酵母菌、霉菌、放线菌个体形态观察

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1、实验四 酵母菌、霉菌、放线菌 个体形态观察,一 实验目的,学习并掌握观察酵母菌、霉菌和放线菌形态的基本方法,了解常见菌种的的基本形态特征; 学会插片法对微生物的个体形态进行观察。,二 实验原理,微生物菌落即微生物聚集在一起的群体结构。在自然界中,我们肉眼所见到的微生物都是以菌落状态存在,不同种类的微生物有其特定的群体结构。因此,根据群体结构(菌落特征),我们可以初步把它们“分门别类”作粗略鉴定。本实验通过对细菌、放线菌、酵母菌,霉菌等四大类微生物菌落特征的观察,学习以菌落特征来区分四大类微生物的基本方法。,三 实验材料,第二周从土壤中通过稀释平板分离得到的微生物; 标准菌株(酵母菌、霉菌、放线

2、菌); 载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯及火柴、尖头镊子、石炭酸复红染色液、显微镜等。,四 实验步骤,(一)菌落特征的观察 用肉眼观察生长在琼脂平板上的各种霉菌菌落,并根据下列要求对每种霉菌的菌落特征加以描述。 1.菌落的大小:局限生长或蔓延生长,菌落的直径和高度。 2.菌落的颜色:正面和背面的颜色,培养基的颜色变化。 3.菌落的形态:棉絮状、网状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。,真菌的菌落,细菌的菌落,真菌的菌落特征可作为分类依据之一:,四大类微生物菌落比较表,(二)个体形态特征的观察插片法,接种和分离工具 1接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8

3、.小解剖刀,(二)个体形态特征的观察插片法,(以放线菌为例) 接种:挑取菌种在培养基平板上密集划线接种或取0.2ml菌液涂布平板; 插片:无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45角插入平板琼脂接种线上; 培养:将平板倒置,于28培养3-5天; 镜检:用镊子小心取出盖玻片,用纸擦去背面培养物,有菌面朝上放在载玻片上,通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察(在盖玻片菌体附着部位低价0.1%吕氏碱性美蓝染色后观察效果更好)。,五 注意事项,在插片法操作过程中,注意在移动有附着有菌体的盖玻片时勿碰动菌丝体,必须菌面朝上,以免破坏菌丝体形态; 用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹,以免破坏细胞; 滴加染液要适中,否则用盖玻片覆盖时,染液过多会溢出,过少会产生大量气泡; 盖玻片要缓慢倾斜覆盖,以免产生气泡。 在直接制片观察中,用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心,尽量减少菌丝断裂及形态被破坏。,六 思考题,1、描述自己分离到的微生物的菌落特征及个体形态特征? 2、总结利用插片法进行个体形态观察的操作要点?,

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