；重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制。临床用于抗炎消肿,工业应用,工业上用于皮革制造 生丝处理 食品加工 因为可将多肽链水解成寡肽和氨基酸，因此作为食品加工助剂切割大分子蛋白。,谢谢大家！,
