南中医-组培学-绪论1

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1、2019/4/20,组织学 绪论,1,组织学与胚胎学,南京中医药大学基础医学院解剖组胚教研室,2019/4/20,组织学 绪论,2,组 织 学,组织学与胚胎学,组织学,胚胎学,2019/4/20,组织学 绪论,3,第一章:绪 论,2019/4/20,组织学 绪论,4,组织学(histology): 利用显微镜研究正常机体的微细结构及其相关功能的科学。 分为:描述组织学、比较组织学、实验组织学、分子生物学。,2019/4/20,组织学 绪论,5,一、组织学的研究内容,人体的组织是由细胞和细胞间质发育分化形成的,而器官系统则又是由几种不同组织发育分化而成。 因此组织学的研究内容包括:细胞、组织和器

2、官系统三部分,2019/4/20,组织学 绪论,6,1.细胞(cell) 定义: 是人体形态结构的基本单位,是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。 结构特点: 形态各异、大小不等 功能特点: 相互调节、相互协同,以维持整体的生命活动。,2019/4/20,组织学 绪论,7,2、组织(tissue) 组成:由一些形态相似、功能相近的细胞和细胞间质所组成。 形成:在胚胎发育时期形成。 分类: 由于细胞的特性不同,组织也相应分为上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。,2019/4/20,组织学 绪论,8,3、器官和系统(organ and system) 器官:是在胚胎发育的早期由几

3、种不同的组织发育、分化和互相结合所形成。 系统:功能相关的器官组成 组织特征: 成体各器官、系统分别具有其细微结构的组织特征,执行着特定的功能。,2019/4/20,组织学 绪论,9,研究内容:,细胞 细胞间质,组织,上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织,器官 系统,人体,2019/4/20,组织学 绪论,10,基本组织,上皮组织,结缔组织,肌组织,神经组织,2019/4/20,组织学 绪论,11,二、组织学研究方法 组织学研究主要涉及两个方面:显微镜和标本 光学显微镜(light microscopy, LM):又称光镜,常用于学习和研究组织学与胚胎学,其分辨率为0.2m,放大倍数约为10

4、00倍。 电子显微镜(electron microscopy,EM):又称为电镜,多用于组织学与胚胎学的研究,其分辨率为0.1nm,比光镜高1000倍,可放大几万倍到几十万倍。因此电子显微镜能观察到细胞的更微细结构。,2019/4/20,组织学 绪论,12,应用一般光学显微镜 观察组织切片,石蜡切片的制做过程,载玻片,盖玻片,组织,1、一般光学显微镜 (light microscope, LM)技术,长度单位:0.2m,2019/4/20,组织学 绪论,13,2019/4/20,组织学 绪论,14,石蜡切片朮 取材、固定: 为了尽可能地使所获得的材料的形态结构接近其活体状态,故取材时要迅速。而

5、且所获得的材料应及时用固定液(fixative)固定(fixation)。 常用的固定液为甲醛、乙醇等。这些固定液可以使蛋白质迅速凝固,防止其分解和变性。,2019/4/20,组织学 绪论,15,脱水、包埋: 为了使组织与包埋剂相融合,所获得材料需经乙醇或丙酮脱水;为了便于将材料切成薄片,需将其包埋在石蜡或火棉胶内。 切片、染色:用切片机将其切成厚约510m的薄片。,2019/4/20,组织学 绪论,16,苏木精(Hematoxylin)伊红(Eosin)染色,碱性染料,将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝色,酸性染料,将嗜酸性物质(本身碱性)染成红色,细胞核中的DNA、RNA细胞质中的核糖体,细胞

