《DNS法测定还原糖》由会员分享，可在线阅读，更多相关《DNS法测定还原糖（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、DNS法测还原糖方法一 原理 DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm处有吸收，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。 二 试剂及方法2.1 试剂 1. 1 mg/ml的葡萄糖溶液2. 3,5二硝基水杨酸 用 400mL 蒸馏水溶解 6.3g3，5二硝基水杨酸，逐步加入 21g 氢氧化钠，再加入182g 四水合酒石酸钾钠、5.0g 苯酚、5.0g 无水亚硫酸钠，温水浴(不超过 48)，不断搅拌，直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至 1000
2、mL，保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝，静置 57 天后使用，贮存期为 6 个月。2.2 葡萄糖标曲的绘制表1 葡萄糖标曲的绘制方法试剂试管012345葡萄糖标准液(ml)00.10.20.30.40.5蒸馏水(ml)0.50.40.30.20.103,5-二硝基水杨酸(ml)0.50.50.50.50.50.5糖含量（mg）00.10.20.30.40.5混合均匀，沸水浴5min，冷却后加入4mL蒸馏水，混匀，在540nm下测OD值2.3 发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3，加入稀释和的发酵液0.5 ml，加入 DNS试剂0.5 ml 混匀，沸水浴5min，冷却后加入4 ml蒸馏水混匀，测OD540表 2 样品的测定方法管号 012还原糖待测样品 （mL）0.00.50.5蒸馏水 （mL）0.50.00.0DNS试剂 （ mL）0.50.50.5蒸馏水 （mL）444A540 nm计算所得还原糖含量 （mg）三 结果计算3.1 标曲3.2样品的还原糖含量
