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1、,多病原因子引起的 猪的一种高热病？,姜 平 南京农业大学动物医学院,病 原 因 子 流感病毒、副黏病毒 猪瘟病毒 兰耳病 伪狂犬病 链球菌病 猪传染性胸膜肺炎 猪噬血杆菌 猪圆环病毒 猪副红细胞体病,猪繁殖和呼吸综合征诊断与预防,PRRS 概 况,感染母猪流产、死胎、弱仔 断奶仔猪呼吸道症状及死亡 母猪产仔数和受胎率降低，小猪发育不良、生产性能及免疫力降低等 尚无有效对策 分布广泛,PRRS 概 况,已发现有PRRSV的国家： 美洲：美国 （1987）、加拿大（1987） 欧洲：荷兰（1991）、英国、捷克、波兰、 斯洛文尼亚、丹麦、德国、西班牙 亚洲：日本（1994）、南韩、菲律宾、 中国
2、台湾和大陆,PRRS 概 况,美国： 阳性群 个体阳性率 1987年： 临床上发现 1985年： 38 9。6 1986年： 40 208 1987年： 375 324 1988年： 639 476 1989年： 833 517 1990年： 18个州87个农场猪群阳性率达827。 目 前： 40-50%猪群感染 欧州：目前有50%以上猪群感染,一、猪繁殖和呼吸综合征诊断,临床症状 病理变化 病毒分离 病毒抗原检测 病毒抗体检测,PRRS诊断-(1)临床症状,1. 繁殖猪群： 急性发病期死亡、厌食、发热。无乳症、昏睡、皮肤变色。发病550。 持续45个月，配种后22109天流产，早产和产期延迟
3、。仔常出现一窝内有死胎、木乃尹化胎儿，组织自溶胎儿、弱仔和健康仔。母猪还可出现延迟发情、持续性不发情。 2. 仔猪呼吸道症状：仔猪断乳前后发病率和死亡率升高，仔猪精神不振，“八”字腿站姿，生后1周内死亡，呼吸困难，咳嗽、厌食，皮肤损伤变兰，结膜炎，眼窝水肿，新生猪脐带出血，淤血红肿. 3. 公猪：症状与母猪相同；性欲降低、精子数量和活力降低。 4. 其它：健康状况不佳可持续整个育成期，零星发生死亡。对育成猪的影响难以估计。 Don等（1996）报道在PRRS暴发期间和之后出生的仔猪肺部病变发生率从 30增加到 70，仔猪年生产能力降低5 20。但是大多数育成猪群可能感染PRRS而无临床症状。,
4、早产的1日仔猪,早产的一日龄仔猪,PRRS诊断-(2)病理变化,1.肺: 小叶区域变红。大面积肺炎，呈间质性肺炎，主要局限于肺泡内，肺泡间隔增厚，含大量巨噬细胞、少量淋巴细胞和2型肺细胞增生。肺泡腔充满炎性细胞和坏死细胞碎片。肺泡巨噬细胞减少（从90%减少到35%）。 2.流产胎儿：动脉炎、心肌炎和脑炎（血管周围出现巨噬细胞和淋巴细胞浸润）。 3.其它：仔猪、育肥猪眼睑水肿，仔猪皮下水肿，体表淋巴结肿大，心包积液、水肿。有的流产胎儿和死胎也出现皮下水肿和心包积液。,PRRS诊断-(3) 病毒分离,动脉炎病毒科(LDV, EAV, SHFV) 球形, 45-83nm (25-35nm) 囊膜 不
5、稳定,一、病毒特性：,PRRS病毒分类,欧洲型 PRRSV 美洲型 PRRSV Vary genomically (genotype) Partly cross-reaction serologically 突变 重组,PRRS病毒结构蛋白,GP5,RNA N,GP2,GP3,GP4,M,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5,ORF6,ORF7,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5,ORF6,ORF7,An,An,ORF1ab,ORF1ab,An,15.1kb,GP2 GP3 GP4 GP5 M N,771bp 765bp 537bp 603bp 525bp 372bp,750bp 798
6、bp 552bp 606bp 522bp 387bp,GP2 GP3 GP4 GP5 M N,An,An,An,An,An An An,mRNA 1 2 3 4 5 6 7,PRRSV VR2332 LV,ORFs and Sub-genome mRNA of PRRSV,PRRS诊断-(3) 病毒分离,二、病料 肺脏、脑、心、血清 三、细胞 Marc145、CL2621、PMA 四、鉴定方法 血清学：IFA, SN 分子生物学：RT-PCR， DIG-Prob 问题： 疫苗病毒株的干扰 病料问题 (死胎的自溶等),PRRS诊断-(3) 病毒抗原检查,免疫组化法（McAb-SDOW17,SR3
