级复习动物细胞培养和核移植技术课件

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1、动物细胞工程,通常采用的技术手段,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体,动物细胞核移植,是其他动物细胞工程技术的基础。,动物细胞工程,2、找出关键词并理解它们的含义。,3、叙述动物细胞培养的过程。,细胞贴壁,细胞的接触抑制,原代培养,传代培养,细胞悬液,1、动物细胞培养的概念是什么?该技术实施的原理是什么?,一、动物细胞培养,过程:,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液,胰蛋白酶,10代50代细胞,部分细胞核型可能改变,原代培养,50代以后的细胞,无限传代,传代培养,细胞株,细胞系,单个细胞,加培养液,细胞接触抑制,胰蛋白酶处理,分瓶培养,10代以内,细胞为二倍体核型,通常取动物胚胎或

2、幼龄动物的组织、器官,因为其分化程度低、增殖能力强,更容易培养。,1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗?,2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞?,成块的组织不利于培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养。,3.人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?,(三)动物细胞培养条件,能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶?,1、无菌、无毒的环境,对培养液和培养用具进行无菌处理; 在培养液中添加一定量的抗生素; 定期更换培养液;,2、营养,葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等,动物血清、血浆,3、温度和pH,温度36.50.5度,pH7.27.4,4、气体环境,O2和CO2(95%空气和5% CO2 ),O

3、2是细胞代谢所必需的。,CO2维持培养液的pH。,阅读第46页,(四)动物细胞培养技术的应用,1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等;,3、用于检测有毒物质及毒性;,2、动物基因工程离不开动物细胞的培养;,4、培养正常或各种病变的细胞,用于生理、病理、 药理等方面的研究。,阅读第46-47页,获得细胞 或细胞产物,细胞的全能性,细胞数目增多,一般为植物体,培养结果,快速繁殖、培育脱毒作物等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物细胞和动物细胞培养的比较,二、动物体细胞核

4、移植技术和克隆动物,克隆就是无性繁殖,具体地说,是指 一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。,a.分子水平上:,b.细胞水平上:,c.个体水平上:,1. 什么是克隆?,一般指DNA克隆。,指一个单一的细胞分裂所形成的细胞群体。,指基因型完全相同的两个或一个群体。,动物体细胞核移植技术,1.回忆克隆羊“多莉”的培育过程,核移植,2、克隆动物能否用类似植物组织培养的方法获得?为什么?,目前不能。,因为动物细胞的全能性随着分化程度的提高逐渐受到限制。目前,用动物体细胞克隆的动物,实际上是通过核移植来实现的。,1、说出动物细胞核移植概念、分类。 2、简述

5、体细胞核移植的过程、原理。,( M卵母细胞),减数第二次分裂中期,2.结合P48图2-21,叙述克隆高产奶牛的培育过程。,将供体细胞注入去核卵母细胞,核移植,胚胎移植,供体细胞培养,供体细胞(供核),细胞培养,体细胞,M期卵母细胞 (供质),去核,无核卵母细胞,注入,细胞融合,重组细胞,重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛,过程:,整个过程用了哪些技术? 细胞培养、核移植、胚胎移植 新生牛的性别、基因? 性别与供体相同、基因与供体的基本相同 繁殖方式? 无性繁殖 原理? 动物细胞核的全能性,归纳:,1、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?,克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核,但核外还有少部分DNA(如线粒体DNA)来自受体卵母细胞。,不是,(三)体细胞核移植技术的应用前景,阅读P49-50,1、畜牧业方面:,2、医药卫生方面:,可以加速家畜遗传改良的进程,促进优良畜群繁育。,保护濒危物种,增加其存活数量,生产医用蛋白质,组织器官的移植,3、其他领域,了解胚胎发育及衰老过程,更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病,(四)体细胞核移植技术存在的问题,1、成功率低,2、克隆动物存在健康问题,

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