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1、10.4.1 测量波长和标准曲线的制作,1.测量波长的选择,无干扰: 选择max,有干扰: 干扰最小,吸收最大,10.4 吸光光度分析及误差控制,定量方法: 标准曲线法,配制系列待测物标准溶液: C1、C2Cn 相同条件下测吸光度: A1、A2An,标准曲线的制作:,2. 标准曲线的制作,参比溶液选择不当， 参比与待测液的吸收池厚度不等， 吸收池位置不妥， 吸收池透光面不清洁等. 被测物质在低浓度时显色不完全等。,标准曲线不过原点的原因:,10.4.2 对朗伯-比尔定律的偏离,负偏离,正偏离,1. 非单色光引起的偏离,2.介质不均匀引起的偏离,3.由于吸光物质本身的化学反应引起的偏离,4. 显
2、色反应的干扰及其消除: P325,10.4.3 吸光度测量的误差,吸光度的读数只有在一定范围内，读数误差才比较小。,吸光度的读数误差即为浓度的测量误差，故吸光度应控制一定的读数范围。,即透光率读数的绝对误差是均匀的。,测量误差与透光率读数范围的关系：,T为透光率的读数误差, 一般为0.01.,Er-T 关系图,T = 36.8 % A = 0.434 时误差最小 .,Er4%时: T: 15%65 % A: 0.20.8.,10.5 其他吸光光度法,10.5.1 目视比色法 用眼睛观察、比较溶液颜色 深度以确定物质含量的方法。,10.5.2 示差吸光光度法,1. 示差吸光光度法的原理 (高浓度
3、),常规法:,以试剂空白为参比.,示差法:,以浓度为 Cs 的标准溶液为参比(CsCx),示差法定量依据,2. 示差吸光光度法的误差,例题,一未知浓度的有色溶液采用普通光度法,其吸光度值为1.22,相同条件下测得同一物质标准溶液的吸光度为1.0, 如改用示差法测定未知浓度的溶液,其吸光度有多大？,解:,普通光度法: As=1.0 Ts=10% .,示差法:,扩大了10倍,Ax=1.22 Tx=6%,10.5.3 双波长光度法 P329 10.5.4 导数光度分析法 P331,10. 6 吸光光度分析法的应用,10.6 .1痕量金属分析 10.6.2临床分析 10.6.3食品分析 10.6.4其
4、他应用,1. 弱酸弱碱离解常数的测定,HR = H+ + R-,C= HR + R,说明:AHR-酸性溶液中全部以HR存在时的吸光度. AR-碱性溶液中全部以R存在时的吸光度. A-某PH下HR+R的吸光度. 且三个吸光度的测定波长相同.,2.络和物组成的测定,(1)饱和法(摩尔比法),M + nR = MRn,(1)固定CM, 改变CR ,使其从 0 开始增大. 配制系列标 准溶液.,(2)以试剂空白为参比在特定波长测定A.,(3)以A对CR/CM作图.,(2)连续变化法(等摩尔系列法),M + nR = MRn,(1) 固定CM+ CR =C 常数 (CM / C 从 0 1), 配制系列标准溶液.,(2)在络和物的max处测定A.,(3)以A对CM/C作图 , 求得CR / CM =n.,CM / C =0.5, n = 1,CM / C =0.33, n = 2,
