肝脏病的实验诊断课件

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1、第六章 肝脏病的实验诊断,南昌大学一附院检验科 万腊根 (330006),肝脏: (1)最大的腺体器官 (2)功能: 代谢功能 分泌、排泄、转化,第一节 肝脏病常见实验诊断项目,1、肝功能试验(Liver function test LFTS):用于评价肝脏损伤,肝脏功能状态而设计的实验诊断检验方法。常见酶活检、蛋白测定、胆红素测定、脂类代谢功能测定、摄取和排泄功能测定、肝硬化因素测定等。 2、非肝功能但与肝病相关的试验:肝癌标志物、肝病相关病毒测定(病毒血清学标志物和DNA检测)。,1、血浆蛋白:大都由肝脏合成包括白蛋白、糖蛋白、 脂蛋白、凝血因子、抗凝及纤溶因子、转运蛋白(除r 球蛋白外)

2、。 2、 r-球蛋白:慢性肝病时产生增加 3、肝中氨基酸及核酸的代谢: 氨基酸及核酸氨尿素经肾排泄,一、蛋白质代谢功能测定,(一)血清总蛋白,白蛋白和白球蛋白比值,1、生理: (1)95%总蛋白、100%白蛋白在肝脏中合成(120mg/Kg、半衰期19-21天、分子量66000) (2)作用:胶体渗透压,物质转运及营养 2、测定方法: (1)总蛋白:双缩脲法(参考方法为凯氏定氮法) (2)白蛋白:溴甲酚绿或溴甲酚紫 (3)球蛋白:总蛋白白蛋白=球蛋白或蛋白电泳的方法,3、参考范围: (1)生物学变异: 与性别无关; 与年龄相关:新生儿、婴幼儿及60岁以后老年人。 (2)测定的影响因素: 激烈运

3、动、直立位比卧位高、溶血和脂血标本 (3)参考值: 总蛋白:60-80g/L 白蛋白:40-55 g/L 球蛋:20-30 g/L A/G:(1.5-2.5):1,4、临床意义: (1)总蛋白及白蛋白增高:多由于水分减少(脱水、休克)。 (2)总蛋白及白蛋白减低:低蛋白血症:TP60 g/;ALB25g/L。 肝细胞损害:肝炎、肝硬化、肝癌、毒素肝损伤等。 营养不良:摄入不足或消化吸收不良。 丢失过多:肾病、蛋白丢失性肠病、烧伤及大失血。 消耗增加:肝癌、结核、甲亢。 水分增加:水钠潴留。,(3)总蛋白及球蛋白增高 高蛋白血症(hyperproteinemia)、高球蛋白血症(hyperglo

4、binemia):TP80g/L或球蛋白35g/L。 慢性肝病:自免肝、慢活肝、肝硬化、原发性胆汁性肝硬化、洒精肝。 M球蛋白血症:MM、淋巴瘤,原发性巨球蛋白血症。 自身免疫性疾病:SLE、风湿热、RA。 慢性炎症与慢性感染:TB、MP感染、黑热病、麻风病及慢性血吸虫。 (4)球蛋白减少: 生理性减少:3岁婴幼儿 免疫功能抑制:应用肾上腺皮质激素或免疫抑制剂 先天性低r球蛋白血症 (5)A/G倒置:肝病及M蛋白血症,1、生理:血清蛋白质分为前白蛋白、白蛋白、1、2、 、r球蛋六种。 2、电泳方法:原理:PH8.6时蛋白质带负电,会从阴极向阳极泳 动而分离。 方法:醋酸纤维素膜法、琼脂糖凝胶法

5、、 SDS一 聚苯酰胺凝胶电泳。 3、参考值: 白蛋白:0.62-0.71 1:0.03-0.04 2:0.06-.10 :0.07-0.11 r:0.09-0.18 4、意义: 肝病:慢性肝炎,肝硬化时 M蛋白血症:MM、原发性巨球蛋白血症 肾病综合症、糖尿病、肾病:由于血脂高可致2、 。 其它:CT、先天性低丙种球蛋白血症、r球蛋白降低。,(二)血清蛋白电泳,(三)血清前白蛋白测定,1、生理: 前白蛋白(Prealbumin)(PAB):肝脏合成分子量为62000。在电泳区带上位于白蛋白前有一条浅色区带。 是一种载体蛋白,与甲状腺素结合,又叫甲状腺素结合蛋白(thyroxin bindin

