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1、2019/4/23,生命科学学院 动物生理学教学课件,青岛农业大学 动物生理学实验教学课件,EXPERIMENT OF ANIMAL PHYSIOLOGY,目录 INDEX,EXP1.肠系膜血流显微观察 EXP2.坐骨神经-腓肠肌标本制备 EXP3.蛙心收缩记录和心肌特性 EXP4.骨骼肌收缩特性 EXP5.离体肠段运动描记 EXP6.离体蛙心灌流 EXP7.神经动作电位、肌电和肌张力同步记录 EXP8.动脉血压的间接测定 EXP9.红细胞显微计数 EXP10.血红蛋白测定 EXP11.红细胞的凝集与ABO血型鉴定 EXP12.人体心电图描记 EXP13.动脉血压的直接测定及影响因素 动物生理
2、学试验实验设计,2019/4/23,生命科学学院,2019/4/23,生命科学学院 动物生理学教学课件,肠系膜血流显微观察,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,目的要求,观察蛙肠系膜血管内血液的流动，了解外周血管的血流特点及其影响因素,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,肠系膜薄而透明，可观察血流情况及神经递质对内脏血管舒缩的作用。 动脉血管内血液由主干流向分支； 静脉血管内血液由分支流向主干； 毛细血管内血细胞往往单排流动。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍 蛙类手术器械、显微镜、任氏液、0.01%去甲肾上腺素溶液。 具体请以每组清单为准,2019/4
3、/23,生命科学学院,方法步骤,1、实验准备：损毁蟾蜍的脑、脊髓,2019/4/23,生命科学学院,先背位固定，剪开腹腔，找到肠系膜。,然后腹位固定四肢； 拉出肠系膜，用大头针将肠系膜固定在蛙板孔上。,2019/4/23,生命科学学院,2、实验观察项目,（1）动脉、静脉、毛细血管内血液流动特点。 （2）机械刺激的影响。 （3）肾上腺素、组织胺的影响。 实验报告描绘观察到的现象。,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1、固定肠系膜避免撕裂； 2、大头针斜插固定，以免遮挡物镜； 3、注意不要污染显微镜。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、根据观察结果，归纳交感神经及其递质对内脏
4、血管活动的作用。 2、如何判断动脉血管和静脉血管？ 3、微循环是如何调节的？,2019/4/23,生命科学学院,坐骨神经-腓肠肌标本制备,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学学院,目的要求,学习并掌握两栖类神经-肌肉标本的制备方法； 观察肌肉的收缩现象。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,两栖类神经肌肉标本体外保持活性的条件相对简单，操作容易，其兴奋、收缩特性与哺乳动物的类似。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍。 蛙毁脊针、蛙类手术器械、玻璃分针、锌铜弓、任氏液等。 具体请以每组清单为准,2019/4/23,生命科学学院,方
5、法步骤,1、损毁脑脊髓。 2、在两前肢附近剪断脊柱，去掉内脏，剥离皮肤，制备双后肢标本。,2019/4/23,生命科学学院,3、从正中间剪开后肢。 4、分离坐骨神经。 5、分离腓肠肌。 6、活性检验。,用线结扎 8cm左右,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1、剪刀的用法：粗剪刀用于剪骨骼、皮肤等，大剪刀用于剪肌肉、眼科剪用于剪神经、血管等纤薄组织。 2、神经组织避免牵拉及金属器械夹持。 3、制备过程中用任氏液保持神经肌肉的湿润。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、兴奋是如何从神经传递到肌肉的？ 2、肌肉收缩是钙离子有什么作用？ 3、神经兴奋与肌肉收缩如何保证是一对一的关
6、系？,2019/4/23,生命科学学院,蛙心收缩记录和心肌特性,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学学院,目的要求,了解心肌的某些特性并掌握蛙心收缩的记录方法。 观察心肌的期前收缩与代偿间歇现象。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,心肌的绝对不应期长，在心肌的相对不应期之后、节律性兴奋传来之前给予单个阈上刺激，可引起一次额外收缩，其后便产生一个较长的代偿间歇。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍。 RM6240B信号采集处理系统、张力换能器、蛙心刺激电极、铁支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板、蛙针、手术器械、丝线、小烧杯、滴管、大头针
7、、纱布，任氏液。,2019/4/23,生命科学学院,方法步骤,1、实验准备： 用蛙针破坏蟾蜍的脑与脊髓，暴露心脏，用眼科剪剪开心包膜。将连有丝线的蛙心夹在心室舒张时夹住心尖，丝线另一端连张力换能器。换能器接RM6240B信号采集处理系统。,2019/4/23,生命科学学院,2、实验操作,（1）打开仪器开关（背面） （2）双击电脑桌面“RM6240B”图标 （3）打开“实验”下拉菜单，找到相应实验项目：“循环”-“期前收缩-代偿间歇” （4）点击“开始记录”图标 单击此处观看示范,2019/4/23,生命科学学院,3、观察项目,（1）描记正常心搏活动曲线。 （2）在心室收缩期给予中等强度的单个刺
8、激，观察能否引起心脏活动的改变? （3）期前收缩和代偿间歇。,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1、实验中经常给蛙心滴加任氏液，以防心肌组织干燥。 2、引起期前收缩后，须间隔一段时间再给予心脏第二次刺激。 3、固定电极时确保电极接触心室璧，并且不得影响心室的收缩 4、实验成功的关键在于把握施加刺激的时间。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、心肌的绝对不应期长有何生理意义? 2、心肌收缩与钙离子的关系？ 3、心肌受到连续刺激后会发生强直收缩吗？,2019/4/23,生命科学学院,骨骼肌收缩特性,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学
