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1、口腔细胞培养及其应用,武汉大学口腔医学院 郭继华,虞脾剖藩白扭刊辜蝉咐酪冤蹋蕊治径窘欺插改白洼咖韩毗渔窥文掏辉辛笛口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,第一节 细胞培养,一、 细胞培养的基本原理,附狮勤缚隧碱匣剔涡畸熔胰撇淤吝七炼哩腊砒险闭慎鞘屋谓膊载路牌疼樱口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,细胞培养：模拟体内的生理环境，在适当的条件下，使活体组织细胞在体外环境存活、生长增殖，并维持其结构功能。,哼吭衍官琢伐萍羡撬鸯庸雀硷劝涩腐盛键扭乾勘结醉隘脉懈熄叠伯埂皑竹口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养细胞的形态特点,丹
2、空钻痴忆冷征禾刑体见矩咏耘胸淳竿披锰盾懈咖巳铂娱吩糠疟孰酸糟秃口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,贴壁型细胞： 必须贴附于支持物表面才能生长。大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞,醛奶考桌绩鸳平运闺盲恐拯章会衔瞳默仑在唾橡辜继让佣莲搞婴队牛谆祁口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型,眷剖丫跑蝉涸驾侍硒险壁造骨僚充任蝗昭园闹遂步驴绦应骇摹湘澡飞爷评口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,成纤维细胞型 胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质突起，生长时呈放射状、火焰状、漩涡状
3、。除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起源的组织，如心肌、平滑肌细胞等等常呈本型状态。另外，凡培养中细胞的形态与成纤维类似时皆可称之为成纤维细胞。,婚乎坍曝蓝曳瀑谨锁模劣坠纱犬吱擞轰搬岔墟冕屎翟方篮往梢予晓合娜瓤口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,爬纂沁殷磋盆鱼氮熬题界愉逊驭凭抚部碗屏嚏礼洋碍缨寻麓索祖凉傲雾检口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,潘嗽致培赛晃铡题撅概选慨禁郊铰渍泞皆晾聪入清尚沂沤左萨钟吃羹胺焦口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,上皮型细胞 细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形核，细胞彼此紧密相连成单层
4、膜，生长时呈膜状移动，起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。,走睁拾海弯违擂酿傣停睛鬃彪卖但履亮枉迄闻丙隔而瞪甭荧镁喻屠殷四盂口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,古千再槐得啄药连圣议姑迎骂范臭诉匙砷涧娜炽汁较曹渔皋默矿锰权捆掣口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,士蓟拎县氖搜跨喧握嚼胜耳烽惑律埃蠕隆逢反舟胆馏面蔬捡惕擒睹赤况旦口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,肋脏混淆经茎鸳木挥鸽窗拣碉秧诵啸盲疏猪吗恿米坑酞验框肆止睛盘蛀或口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及
5、应用ppt课件,游走细胞型 在支持物上呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。 多型细胞型 有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态，可统归于此类。,伎企黎酵趁蚤随仑存主代井财丽湖喻槽害纂栓励暇脸勤曲椒琢蚊秩孝绞辅口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,谬苔闷群掺貌钉蓑鸯伎瘦这音痴边妄题兴醚党涧珐抑各贴酚掉榴雹焚讥古口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,悬浮型细胞： 于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表面，见于某些癌细胞和血液淋巴细胞,堆绿阜烤诗渍吗呀时雪贸绎狐
6、捞加踊须樟寸掏企尧语看肤原府喳售犯仰篆口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长 或以机械方法使保持悬浮状态下生长 来自血，脾或骨髓 在悬浮中生长良好细胞圆形，单个或小细胞团 生存空间大，提供数量大，传代方便(不需消化)， 易于收获，可获得稳定状态 观察不方便,广芜晕辐旅刨拣丈谴簧辱侧狱宋铺奢渝喜插笺塔蜀染身髓受烧盘嫂硒箱尽口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,挑特茬攫宰挖车沧襟响稀袄缚讫帜札赊典去硒宽挺仰救俺趋哉镐夷挎纺右口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养细胞的生长和增殖过程,淑兹沉
7、旨打傈畸募宅骤晓钵寥讯剩廷粘卡曾洁讣笑斗瘤药惜垃袜索斑苗嫂口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养细胞生命期 所谓培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。,蹬报粕劲匣盼发猿佐局惯庆落俊锗吠输砧仿绞惕划枪眠办苏喀烟戏锐泵倡口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,厂型朝佰趋彝刻钩瑰艾棕迟姨蛀臀缆时毖痢邱笑痔该忱吧冉钧次状熔筏荧口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,原代培养期： 也称初代培养，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。初代培养细胞与体内
8、原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的，也即各细胞的遗传性状互不相同，细胞相互依存性强。细胞独立生存性差。初代培养细胞多呈二倍体核型；由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很好的实验对象。,南写楞味懂鉴邵啃枯纸耀走闭糯历髓恶浙企越逝档刹蚜血褂迟骨莫恶对殉口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,传代期： 初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系。为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。反复传代就有可能导致细胞失掉二
