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1、强 生 干 化 学 技 术 及 优 势 项 目,介绍内容：,干化学技术 优势项目,Vitros 950,临床实验室类产品（生化）：,DT60, V350/250, V950,Fusion5.1,DT 60II,Vitros 350,Vitros Fusion5.1,Ortho Clinical Diagnostics,MicroSlide 多涂层薄膜干片技术,标本,MicroSlide多涂层薄膜干片技术：将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆，血清，尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。,干 片 分 类,CM/RT,PM,IR,干片
2、(MicroSlide),钠 钾 氯,地高辛 苯巴比妥 卡马西平 苯妥因 C反应蛋白,胆固醇 甘油三酯 总蛋白 白蛋白 高密度酯蛋白 脂肪酶 尿蛋白 脑脊液蛋白 谷丙转氨酶 谷氨酸转移酶 碱性磷酸酶 r谷氨酰转酞酶 乳酸脱氢酶 肌酸激酶 肌酸激酶同工酶 尿素氮 肌酐 尿酸 乳酸 铁、总铁结合力 磷 锂,淀粉酶 胆碱脂酶 总胆红素 结合/非结合胆红素 血氨 乙醇 水杨酸 茶碱 醋氨酚 镁 二氧化碳,比色/速率法干片,免疫速率法干片,电极法干片,指示剂层 支持层,扩散层 试剂层,比色/速率法干片,通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度,指示剂层 支持层,多孔结构，允许标本通过 均匀分布标本 过滤大分
3、子（蛋白质，脂肪等） 去除干扰物质（溶血，黄疸等） 提供反射测定的背景,扩散层 试剂层,扩散层,比色/速率法干片结构,试剂层,包含检测反应所需的酶，缓冲液，催化剂等 多层试剂，控制反应顺序,比色/速率法干片结构,葡萄糖干片,指示剂层,试剂层产物与指示剂层中的染料结合时，形成有色复合物，其与分析物浓度成正比。,比色/速率法干片结构,支持层,提供反应支持基垫 允许光路自由通过,比色/速率法干片结构,反射光的测定,干扰物质,反光背景,成色层,生成纯净的反射光,光源,滤光片,接收器,接收器,接收器,透 射 与 反 射,光线经过干扰物质 光线不经过干扰物质 受影响 不受影响,尿酸,优异的抗干扰能力,Mi
4、croSlide多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果 某些干片中有清道夫层（如尿酸）：去除维他命C 和钙的干扰 某些干片试剂层下有半透膜层 （如尿素氮）：去除药物干扰,半透膜,尿素氮,溶血 血脂 胆红素等,能有效排除标本中,对检测结果造成的影响,优异的抗干扰能力,优势项目胆红素,HPLC分离的胆红素各组分,巨细胞肝炎婴儿血清 a = 游离胆红素 b = 单葡萄糖醛酸酯结合胆红素 g = 双葡萄糖醛酸酯结合胆红素 d = 和白蛋白共价结合胆红素,Figure 1, Ostrea EM, Ongtengco EA, Tolia VA, Apostol E. J
5、 Pediatr Gastroenterol Nutr 1988; 7: 511-516.,胆红素,在血液循环中结合胆红素和白蛋白形成的。 白蛋白缓慢地非酶作用置换了原葡萄糖醛酸酯。类似于糖化血红蛋白。 在长期的高结合胆红素血症后，才能检测出来。 在血液循环中的清除缓慢。半衰期和白蛋白一样，23周。 因为胆红素不存在氢键的影响，所以胆红素可以与重氮直接胆红素反应。,传统的胆红素检测方法,偶氮方法 (Ehrlich 1883). 由 van den Bergh and Muller (1916)应用于胆红素检测。 直接胆红素反应快速。 间接胆红素反应缓慢或不反应（分子折叠，不溶性）。 需要某些物
6、质的存在，才会打开游离胆红素，使溶解在水，并和偶氮试剂反应。,直接胆红素,国内长期来，误解了结合胆红素参与反应非常快，整个反应只要1分钟，被称为“1分钟胆红素”。 结合胆红素参与反应的影响因素很多。例如：反应时使用的重氮试剂的浓度、pH、反应时间等。结合胆红素的重氮反应的初期确实很快，但是，要使所有结合胆红素完全参与反应，需要30分钟以上。 目前推荐10分钟的方法。目前任何一个在自动分析仪上的直接胆红素测定都是不完全的（如：反应时间太短）。,少量游离胆红素也参与直接反应,血清中的少量游离胆红素也会参与直接反应。因为血清中有尿素、尿酸等，早期的研究已经肯定，这些物质的存在，具有促使游离胆红素打开
