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1、实验三 肠杆菌科细菌检验,目的要求,掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术,实验材料,一、菌种： 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS） 二、生化管： KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管（1套/2人） 三、诊断血清： 沙门菌多价 四、其他： 玻片、盐水、接种环（针）、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试剂、液体石蜡,实验内容,一、菌落观察： 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS） 菌落形态、颜色、溶血现象、迁
2、徙生长现象观察与描述 二、形态观察： 所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述,三、生化实验： 1. 触酶试验：,2. 氧化酶试验： 3. KIA试验（1支）： 4.半固体试验（1支）： 5. 肠杆菌科微量生化编码管（1支） 6.沙门菌血清学玻片凝集试验,实验内容（2人/组）,检验程序,1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别,肠道杆菌的生化反应鉴定,2. 初步分三组,3. 肠道杆菌属间鉴定,麦康凯琼脂（MACC） 蛋白胨 20g 氯化钠 5g 琼脂 20-25g 蒸馏水 1000ml 乳糖 10g 1%中性红水溶液 5ml 胆盐 5g,SS琼脂 (四种配方 ),MACC,SS,蛋白胨
3、 10g 葡 萄 糖 1g 氯化钠 5 g 乳 糖 10g 牛肉膏 3 g 硫代硫酸钠 0.2g 琼 脂 16g 硫酸亚铁 0.2g 水 1000ml 0.4%酚红 6ml,双糖铁培养基(KIA),细菌在KIA中的生长现象,观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑,上层固体斜面：乳糖+指示剂,下层固体：葡萄糖+指示剂+FeSO4,观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、H2S,细菌在半固体培养基中的生长现象,观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。培养基混浊。 无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。培养基透明度无变化。,有动力 现象,无动力 现象,
