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1、发酵工艺学原理 开课背景（1）何为工艺学？原来的工艺学的特性：（2）现在：强化工艺学的基本理论背景，减小课时数，以单元操作为主线条的工艺学原理第一章 绪论1-1发酵工艺学的基本概念一、 发酵工业的基本概念微生物学中的发酵的定义：微生物发酵工业的概念： 1.发酵工业生产的基本模式讲述生物工业的基本生产模式，引出生物技术、生物工程的概念，讲述两者之间的区别与联系2.发酵工业的分类酿酒业（啤酒、葡萄酒、白酒）。厌氧发酵 调味品（酱油、醋）。酵母工业自然发酵。 氨基酸发酵典型的代谢控制发酵。抗菌素发酵次级代谢控制发酵。 酶制剂工业具有重要的意义，是工业发展 的基础、科学研究的基础有机酸工业柠檬酸、葡萄
2、酸、乳酸、琥珀酸等。石油发酵降低石油熔点（石油脱腊） 有机溶剂工业乙醇、丙醇等 好氧发酵 维生素发酵VC、VB2 生理活性物质白介2环境工业废水的生物处理，废弃 物的生物降解二、 微生物发酵的基本特征1.微生物发酵过程是一个典型的化工过程 由于微生物生理特性决定了微生物在发酵过程中需要稳定的环境、特殊的条件以及以氧作为底物的供给，这些多涉及到化工生产的一下领域：（1） 质量的传递氧的供给、代谢物的排泄等（2） 热量的传递微生物呼吸产热，微生物生长于代谢需要稳定的而严格的温度条件。（3） 动量的传递涉及到搅拌轴功率的计算，他与溶氧、气液混合的关系（4） 微生物的反应工程涉及到微生物的生长动力学模
3、型的建立，产物生成动力学模型的建立。2.微生物发酵过程是一个典型的代谢控制发酵从微生物发酵的历史角度看，最早的微生物发酵是一个自然发酵过程，现代微生物工业通常是指微生物的代谢控制发酵？定义：是指利用生物的、物里的、化学的方法，人为的改变了微生物的生长代谢途径，使之合成、积累、分泌我们所需要的产品的过程。以GA发酵为例，建树微生物代谢控制发酵的意义。3.微生物发酵工业又是一个有别于化工过程的一个工业 有以下几个特征：（1） 反应条件温和通常由于微生物的生理特性，要求温度为30-40pH值中性偏酸性酵母、霉菌、放线菌等pH值中性偏碱性细菌的发酵（2） 无菌发酵整个反应过程要求无菌：培养基无菌、空气
4、无菌、 补料和取样要求无菌操作、某些工程菌，其尾气也要求进行无菌处理。（3） 非连续性生产微生物的生理特性决定了发酵过程的非连续性大部分的工业发酵是以间歇操作为基础进行的，目前可以实现连续化生产的是：啤酒的连续化生产1-2微生物工业发酵的历史及发展方向一、 微生物工业发酵的历史 微生物发酵有着悠久的历史，几千年前的酿造实质上就是一个典型的微生物发酵过程，尽管 近几十年的来微生物发酵不但在应用领域上更加广泛，更重要的是建立了许多新的微生物发酵理论体系，诸如：代谢控制发酵、基因工程菌发酵等微生物发酵的发展可以分为以下几个阶段：1.自然发酵阶段传统的酿造业，目前在国民经济和人民生活中仍然占有重要的地
5、位。2.纯培养阶段这一阶段是微生物发酵工业从自然发酵发展到今天的代谢控制发酵的转折点，由于微生物纯培养技术的建立和发展，大大推动了发酵过程的控制，提高了发酵生产效率，更重要的是推动了微生物学科的发展，使人们从简单的发酵现象中发现了微生物的存在，进而对微生物有了进一步的认识和了解；在此基础上发展起来的菌种的分离、无菌技术、纯培养技术、菌种诱变等为后来的微生物发展奠(dian)定了基础。3.通气搅拌发酵阶段1929年，弗莱明发现了青霉素，并证明了其在医学上的作用，但是青霉素的工业化生产却限制了他的广泛应用，特别是20世纪的三、四十年代广泛流行的肺结核，以及第二次世界大战期间大量的伤病员，推动了青霉
6、素工业化生产的科学研究与开发。当时，1000个300ml的三角瓶连续摇动7天，方能生产出80万单位的青霉素1只，可见。后来美国的化学工程师参与了青霉素的工业化生产的研究，发明了一个2吨的通气搅拌发酵罐，4.代谢控制发酵阶段 代谢控制发酵的概念的提出最早源于日本人在GA发酵上取得的成功。1956年日本人“木下”，利用成功地进行了GA的发酵法生产，从此以后，“木下”等人致力于相关的发酵的理论研究，并正式提出了“代谢控制发酵” 的概念。利用代谢控制发酵的基本理论，目前已成功地进行了大多数的氨基酸的发酵法生产，同时也完成了诸如：肌苷酸（AMP）、干扰素等新型药物的开发生产。代谢控制发酵理论的建了和应用
