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1、实验11 植物的组织培养,一、实验目的： 1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用,二、实验原理：,植物体细胞全能性,繁殖方式：,无性繁殖（有丝分裂）,优势：,繁殖速度快而且可以保持亲本的优良性状,三、植物组织培养基本过程,胚状体,细胞排列松散、无规则的薄壁细胞，分裂能力强,液体悬浮培养,四、植物组织培养的条件,1、离体（外植体）,外植体的选择：,嫩枝或新生芽,（细胞分化程度低， 生理状态好，容易脱分化和再分化）,2、营养条件：培养基配置,（1）成分：,大量元素（N源）、 微量元素 、 有机物（C源）、激素（生长素、细胞分裂素等）、琼脂,（2）类型：,MS培养基,发芽培养基,生根培养基,
2、3、不同植物激素使用顺序和使用量,书P60,4、环境条件,适宜的PH、温度和光照等,注意： 整个操作及培养过程中，都需要一个无菌环境,脱分化：一般遮光处理 再分化：需要适宜光照,制备MS固体培养基,外植体消毒,接种,生芽,定植,五、实验步骤,移栽锻炼,冲洗酒精次氯酸钠2次无菌水冲洗,生根,书P60,从状苗,此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。,在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。,1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？,2、培养过程中为什么需要进行光照,思 考,？,1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、次氯化钠 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。,3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？,激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响。,激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响,
