组织学绪论(1)

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1、组胚教研室 高福莲教授 电话:0373-3029126 E-mail:,组织学与胚胎学 Histology and Embryology,开设方式,理论课54学时,周24学时。 实验课18学时,第45教学周开始。 请关注教学进度,第16教学周结束。,Introduction of Histology,组织学与胚胎学,组织学绪论,内容简介,课本 组织学的内容和意义 组织学发展简史和当代组织学 组织学的学习方法 组织学技术简介,本节 组织学的内容 组织学的意义 组织学技术简介 组织学的学习 方法,组织学的内容,组织学技术简介,一、组织学的内容,组织学(histology)是研究机体微细结构及其相关

2、功能的科学。,借助显微镜,显微解剖学,结构,功能,二、组织学意义,结构是功能的基础,组织学的发展促进生理学的进步,为生理学的学习打下良好基础。 疾病的判断必须以正常为参照,良好的组织学知识为病理学的学习打下基础。,三、组织学技术简介,光镜技术 电镜技术 组织化学术 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术 放射性自显影术 图像分析术 体视学 组织培养术和组织工程,(一)离体标本制备 1.光电镜技术,离体标本缺陷 变腐 柔软 大块 无色,涂 铺 磨 切,染色,冷冻蚀刻复型,冷冻断裂,适应观察对策,2.组织化学术(histochemistry) 显示化学成分,(1)一般组织化学 在组织切片上加某

3、种试剂,和组织中的待检物发生化学反应,借助观察最终产物,对待检物定位的方法。 有色沉淀 光镜观察 最终产物 重金属盐 电镜观察,(2)免疫组织化学(immunohistochemistry) 利用抗原和抗体结合的原理,用标记的 抗体检测组织中肽和蛋白质的技术。,抗体的标记物 荧光素 辣根过氧化物酶 胶体金,光镜或电镜,荧光显微镜,电镜,免疫组织化学(荧光素标记),免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记),免疫组织化学电镜像,(A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记),(3)原位杂交术(in situ hybridization) 用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,与细胞内待检的核酸按碱基配对的原

4、则进行特异性结合,即杂交,然后通过对标记物的显示和检测,而获知待测核酸的有无及相对量的方法。 碱基的标记物 放射性核素 放射自显影 (涂感光乳胶、暗处曝光 、显影、定影) 地高辛 免疫组织化学术,银粒所在,原位杂交,3.组织定量技术,显微分光光度术 通过测定组织化学术中最终显示物的强度,获得定量信息的技术。 图像分析术(image analysis) 又称形态计量术,是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析,从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量、体积和表面积等参数的技术。 体视学(stereology) 从组织平面图像,研究三维立体结构的学科。,图像分析仪,计算机三维重建

5、,(二)活体组织的研究,1.放射自显影术(autoradiography) 利用放射性核素的可观察和显示性,研究放射性物质在组织或细胞内消长分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程的方法。 将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内,有规律地间断取材、制片,放射性自显影,光镜或电镜观察。,放射自显影像(3H-TdR掺入),2.细胞培养术(cell culture) 把机体细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。不仅可用于研究其代谢、增殖、分化、形态和功能变化,还可研究各种理化因子对活细胞的直接影响。 组织培养术、器官培养术 in vitro 原代培养 传代培养 细胞系(

6、cell line) 细胞株(cell strain),培养细胞的倒置显微镜图像,培养细胞的倒置相差显微镜图像,3.组织工程(tissue engineering) 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。,实验中的组织工程耳,四、组织学的学习方法,基本知识相互联系、相互对比、分析记忆 用已有的知识去理解记忆新知识 结构和功能的联系 结构的直观化充分发挥观察能力 借助插图、照片和图谱等,理解记忆结构 立体和切面的关系,立体与切面的关系,典型结构:能反映立体结构特征的切面。,教学参考资料,图谱 彩色、 黑白、电镜结构 教科书 1-5版本、专科教材等 专著 组织学1-2版 练习题,授课教师

7、e-mail 教研室网址 http:/ 网上学习,实验讲授课件网上浏览方法,网址: 本科实验 组织学与胚胎学课件 所需学习课件 在线浏览或下载,理论讲授课件网上浏览方法,新医校园网主页 网上教学 登陆 用户名和密码均为您的学号 首次登陆后应修改您的密码 组织学与胚胎学 课堂讲授课件项 所需学习课件 在线浏览 范围:本人所教授的各班同学,一、研究内容 二、学习组织学的意义 三、组织学技术简介 四、组织学学习方法,小结,离体组织的制备 光电镜技术 显示化学成分的方法 组织定量技术 显微分光光度术 图像分析术 体视学 活体组织的研究 放射性自显影术 细胞培养术 组织工程,光镜技术 电镜技术 组织化

8、学术 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术 图像分析术 放射性自显影术 细胞培养术和组织工程,思考题,组织标本制备中,离体组织的缺陷和克服对策是什么? 显示组织结构和化学成分的染色方法的异同? 用什么技术可以在扫描电镜下看组织内部结构? 用什么技术可以在透射电镜下看组织内部的立体状态?,下次课程内容,上皮组织,See you later,See you later,组织学与胚胎学,组织学绪论,(一)显微镜,光学显微镜 (light microscope,LM) 电子显微镜 (electron microscope,EM),普通光学显微镜,荧光显微镜,相差显微镜,透射电镜,扫描电镜,光学显

9、微镜(light microscope) 普通显微镜 荧光显微镜 相差显微镜 电子显微镜(electron microscope) 透射电子显微镜(transmission EM) 扫描电子显微镜 (scanning EM),(一)显微镜,1mm=103m=106nm 光镜所见放大数以千计 电镜所见放大数以万计,显微镜不同,所见结构大小不一 种类 结构 分辨率 度量单位 光学 光镜结构 0.2m m (light structure) 电子 超微结构 0.2nm nm ( ultrastructure),(二)结构,分子 亚细胞 细胞 组织 器官 系统,生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂,细

10、胞器等超微结构,细胞质、细胞核等,上皮、结缔、肌组织和神经组织,肝、胃等,消化系统、呼吸系统等,光镜标本制作程序 石蜡包埋切片技术,透射电镜标本制作,显示光镜结构的常用染色法,苏木精-伊红染色 (hematoxylin-eosin staining),简称HE染色 染料 组织 名称 化学性质 色彩 化学性质 嗜好 着色部位 苏木精 碱 蓝 酸 嗜碱性 细胞核 大量核糖体 伊红 酸 红 碱 嗜酸性 大部分成分 特殊染色 如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等 活体染色 台盼蓝活体注射,电子显微镜染色用重金属盐 重金属盐 醋酸铀和柠檬酸铅,电子显微镜染色结果,黑白图象 电子密度高 电子密度低,电镜结构图,透射电镜结构图,扫描电镜结构图,冷冻断裂技术原理,冷冻断裂扫描电镜图,冷冻蚀刻复型技术原理,冷冻蚀刻复型透射电镜图,HE染色法,银染法,甲苯胺蓝染色,醛复红染色,台盼蓝活体染色,糖类PAS反应,PAS反应即过碘酸希夫反应,肝糖原,小肠粘原颗粒,脂类苏丹染色,脂肪组织,

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