厦门大学生命科学院生物化学课堂幻灯片第四章--蛋白质的共价结构

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1、第四章 蛋白质的共价结构,一、蛋白质通论,1. 蛋白质对生命的意义 催化功能 调节和调控功能 运动、支持和结构功能 转运功能 贮存功能 保护功能,2. 蛋白质的组成和分类 元素组成上的特点: 含N量较高,且恒定为16%左右: 蛋白质含量%=含氮量/16%=含氮量6.25 (凯氏定氮法测蛋白质含量的基础) 蛋白质的分类: 简单蛋白质 纤维状蛋白质 缀合蛋白质 球状蛋白质 膜蛋白质,3. 蛋白质结构的组织层次,一级结构 氨基酸的排列顺序 二级结构 三级结构 空间结构 (高级结构、构象) 四级结构,蛋 白 质 的 结 构 层 次 及 相 互 关 系,二级结构是三级结构的组织层次,二、 肽,1. 肽键

2、及其性质,多肽的方向及表示方法,肽键的结构特点: 1. 肽键具有部分双键的性质,所以不能自由旋转; 2. 组成肽键的4个原子和2个相邻的C在一个平面上(称为酰胺平面或肽平面); 3. 除脯氨酸的-NH2参与形成的肽键外,其余的肽平面上,两个C都是处于更稳定的反式构象;,2 肽的理化性质 2.1 肽的两性解离,pK1=2.34,pK-COOH= 3.86,pK-NH2=10.79,Pk2=8.95,pI= (3.86+8.95)/2=6.4,2.2 肽的双缩脲反应,2.3 天然存在的活性多肽,三、蛋白质一级结构的测定,测定蛋白质的氨基酸顺序的意义: 是阐明蛋白质生物学功能的基础; 是阐明蛋白质空

3、间结构的基础; 有助于揭示一级结构的变化与遗传疾病的关系; 4. 有助于指明蛋白质的进化史;,蛋白质,间接法:,直接法:,蛋白质样品(纯度97),蛋白质中多肽链的数目,1,非共价结合,变性剂,共价结合,氧化剂 还原剂,断开多肽链内的二硫键,1,水解后分析氨基酸的组成,确定N-末端和C-末端氨基酸种类,用多种方法裂解多肽链成小片段并测定其氨基酸序列,用重叠法重建完整多肽的氨基酸顺序,确定二硫键位置,(一) N-末端分析 1. DNFB法、DNS法、PITC法,2. 氨肽酶法,氨肽酶是能够从N-末端逐个水解下氨基酸的酶。,(二) C-末端的分析 1. 肼解法,2. 还原法 3. 羧肽酶法 羧肽酶A : 能释放除Pro、Arg、Lys之外的所用C-末端氨基酸; 羧肽酶B: 只能释放Lys和Arg形成的C-末端;,

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