6、质膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网)和细胞间质,HE染色:,2019/4/20,组织学 绪论,17,2019/4/20,组织学 绪论,18,2019/4/20,组织学 绪论,19,其他制片技术,涂片: 血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上 铺片:疏松结缔组织撕成薄片铺在玻片上 磨片:牙和骨等坚硬组织可磨成薄片,2019/4/20,组织学 绪论,20,血涂片,2019/4/20,组织学 绪论,21,铺片,2019/4/20,组织学 绪论,22,2、电子显微镜 (electron microscope,EM)技术,电子显微镜下才能看到的结构称超微结构。,1.透射电镜:,电子密度高:,电子

7、密度低:,2.扫描电镜:,计量单位:0.1nm(纳米),2019/4/20,组织学 绪论,23,中性粒细胞 (透射电镜),黑白反差 结构影像,影像较黑称 电子密度高,反之称 电子密度低,2019/4/20,组织学 绪论,24,2019/4/20,组织学 绪论,25,柱状细胞表面(扫描电镜),2019/4/20,组织学 绪论,26,3、 组织化学朮 定义:是通过化学反应的原理,定性、定位、定量研究组织或细胞内化学物质的组成及与功能的关系;若与电子显微镜技术相结合,则简称为电镜组织(细胞)化学。 基本操作:在组织切片和细胞样品上滴加一定的试剂,该试剂与组织内的某些成分发生化学反应,在局部形成有色沉

8、淀物,通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。,2019/4/20,组织学 绪论,27,过碘酸 Schiff反应(periodic acid Schiff reaction): 简称 PAS反应,是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。 原理:,多糖,PA,氧化,醛,Schiff 试剂,紫红色沉淀,2019/4/20,组织学 绪论,28,2019/4/20,组织学 绪论,29,4、组织或细胞培养(tissue or cell culture),定义:将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养,称细胞或组织培养(cell or tissue culture) 。,细胞在体

9、外生存,必需具备适宜的条件,其包括营养、O2和CO2的比例、渗透压、pH值、温度和湿度。,2019/4/20,组织学 绪论,30,2019/4/20,组织学 绪论,31,三、组织学在医学中的地位及学习方法 (一)地位 (二)方法 1. 突出组织学内容 建立平面和立体的概念 3. 形态和功能的统一,2019/4/20,组织学 绪论,32,复习与思考,1、细胞、组织、器官之间的关系 2、光镜、电镜分辨率 3、石蜡切片术包括哪几步? 4、HE染色原理 5、涂片、铺片、磨片针对对象。,2019/4/20,组织学 绪论,33,细胞质:细胞器 1、线粒体:供能 2、核糖体:合成蛋白 3、内质网:粗面合成和

10、运输蛋白 滑面合成脂质、解毒等 4、高尔基复合体:加工、浓缩、修饰 5、溶酶体:消化、水解 6、细胞骨架:微丝、微管、神经丝,2019/4/20,组织学 绪论,34,显微镜: 组织学的诞生离不开显微镜的发明,显微镜 放大倍数 分辨率 结构名称 光源 光镜 1000倍 0.2微米 光镜结构 普通光 电镜 几十万 0.1纳米 超微结构 电子束,2019/4/20,组织学 绪论,35,骨磨片,2019/4/20,组织学 绪论,36,是利用抗原与抗体结合的原理,定性、定位、定量检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的方法。,该方法是先将蛋白质或多肽作为抗原,注入到某种动物体内,使其体内产生与所注入抗原相应

11、的抗体。而后自其血清中提取该抗体,并以荧光染料或铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记。用标记了的抗体来处理组织切片。标记抗体与切片上相应抗原特异性结合。因此切片中有标记物呈现的部位,从而显示该物质在组织中的分布。,这种方法特异性强、敏感度高、发展十分迅速,应用也十分广泛,成为当前生物学和医学众多学科的重要研究方法。,4、免疫组织化学(immunohistochemistry method),2019/4/20,组织学 绪论,37,问题 解决方法 观察对象太小 放大 显微镜 观察对象无色,无反差 染色(HE染色) 观察对象生化成分不同 细胞化学、免疫组织化学 观察对象是活体 组织细胞培养,二、组织学的研究方法,

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