7、为微生物工业发酵的理论和实践作出了重大贡献，也是未来微生物发酵工业研究和发展的方向（为何这样讲？）大多数的工业产品并不是微生物代谢的末端产物，而是微生物代谢的中间性物质，要合成、积累这些物质，必须解除他们的代谢调控机制二、 微生物发酵工业的发展方向微生物发酵工业有着悠久的历史，在国名经济中占有重要的地位，21世纪又是生物的，体现在哪里？1. 从工业领域看微生物发酵将占据越来越重要的地位，具体的讲：（1） 通过生物工程解决能源问题能源问题是全球面临的问题，生物工程如何解决？ 太阳能 淀粉、纤维素 酶工程 G 发酵 乙醇 能源 乙 烯（目前已取得突破性进展） 生物工程作为桥梁，2000年世界产值已
8、达50亿美元（2） 取代部分化工工业许多化工产品的生产由于严重的污染和生产效率问题，而为生物工程取代，例如：乙醇、甘油、乳酸等 （3）农业：生物农业、农产品加工等方面 （4）医药： 2.从产品角度看，应围绕下列领域： （1）酶制剂工业：即是生产工具，又是科学研究的工具和基础 （2）新型抗菌素工业和维生素行业 （3）氨基酸及多肽发酵 (4)生物免疫物质：白介素-2、干扰素、抗肿瘤物质等 （5）细胞工程及疫苗 3.从科学技术角度看（1） 底物基质的转变 以葡萄糖为底物的发酵转变为以更为广泛的基质为原料，特别是以废弃物为基质的发酵，废弃物资源化是其发展方向。（2） 开发新产品利用现代生物技术为基础，
9、开发新产品，新的产品层出不穷，使得微生物发酵向国民经济的各个角落渗透。（3） 微生物发酵向着大型化、自动化、连续化的方向发展。 英国帝国化学公司，甲烷菌发酵罐的容积已达到3000m2 自动化：电子计算机的广泛应用以及发酵过程中的各种参数的自动检测，使得三、 建国50周年，发酵工业回顾？四、 本课程的内容和任务本课程是生物工程专业本科生的专业基础必修课程，是一门以微生物、生物化学、化工原理等课程为基础，以微生物发酵过程中各种单元操作为主线条，对微生物发酵过程中的基本原理进行阐述的课程。其基本内容如下：1. 发酵生产用菌种及其有关知识菌种选育包括菌种保藏 生产过程中菌种的扩大培养 2. 培养基的制
10、备及灭菌包括：工业发酵用原料的选择与处理 培养基的灭菌原理和方法 工业灭菌的工程计算3. 发酵机制包括：乙醇、甘油、谷氨酸、柠檬酸、赖氨酸、抗生素等4. 发酵过程及控制包括：温度的变化及控制 pH值的变化及控制 氧传递动力学 泡沫的消长规律及控制教材：酶乐和：生化生产工艺，浙江大学出版社参考书：1. 姚淑华：微生物工程工艺原理，华南理工大学出版社2. 刘如林：微生物工程概论，南开大学出版社3. 张克旭：氨基酸工艺学，轻工业出版社4. 陈宁:代谢控制发酵，轻工业出版社 思考题： 能源问题是全球面临的问题，生物工程将如何解决？写出一遍综述。 第二章 微生物发酵用菌种及其扩大培养2-1微生物发酵工业
11、用菌种一、 微生物发酵工业用菌种的特点及要求 微生物发酵工业用菌种因不同的发酵对其要求各异，就是同一种产品的发酵生产，其菌种的特点和要求因不同的原料和生产设备的不同也有很大差异，例如：GA 的发酵： 以淀粉质为原料：要求VH-, 以糖蜜为原料：因为糖蜜本身含有非常丰富的VH 但是作为工业微生物发酵使用的菌种，通常有下列特点：1.具有稳定的遗传学特性 这对于工业化生产是很重要的，通常工业化生产整个周期很长，在一个发周期中，菌体至少应该增殖一次，在增殖过程中，菌体应该保证原菌的遗传学特征，（尽管菌体生长的环境改变了，压力、基质、溶氧等）2.微生物生长和产物的合成对于基质没有严格的要求换言之，可以广
12、泛的使用各种原料作为生产用的底物，某些微生物对于底物有着严格的要求，对于碳源要求单一，这对于微生物的发酵工业提出了严格的要求，增加了生产成本。 3.生长条件易于满足 在微生物的工业化生产过程中，某些环境条件很难实现。氧的传递和供给就是一个很难完全满足的条件，特别是对于高粘度、高浓度的发酵体系。 对于微生物的生长往往存在一个“临界溶氧浓度”，低于这个溶氧浓度，氧就成了微生物生长的限制性因子，这个溶氧浓度越高，说明菌体生长条件越易满足，从另一种意义上讲，工业化的生产成本就越低。 pH值:中性偏酸性，偏碱性，强烈的pH值易改变产物和底物的状态。4.对于细菌，希望具有抗Phage的能力。 5.具有较高
13、的各种酶活力，可以在一定的范围内提高生长速率和反应速度，进而可以缩短发酵周期，降低生产成本。 6.对于胞外产品，细胞膜具有良好的渗透性，或者细胞膜的渗透性可以调节，细胞不易发生菌体自溶。 对于胞内产品，要求菌体易分离和收集，菌体易破碎； 对于基因工程菌，通常目的产物存在于包含体 内，对于包含体，要求在细胞破碎是不易破碎，而在目的产物的分离提出时，则易破碎。二微生物发酵工业用菌种的种类 野生型 从菌种的遗传学特征上可以把菌种分为： 培养：营养缺陷型从微生物分类学的角度，分为1. 细菌类： 短杆菌：GA,Gln,lys 枯草芽孢杆菌：淀粉酶（BF7658）、碱性蛋白酶等 地衣芽孢杆菌：HASS(耐高温-淀粉酶) -Amylase 苏云金芽孢杆菌：BT生物农药 梭状芽孢杆菌：丙酮、丁