7、0-FA 免疫金、银、过氧化物酶 组织冰冻切片， PMA 原位杂交法 (DIG-Prob,福尔马林固定切片) RT-PCR RT-PCR-RFLP,PRRS诊断-(4) 病毒抗体检测,免疫过氧化物酶单层试验 （IPMA） 间接荧光抗体（IFA）试验 ELISA SN 问题：疫苗病毒抗体的干扰,二、猪繁殖和呼吸综合征免疫,细胞(for PRRSV infection) 体液免疫 细胞免疫 二次感染 持续感染 疫苗,PRRSV 在 猪 体 内 的 分 布,PRRSV infection of immune cells for PRRSV replication,_ Permissive Virus
8、 title TCID50 - 巨噬细胞 肺 macrophages subpopulation + 107 Spleen macrophsge + 106-107 Brain nicroglis + 107 Monocytes alone +/- 104 MM-CSF + 104 adherence to endothelial + 104 淋巴细胞 B-cells - 104 T-cells - 104 _,Stem cell Monblast Promoncytes Circulating单核细胞 Migrating单核细胞,骨髓 血液 巨噬细胞,Interlukine-3 Granul
9、ocyte/macrophage Colony stimulating factor Macrophage colony Stimulating factor,单 核 巨 噬 细 胞 系 统,抗 体 反 应,方法 产生时间(天) 高峰期(天) 维持时间(天) 间接免疫荧光 9-11 28-35 158 IPMA 5-9 35-42 324 ELISA 9-13 28-42 137 中和试验 9-28 70-77 356,二 次 感 染,放线菌 2型链球菌 嗜血杆菌 多杀性巴氏杆菌 伪狂犬病病毒 猪流感病毒,持 续 感 染,公猪： PRRSV-RNA demonstrated in the se
10、men of boars at 92dpi when the serum ample was negative 母猪： Sea of pigs contains PRRSV-RNA at 210 days postfarrowing PRRSV isolated： at 157dpi after infection 其它猪：SPF pigs , commingled with PRRSV- seronegative pigs that exposed to PRRSV 22 weeks previously, had clinical signs of PRRSV infection,灭 活
11、疫 苗 免 疫 效 果,_ 免疫组 非免疫组 - 母猪数 14 11 仔猪总数 137 112 每胎平均仔猪数 9.7 10.18 每胎平均健康仔猪数 7.6 0.9 每胎平均弱仔猪数 1 2.7 每胎平均木乃伊数 1.1 6.5 _ _,活 疫 苗,RespPRRS /Repro Vaccine Prime Pac Vaccine 不能用于PRRS阴性猪场 不能用于繁殖母猪 不能用于种公猪,Warning,PRRS 的 控 制,1. 疫苗接种： 猪体尽早用PRRS疫苗免疫，并在接触病毒前获得免疫力，则效果很好。猪群免疫失败的主要原因是其没有足够时间产生免疫力。 2. 加强仔猪管理: 这是控制
12、PRRS的关键之一。 4560天隔离期、2130天气候适应期；处理粪便，防止仔猪接触PRRSV和其它病原体；繁育猪群要保持稳定，以减少成年猪之间或成年猪与其后代间PRRSV传播；分群饲养，分群哺乳 3. 加强检疫 ，及时诊断,细小病毒形态(电镜检查),死胎及木乃伊胎,细 小 病 毒 病,木乃伊胎,在同一窝中所见不同孕期死亡的异常胎儿,子宫中的木乃伊胎儿,子宫中的死亡胎儿和木乃伊胎儿,受刺激后神经反射过敏，呈抽搐状,上：神经症状，转圈；下：后躯麻痹，耳朵一个向前一个向后，呈神经调节失衡症状,病猪横卧于地，作“划船”动作,病猪的神经症状，四肢呈划水状,猪 伪 狂 犬 病,神经紧张，眼发直,病猪的神经症状，四肢呈划水状,发病猪在临床上呈现精神萎靡，背毛粗糙，生长不良及消瘦，严重者有明显呼吸症状,感染猪有时会呈现神经症状：全身抽搐或如游泳状划水情形,腿
