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1、项目11 对乙酰氨基酚片的质量检验,健雄职业技术学院,健雄职业技术学院,11.1紫外可见分光光度法概述 ？问 题,为什么上述溶液呈现不同的颜色？,光的分类,单色光：只具有一种波长的光。 混合光：由两种以上波长组成的光，如白光。,健雄职业技术学院,物质的颜色,物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性的吸收作用而产生的，物质的颜色由透过光的波长决定。,如果两种适当颜色的光按一定的强度比例混合可以得白光，这两种光就叫互为补色光。物质呈现的颜色和吸收的光颜色之间是互补关系。,健雄职业技术学院,互 补 色,例：硫酸铜溶液吸收白光中的黄色光而呈蓝色； 高锰酸钾溶液因吸白光中的绿色光而呈紫色。,健雄职业
2、技术学院,波长与光谱,健雄职业技术学院,*,11.2紫外-可见分光光度计的结构与原理,UV-7504,光源,单色器,吸收池,检测器,信号显示系统,健雄职业技术学院,11.2.1紫外-可见分光光度计的主要部件光 源,光源：提供符合要求的入射光。 要求：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱， 具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。,紫外光源-氘灯,可见光源-钨灯,健雄职业技术学院,单色器,作用：从连续光源中分离出所需要的足够窄波段的光束。 常用的元件：棱镜、光栅,健雄职业技术学院,吸 收 池,1cm 2cm 3cm,吸收池：又叫比色皿，用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件。,
3、主要有石英吸收池和玻璃吸收池两种。在紫外区须采用石英吸收池，可见区一般用玻璃吸收池。,健雄职业技术学院,检 测 器,利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。,常用的有光电池、光电管或光电倍增管。,健雄职业技术学院,信号显示系统,信号显示器： 1、以检流计或微安表指示仪表 2、数字显示和自动记录型装置,健雄职业技术学院,11.2.2紫外-可见分光光度计的类型,,单光束分光光度计（测量结果受光源的波动影响较大） 双光束分光光度计（能自动消除光源强度变化所引起的误差） 双波长分光光度计,健雄职业技术学院,11.5紫外-可见吸收光谱曲线 吸 收 曲 线,健雄职业技术学院,吸收曲线：测定某种物
4、质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图。,11.6定量分析 定量基础,KMnO4 的吸收曲线,最大吸收波长，max,定量分析的基础：某一波长下测得的吸光度与物质浓度关系的有关,健雄职业技术学院,定性基础,光谱定性分析基础：吸收曲线的形状和最大吸收波长,健雄职业技术学院,11.6.1.2朗伯-比尔定律,I0：入射光强度 I： 透过光强度 c： 溶液的浓度 b： 液层宽度,T透光率（透射比）,A吸光度,健雄职业技术学院,朗伯定律,比尔定律,与入射光波长、溶液的性质及温度有关。当这些条件一定时，代表单位浓度的有色溶液放在单位宽度的比色皿中的吸光度。 A是无量纲量。,c的单位
5、为gL-1，b的单位为cm时，以a表示，称为吸光系数，其单位为Lg-1cm-1， A=abc。,c的单位为molL-1，b的单位为cm，用表示。称为摩尔吸光系数，其单位为Lmol-1cm-1， A=bc。,健雄职业技术学院,吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数； 不随浓度c和液层厚度b的改变而改变； 在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关； 同一吸光物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，常以max表示； max表明了该吸收物质最大限度的吸光能力。,摩尔吸光系数的讨论,定量分析时，通常液层厚度是相同的，按照比尔定律，浓度与吸光度之
6、间的关系应该是一条通过直角坐标原点的直线。但在实际工作中，往往会偏离线性而发生弯曲。,偏离朗伯-比尔定律的原因,应用朗伯-比尔定律时必须符合三个条件： 入射光是单色光 被测样品必须是均匀介质 在吸收过程中，吸收物质之间不能发生相互作用,(1)比尔定律的局限性,比尔定律假设了吸收粒子之间是无相互作用的，因此仅在稀溶液（c 10-2 mol/L )的情况下才适用。,(2)非单色光引起的偏离,朗伯-比尔定律只对一定波长的单色光才能成立，但在实际工作中，入射光是具有一定波长范围的。,(3) 化学因素 溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化也会引起偏离。,例：,测定时，在大部分波长处，Cr2O72-的k值
7、与CrO42-的k值是很不相同的。A与c不成线性关系。,11.6.2标准曲线法 定性定量方法,定性 定量（单组分、多组分）,a 不重叠,b 重叠,计算题,1.某化合物的最大吸收波长max=280nm，光线通过该化合物的1.010-5molL-1的溶液时，透射率为50%（用2cm吸收池），求该化合物在280 nm处的摩尔吸光系数。 2.某试液显色后用2cm吸收池测量时，T=50.0%。若用1cm或5cm吸收池量，T及A各为多少？ 3.某一溶液，每升含47.0mgFe。吸收此溶液5.0 mLl于100mL容量瓶中，以邻二氮菲光度法测定铁，用1.0cm吸收池于508nm处测得吸光度0.467.计算质量吸光度系数和摩尔吸光系数。已知M（Fe）=55.85gmol-1,