7、氢键、参与直接反应的可能。 按照胆红素的代谢途径，在健康人的血清中，只有由白蛋白携带的游离胆红素；被肝脏处理过的结合胆红素经胆管进入肠道，不会进入血液。所以健康人的血清内不应该有结合胆红素。,传统胆红素检测方法,具有加速剂的偶氮反应 = 总胆红素。 不加加速剂的偶氮反应= “直接反应胆红素” (van den Bergh) 或简称为直接胆红素。 间接胆红素为总胆红素减去直接胆红素。,Vitros 胆红素检测方法,现今已广泛应用 (2003年的CAP调查中在4964个实验室中，有1191个使用该法）。 总胆红素干片还是传统的偶氮方法。 BuBc干片 (游离胆红素Bu、结合胆红素Bc）为非传统方法
8、。,BuBc干片,由Eastman Kodak在 1980s早期开发。 使用染媒剂，不是试剂。 染媒剂是什么？ 染媒剂可以区分结合胆红素和游离胆红素的最大反射差。 在技术上的一个机遇。,BuBc干片技术原理,实线为Bu, 虚线为Bc. 反射最大峰: Bu 460, Bc 420 nm. 在 400 (二者反射强度相同) 和 460 nm (最大反射差)阅读。,From Wu T-W, Dappen GM, Spayd RW et al, Clinical Chemistry 1984; 30.8: 1304-9.,胆红素的临床应用,黄疸的鉴别诊断,黄疸是指高胆红素血症引起皮肤、巩膜和粘膜等组织
9、黄染的现象。,按原因分为 溶血性黄疸； 细胞性黄疸； 胆汁淤积性黄疸； 先天性非溶血性黄疸； 多因性黄疸。,按黄疸发生的部位 肝前性黄疸(溶血性和非溶血性)； 肝性黄疸(肝细胞性和肝胆小管性即肝内胆淤性)； 肝后性(肝外梗阻性)。,成功的肝胆梗阻再通后,Kubasik et al. Am J Clin Path 1985: 84;518,0,50,100,1,2,3,4,5,6,7,8,9,Days,% 总胆百分比,Bu,Bc,Bdelta,Direct,Treatment,胆红素组分的临床应用,胆红素（B）,高结合胆红素血症，尤其是阻塞性黄疸时，Bc的快速下降（Bc的半衰期仅几个小时）是阻塞
10、完全消退的最敏感指标。 不能用检测总胆红素来评价高结合胆红素血症，因为在检测的总胆红素中包含了半衰期为2-3周的B。 理想的是，使用只检测Bc的方法，临床可较好地评价高结合胆红素血症。,真实的结合胆红素优于直接胆红素,胆道阻塞解除后，结合胆红素下降迅速。 直接（和总）胆红素仍然保持高水平达数周。（D胆红素的存在） 容易产生误解，认为阻塞没有解决。,优势项目电解质,电极法干片,离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同 钾，钠，氯,盐桥,S2,S1,S3,S4,aI,ar,离子载体膜,M+ Cl,AgCl,Ag,离子载体膜,M+ Cl,AgCl,Ag,aI,ar,V,V,干片,常规,已知浓度液
11、体(参比液),待测液体(标本),离子选择电极(ISE),盐桥,ar,直接法 vs. 间接法 ISE,湿化学间接法所测量的离子,直接法所测量物质,直接法测量,间接法测试到的体积（93水相）,直接法直接测量具有临床意义的活性离子。,间接法不能纠正由蛋白质，血脂增高引起的检测结果偏离,间接法ISE电解质排斥效应,标本10微升，非水相5，水相9.5微升 稀释100倍，加入稀释液990微升，水相999.5微升 实际稀释倍数999.59.5105.211 如果标本中含K 3.50mmol/L; Na 140mmol/L 间接法实测值为：3.50105.2111003.33mmol/L 140105.211100133.0mmol/L 直接法没有电解质排斥效应！,蛋白质增高 脱水 巨球蛋白血症 多发性骨髓瘤 高球蛋白血症 肉芽肿病 某些胶原病,血脂增高 甲状腺机能减退 肾病综合症 糖原过多症 糖尿病 急性胰腺炎,疾病状态对标本的影响,直接法 vs. 间接法 ISE,