6、g prealbumin)。 能更早期反应营养状况及肝功能改变。 2、参考值: 1岁:100mg/L 13岁:168-281mg/L 成人:28-360mg/L 3、意义: (1)降低: 营养不良、慢性感染、晚期肿瘤。 肝胆系统疾病、肝炎、肝硬化、肝癌及胆汁淤积性黄疸。 对早期肝炎、急性重症肝炎的特殊诊断价值。 (2)增高,见于Hodgkin病,1、病理生理: 大部分凝血(除III因子、VWF因子)因子,抗凝血及纤溶因子均在肝脏中合成。 凝血因子半衰期短:是肝功能受损的早期指标。 血小板减少;易引起DIC。 胆汁淤积:影响VITK的及收 2、肝功能受损的凝血试验。 (1)PT测定:方法 参考值

7、: 11-14S 活动度=病PT/正常人PTX100% PTR=病PT/正常人PT INR=PTRISI 意义:超过了3S为异常,反映肝脏合成Vitk依赖因子II、是否减少的重要试验。 急性肝炎和重症肝炎:PT延长; 慢性肝炎:PT正常; 肝硬化:PT延长。,(四)血浆凝血因子测定:,(2)APTT: 方法 参考值:30-42S 意义:严重肝病时延长(延长10S的上为异常) (3)TT: 方法 参考值:16-18S 意义:肝硬化或暴发生肝功能衰竭时TT延长。 (4)AT-: 方法 参考值:90-100% 意义:严重肝病时下降,合并DIC时更明显。,1、病理生理: (1)氨的生成:氨基酸或蛋白质

8、在大肠杆菌作用产生氨。 尿素渗入肠道在大肠杆菌作用下产生氨。 肝 (2)氨的分解。氨鸟氨酸循环 尿素肾脏排泄。 2、方法:标本应在15min内分离出血浆。 3、参考值:18-72umol/L。 4、意义:(1)升高: 生理性升高高蛋白饮食。 病理性升高肝病、上消化道出血、尿毒症及肝外门脉系统分流形成。 (2)降低:贫血、低蛋白饮食。,(五)血氨的测定,病理生理: (1)脂类:胆固醇,胆固醇酯,磷脂,甘油三酯及游离脂肪酸。 (2)脂蛋白:极低密度脂蛋白、高密度脂蛋、酰基转移酶。 (3)与肝脏关系:由肝脏可合成胆固醇,胆固醇酯,磷脂,甘油三酯,脂肪酸及脂蛋白。 血脂测定可评价肝脏对脂类代谢功能。

9、(4)阻塞性脂蛋白X(LP-X):胆道阻塞时血清中出现异常大颗粒脂蛋白。,二、脂类代谢功能检测,1、病理生理: (1)血清脂类:胆固醇、磷脂、甘油三酯和游离脂肪酸 (2)肝脏与血脂: 胆固醇(cholescerol):80%由肝合成。 卵磷脂胆固醇脂肪酰基转移酶(Lecithin-cholesterol acyl transferase,LCAT)全部由肝脏合成-胆固醇酯合成 肝病时:胆固醇和胆固醇酯减少。,(一)血清胆固和胆固醇酯测定,2、参考值: 总胆固醇:2.9-6.0mmol/L 胆固醇酯:2.34-3.38mmol/L 胆固醇酯/游离胆固醇:3:1 3意义: 肝细胞损伤时:Tchol

10、,胆固醇酯 。 胆道阻塞时,游离胆固醇增加。胆固醇酯/游离胆固醇 。,(二)阻塞性脂蛋白X,1、病理生理: 胆道阻塞胆汁中的磷脂逆流入血出现大颗粒脂蛋白(阻塞性脂蛋白X(LP-X)。 2、参考值:阴性。 3、意义: 胆汁淤积性黄疸的诊断 肝内、外阻塞的鉴别诊断(2000mg/L),1、胆红素的代谢: (1)衰老RBC Hb 珠蛋白+血红素 胆绿素胆红素(80-85%来源于RBC;15-20%来源于肌红蛋白、POX、细胞色素氧化酶及骨髓无效红细胞)(旁路胆红素)。 (2)游离胆红素非结合胆红素Y、Z蛋白结合肝细胞内(SER)葡萄糖醛酸结合 结合蛋红素肠道(尿胆原和尿胆红素)。 (3)胆红素的肠肝

11、循环:肠道尿胆原肠道吸收血尿胆原经门静脉到肝脏胆红素 肠道 2、病理: 胆红素代谢障碍 (1)RBC的破坏过多 (2)肝细胞转运:结合、排泄障碍、胆道阻塞。,三、胆红素代谢检测,1、方法:J-G法(测定结合和非结合胆红素) 2、参考范围:新生儿:0-1d:34- 103umol/L 1-2d:103-171umol/L 3-5d:60-137 umol/L 成人:3.4-17.1 umol/L 3、意义 (1)判断有无黄疸,黄疸程度及演变过程: 隐性黄疸或亚临床黄疸:17.134.2 umol/L 轻度黄疸:34.2171 umol/L 中度黄疸:171342umol/L 重度黄疸:342um