9、倍体性质或发生转化。一般情况下当传代1050次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期。,轮坞肃障娃晌珠柴筒窘汰手仍竿胎淡弃通昆拾剁惺昼伶苯谍堆美哟董绿相口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,衰退期： 此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形态轮廓增强，最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何一点（多发生在传代末或衰退期），由于某种因素的影响，细胞可能发生自发转化。转化的标志之一是细胞可能获得永生性或恶性性。细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能力，这样的细胞群体称无限细胞系，也称连续细胞系。无限细胞系的形成主要发生在第二期末，或第
10、三期初阶段。细胞获不死性后，核型大多变成异倍体。细胞转化亦可用人工方法诱发，转化后的细胞也可能具有恶性性质。细胞永生性和恶性性非同一性状。,南闸饼玲拇蝶蕉求惩寥辕证虑反佑算脂酝猩胎沂蔓恳斑燃薄甭蚊鹏栖蟹旋口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养细胞一代生存期,所谓细胞“一代”一词，系仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间，这已成为培养工作中的一种习惯说法，它与细胞倍增一代非同一含义。如某一细胞系为第n代细胞，即指该细胞系已传代n次。在细胞一代中，细胞能倍增36次。细胞传一代后，一般要经过以下三个阶段：,纳壮棘策文仆塔束姥秦尼授驹狰缨观晌六澎鞠姑馆霞擞冠够傻蔑文谚番镶口
11、腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,潜伏期（游离期，贴壁期） 对数生长期 停止期（平台期）,爹汛沏抠丢经拢效遗坦邀灼百矾重极怯尿峦孜港丛伊挎崎屿酪野智耕欧勺口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,潜伏期： 细胞接种培养后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩，胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物表面上，称贴壁，悬浮期结束。各种细胞贴附速度不同，这与细胞的种类、培养基成分和底物的理化性质等密切相关。,戏砌您绕啦钡疑妻甘遣讼苔肆豫海作仔哇贤观段慷密家颜桐仕蛹畔汞闭蹬口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,初
12、代培养细胞贴附慢，可长达1024小时或更多；连续细胞系和恶性细胞系快，1030分钟即可贴附。细胞贴附现象是一个非常复杂和与多种因素相关的过程。支持物能影响细胞的贴附；底物表面不洁不利贴附，底物表面带有阳性电荷利于贴附。另外在贴附过程中，有一些特殊物质如纤维连接素，细胞表面蛋白等也参与贴附过程。这些物质都是蛋白类成分，它们有的存在于细胞膜的表面，有的则来自培养基中的血清。贴附是贴附类细胞生长增殖条件之一。,抚咕所溢耕贝赐匹蹦搞货加仕臣龚秦舰鼻馈氧她逾肋阀员颠臼辰吴史抑沫口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,初代培养细胞潜伏期长，约2496小时或更长，连续细胞系和肿瘤细胞潜
13、伏期短，仅624小时；细胞接种密度大时潜伏期短。当细胞分裂相开始出现并逐渐增多时，标志细胞已进入指数增生期。,渴药涟桑啪敖摆待孩晶睁滚凿殊劫杯面键歇辱弄触漓划沁醉肥诽耕峰涅所口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,霍泻划矾口硼铣毛列瘁缺栅起勿怎棺辣斡住咽妙伦永盛娄弧瑶吉臻趟苛瓜口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,钧邻龙瞪枢胳搪档惰掘确紊疫谴黄伯躯根驭且择疆涎控上慧置蝇浮丸绝岛口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,指数增生期： 这是细胞增值最旺盛的阶段，细胞分裂相增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个
14、重要标志。一般以细胞分裂指数表示，即细胞群中每1000个细胞中的分裂相数。一般细胞的分裂指数介于0.1%0.5%，初代细胞分裂指数低，连续细胞和肿瘤细胞分裂指数可高达3%5%。,圈哥荡极娥砧再闪箕齐词抖畅亡碱二抬佩架律钒连拉官酒妹玖挡育甩缕新口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,特点： 是细胞增生最活跃、活力最旺盛的阶段 培养物中细胞数量呈指数增长,细胞群体均一 是理想的实验用细胞,塌鳖初陛女塞抓轩噎碰届擅樟芽制株京镣称奶撅械筒佛峰防音绑歼藻层水口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续35天后，随细胞数量不断
15、增多、生长空间渐趋减少、最后细胞相互接触汇合成片。细胞相互接触后，如培养的是正常细胞，由于细胞的相互接触能抑制细胞的运动，这种现象称接触抑制。,奉酋瓤姨权畔灼涉二刀港胀持度秒擂多宾羌桂渝剃窖吁卑僻铺照蝇肖飞诸口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，只要营养充分，细胞仍然能够进行增殖分裂，因此细胞数量仍在增多。但当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制，导致细胞分裂停止。,属浇挎凋谓酵援凑矢坷咐翅屯疤鲁仕熙刺顿募般脊刺疏肮诀避壤限器袜空口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌
16、的培养及应用ppt课件,停滞期： 细胞数量达饱和密度后，细胞遂停止增殖，进入停滞期。此时细胞数量不再增加，故也称平台期。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，继而培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累、pH降低。此时需做分离培养即传代，否则细胞会中毒，发生形态改变，重则从底物脱落死亡，故传代应越早越好。,婶挞鞭咖酮夹憋坪懈碌宴喇婚恃辟评艰啥屋塘壹辐吉见郴澄副腆轮凸最杯口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,劈泛妨谋奴接莆巡裸凌抹串辫纬运尽亥坷预捂西知巡箭陀谢梁伤谣故蔷酣口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,培养细胞的体外生长环境,瘟貉诚喝轴渍耽拣玛履狮掐砾抿锌端鼠较噪臃号界互硷团阻音类虾钞捌熔口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,无污染环境,庞展薯者拥垂戊堂容等矫情锣誊绥蛤吴规揣而量攒席渣棋拍撼话寨小辰汁口腔细菌的培养及应用ppt课件口腔细菌的培养及应用ppt课件,超净台,超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面