9、学院,目的要求,熟悉神经肌肉标本的制备方法 理解刺激的强度、频率对骨骼肌收缩的影响。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,骨骼肌兴奋性较高，不应期短，可以发生收缩的叠加；刺激的频率增大到一定数值时，发生强直收缩。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍。 蛙类手术器械，任氏液，生理数据采集系统、张力换能器、肌槽。 具体以清单为准。,2019/4/23,生命科学学院,方法步骤,1、神经肌肉标本的制备。 注意问题： （1）保留股骨 （2）结扎牢固，防止滑脱 （3）肌肉、神经保持湿润,2019/4/23,生命科学学院,2、联结仪器（教师示范）,（1）股骨用肌槽的螺丝固定； （2）结
10、扎线联结于张力换能器； （小心！切勿用力牵拉换能器的弹簧片） （3）神经搭在电极上。,2019/4/23,生命科学学院,3、观察项目,（1）单收缩 （2）不完全强直收缩 （3）完全强直收缩 操作系统： 神经肌肉刺激频率典型实验 点击观看示范,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1、制备标本过程中，应随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。 2、游离神经时，切勿用玻璃分针逆向剥离，以防损伤神经干，又要避免金属器械对神经的不必要触碰。 3、请注意保存实验结果。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、骨骼肌完全强制收缩时，其细胞膜上的动作电位是怎样的？ 2、骨骼肌收缩一段时间后为什么会
11、收缩能力下降？ 3、影响骨骼肌收缩的因素有哪些？,2019/4/23,生命科学学院,离体肠段运动描记,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学学院,目的要求,观察平滑肌运动的一般特性，了解某些理化因素对平滑肌运动的影响。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,肠道平滑肌具有自律性，离体肠段在适宜条件下可保持自律性收缩的特性，其收缩频率和幅度受到某些理化因素的影响。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,兔。 哺乳动物手术器械、注射器、离体器官恒温装置、充气装置、张力换能器、RM6240B生理信号采集系统 肾上腺素、乙酰胆碱等。 具体以试验台贴
12、出的清单为准,2019/4/23,生命科学学院,方法步骤,1、实验准备 （1）恒温装置预热 38 a. 台氏液 b. 麦氏浴皿,2019/4/23,生命科学学院,注意：必须在完成预热工作后方可进行本部分操作！,（2）离体肠段制备 快速处死兔子（击打延髓或耳缘静脉注射空气，一定要迅速！） 迅速剖开腹腔 找出十二指肠，挤出食糜，剪成2cm的肠段，立即放入38台氏液中。 关键：操作迅速，否则影响实验结果！,2019/4/23,生命科学学院,（3）联结仪器（等老师来示范）,注意： 肠段浸入台氏液； 通气，控制通气速度。,2019/4/23,生命科学学院,2、实验操作,（1）打开仪器开关（背面） （2）
13、双击电脑桌面“RM6240B”图标 （3）打开“实验”下拉菜单，找到相应实验项目 （4）点击“开始记录”图标 单击 此处 观看 示范,2019/4/23,生命科学学院,3、观察项目,（1）正常运动曲线。 （2）温度的影响。 （3）乙酰胆碱的影响。 （4）肾上腺素的影响。 （5）钙离子 （6）酸 （7）碱,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1. 标本安装好后，应在新鲜38台氏液中稳定510min，有收缩活动时即可开始实验。 2. 注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38台氏液，观察到实验结果后，应立即用38台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。 3. 平滑肌反
14、应较慢，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、各种药物对平滑肌运动的影响机理。 2、实验过程中为什么要不断通气？ 3、滴加药物的顺序有什么要求？,2019/4/23,生命科学学院,离体蛙心灌流,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学学院,目的要求,掌握离体蛙心制备和灌流方法； 了解体液因素对蛙心收缩的影响。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,心肌的收缩强度、频率等受肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质以及各种离子浓度等因素影响。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍。 蛙
15、心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、RM6240生理信号采集系统、张力换能器、任氏液、长滴管、铁架台等。,2019/4/23,生命科学学院,方法步骤,1、实验准备 双毁髓 背位固定，剖开胸腔 动脉与心室之间穿双线 结扎静脉 剪口、插管 蛙心离体，联结记录仪器。,2019/4/23,生命科学学院,2、实验项目,（1）描记正常心跳曲线 （2）钙离子的影响。 （3）钾离子的影响。 （4）肾上腺素。 （5）乙酰胆碱。 仿实验结果描记曲线,2019/4/23,生命科学学院,注意事项,1、结扎静脉及固定插管时一定避开静脉窦，否则心脏停止跳动。 2、滴加药物时宜缓慢。 3、保证记录连续，及时在曲线上加以标记
16、，分析各现象产生分原因。,2019/4/23,生命科学学院,思考题,1、分析有的蛙心标本套管内液面升降不明显的原因并提出相应的对策。 2、实验过程中套管内液面为什么每次都应保持一定的高度？ 3、高Ca2+任氏液与肾上腺素引起的心脏活动变化有何不同？为什么？,2019/4/23,生命科学学院,神经动作电位、 肌电和肌张力同步记录,请务必认真学习本课件 然后开始实验操作！,返回目录,2019/4/23,生命科学学院,目的要求,掌握神经干动作电位、肌肉动作电位、肌张力同步记录方法； 理解动作电位的产生、传导、传递及兴奋收缩偶联的过程； 理解强直收缩时动作电位的形态。,2019/4/23,生命科学学院,基本原理,神经、肌肉兴奋的不应期较短，可以发生较高频率的兴奋，使骨骼肌的收缩发生叠加。 阈强度与顶强度的概念。,2019/4/23,生命科学学院,仪器材料,蟾蜍。 蛙板、蛙类手术器械、RM6240生理信号采集系统、张力换能器、任氏液、长滴