12、ol/L,(一)血清总胆红素的测定,(2)推断黄疸原因: 溶血性黄疸:85.5 umol/L 肝细胞性黄疸:17.1171 umol/L 不完全阻塞性黄疸:171-265 umol/L 完全阻塞性黄疸:342umol/L (3)判断黄疸类型: 溶血性黄疸:STB伴非结合胆红素(UCB) 胆汁淤积性黄疸(阻黄):STB伴结合胆红素(CB) 肝细胞性黄疸:三个均高,1、方法: STB:J-G法 CB:1min的J-G法胆红素 UCB:STB-CB 2、参考值: CB:0-6.8mmol/L UCB:1.7-10.2mmol/L 3、意义: (1)溶血性黄疸:CB/STB20% (2)肝细胞性黄疸:

13、CB/STB:20-50% (3)阻黄:CB/STB:50% (4)肝炎早期、无黄疸性肝炎、失代肝硬化及肝癌:CB、STB正常。,(二)血清结合胆红素与非结合胆红素测定,(三)尿内胆红素测定,1、病理生理: (1)尿中不可能有UCB:可有CB (2)CB的肾阈值:34umol/L 2、测定方法: (1)加氧化法 (2)试条:重氮反应法紫色 3、参考值:阴性 4、意义:阳性提示尿中结合胆红素增加 (1)胆汁排泄受阻:肝外胆管阻塞结石、肿瘤、肝内胆管压力升高。 (2)肝细胞损害 (3)黄疸鉴别诊断: 肝细胞性或梗阻性黄疸尿内胆红素阳性 溶血性黄脏:尿胆红素阴性。 (4)碱中毒:胆红素分泌增加。,(

14、四)尿中尿胆原测定,1、生理: 胆红素肠道尿胆原吸收入血液肾脏排泄尿胆原。 2、方法:试条中的苯甲醛反应 3、参考值:定量:0.84-4.2umol/L 定法:阴性或弱阳性 4、意义: (1)在碱性尿中增多,在酸性尿中减少 (2)增多:肝阳性变损RBC破坏增加内出血及充血性心力衰竭其它:肠梗阻 (3)减少或缺少: 胆道梗阻 新生儿及长期服用广谱抗菌素,四、胆汁酸代谢检测,1、生理病理: (1)胆汁组成:胆汁酸盐、胆红素及胆固醇。 (2)代谢过程 胆固醇 初级胆汁酸(胆酸、鹅脱氧胆酸)(cholic acid chenodeoxycholic acid) 脱氧胆酸、石胆酸(lith ocholi

15、c cuid)又叫次级胆汁酸结合胆汁酸(甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸和牛磺鹅脱氧胆酸 ) 游离胆汁酸在回肠95%回吸收 结合胆汁酸。 (3)作用: 促进脂类食物及脂溶性Vitmin的吸收 保持胆固醇的溶解状态 促进胆汁的分泌 (4)胆汁酸(Bile acid BA):反应肝脏合成、摄取及分泌功能 2、方法: 空腹测定 餐后2人测定 3、参考值:总胆汁酸:010umol/L 4、意义:(1)增高:肝细胞损害胆道梗阻门脉系统进食后一过性升高,五、血清酶及同工酶检测,病理生理: 1、酶蛋白:肝脏是人体酶含量最丰富的器官,酶蛋白占2/3。 2、酶种类:数百种。 3、用于临床诊断的酶蛋白:10余种

16、。 4、肝、胆细胞特异性酶: (1)肝细胞破坏:ALT、AST、LDH、醛缩酶。 (2)肝细胞合成排泄障碍:ALP、r-GT。 (3)肝纤维组织增生相关:MAO、脯氨酰羟化酶(PH)。 5、同工酶(Lisoenzymes):有组织、细胞、亚细胞结构特异性。,(一)血清氨基转移酶及其同工酶,1、血清氨基转移酶(转氨酶)(aminotransferases)(trarsaminase) (1)生理病理: 崔化氨基酸与-酮酸之间氨基转移 ALT(丙氨酸氨基转移酶)(GPT)(谷丙转移酶)主要分布于肝中,在非线粒体中,半衰期为47h。 AST(aspratate amminotransterase)天门冬氨酸氨基转

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