血液一般检验课件

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1、第二章 血液一般检验,台州学院医学院检验系,血液一般检验是指血液检验项目中最基础及最常用的检验，主要包括：手工或仪器血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态学检查、止血凝血筛检试验、血型及交叉配血等。 由于血液一般检验标本采集容易、检测便捷，目前仍然是筛检疾病的首要项目。,第一节 红细胞检查,红细胞是血液中数量最多的有形成分，其主要功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊断或鉴别诊断。,一、红细胞计数,常作为诊断贫血及红细胞增多的主要指标。 【检测原理】 1、显微镜法 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数（200倍），充入改良牛鲍血细胞计数板中，

2、在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量。 2、血液分析仪法 电阻抗法、流式细胞法,【方法学评价】,常用,好,【质量保证】 误差来源： 技术误差、仪器误差、分布误差,【参考区间】 成年：男性（4.05.5）1012L 女性（3.55.0）1012L 新生儿：（6.07.0）1012L 医学决定水平：高于6.81012/L，应采取相应治疗措施；低于3.51012/L可诊断贫血；低于1.51012/L应考虑输血。,【临床意义】 1、生理性变化 增多：新生儿、高原居民、剧烈运动等； 成年男性高于女性； 静脉压迫时间2min； 毛细血管血高于静脉血测定； 早7时最高。 减

3、少：生理性贫血，如：造血原料相对不足、 造血功能减退、血容量增加等,2、病理性变化 增多： 1）相对增多：血容量减少 如：呕吐、高热、腹泻等 2）绝对增多： 继发性：组织缺氧，EPO代偿性增高 如：严重慢性心肺疾病 EPO非代偿性增高 如：肝、肾的癌症 原发性：如真性红细胞增多症,减少：见于各种贫血，主要分为3类 1）RBC生成减少 骨髓功能衰竭，如再障； 造血物质缺乏或利用障碍，如肾性贫血、缺铁性贫血、铁幼粒细胞性贫血、巨幼细胞性贫血,2）RBC破坏过多 RBC内在缺陷： 膜缺陷，如遗传性异常RBC增多症 酶缺陷，如遗传性G-6-PD缺乏症（蚕豆病） 血红蛋白异常，如珠蛋白生成障碍性贫血 红

4、细胞外在异常： 免疫反应引起的贫血，如新生儿溶血、血型不合输血后溶血等 机械性损伤，如行军性血红蛋白尿 疾病所致溶血，如疟疾、细菌等所致溶血性贫血,3）红细胞丢失：急、慢性失血性贫血 此外，某些药物也可引发贫血。,二、血红蛋白测定,缩写：Hb或HGB 功能：输送氧、二氧化碳 理化性质：含铁，0.347g Fe100g Hb 相对分子量64 458 每克Hb可携带1.34ml氧,由四条珠蛋白肽链（2条链，2条链）和四分子亚铁血红素组成的具有四级空间结构的四聚体，可结合4分子的氧。 还原血红蛋白（Fe2+）-99% 高铁血红蛋白（Hi）-1% 氧合血红蛋白（HbO2） 碳氧血红蛋白（HbCO，CO

5、Hb） 硫化血红蛋白（SHb）,【检测原理】 HiCN法：氰化高铁血红蛋白法 在溶血标本中，Hb中的Fe2+被高铁氰化钾氧化为Fe3+，Hb转化为Hi。Hi与KCN中的氰离子反应生成HiCN，在540nm处的吸光度与溶液中的浓度呈正比，根据测得吸光度可求得Hb的浓度。 WHO和ICSH推荐的参考方法。,【方法学评价】,【质量保证】 1、标本 2、器材及试剂 3、技术操作 4、废弃物 【参考区间】 成年：男性120160 g/L 女性110150 g/L 新生儿：170200 g/L,【临床意义】 基本等同于RBC，在判断贫血程度方面优于RBC。 轻度贫血：Hb120g/L（女性Hb110g/L

6、）； 中度贫血：Hb90g/L； 重度贫血：Hb60g/L； 极重度贫血：Hb30g/L。 当RBC1.51012/L，Hb45g/L时，应考虑输血。 注意： 1、某些贫血RBC和Hb减少程度不一致，应同时测定 2、影响检验结果的因素,三、红细胞形态检查,【检测原理及方法学评价】,【质量保证】,【临床意义】 1、正常红细胞形态 双凹圆盘形，大小相对均一，平均直径7.2m（6.77.7m ），瑞氏染色呈粉红色或琥珀色，血红蛋白充盈良好，呈正常色素性，向心性淡染，中央为生理性淡染区，约为细胞直径的1/3，胞质内无异常结构。,注意： 正常RBC可自然退化变性，即使高质量的正常人血涂片，也可见到变形或

7、破碎的红细胞，但数量很少，分布局限。,2、异常红细胞形态 在排除人为因素后，若血涂片中出现异常形态红细胞且数量较多，往往提示病理性改变。 常见的异常形态可分为红细胞大小、形态、血红蛋白含量、结构和排列异常。,小 红 细 胞,淡染区消失的小红细胞（球形红细胞）,红细胞大小不均,巨红细胞,球形红细胞,Hb按结构分类： 血红蛋白A(HbA)，22，占成人Hb的98； 血红蛋白A2(HbA2)，22，占成人Hb的2； 血红蛋白F(HbF)，22，仅存在于胎儿血中； 血红蛋白H(HbH)，4，血红蛋白H病； 血红蛋白C(HbC)，链中Glu被Lys取代； 血红蛋白S(HbS)，链中Glu被Val取代，镰

8、形红细胞血红蛋白。,假性椭圆形红细胞,椭圆形红细胞,靶形红细胞,口形红细胞,镰形红细胞,棘红细胞,锯齿状红细胞,泪滴形红细胞,红细胞形态不整,正常、低、高色素性红细胞,嗜多色性红细胞,豪-焦小体（Howell-Jolly Body） 染色质小体,卡波环 （Cabot ring）,嗜碱性点彩红细胞,有核红细胞,缗钱状红细胞,四、血细胞比容测定,血细胞比容： （Hct、HCT；旧称红细胞压积，PCV） 是指一定体积的全血中红细胞所占体积的相对比例。 影响HCT的因素： 红细胞数量、平均体积、血浆量。,HCT的用途： 贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断；血液稀释和血液浓缩变化的测定、红细胞平均

9、体积和红细胞平均血红蛋白浓度的计算等。,【检测原理】 直接测定：离心法 微量法、温氏法 间接测定：血液分析仪法 HCT=RBC红细胞平均体积,【方法学评价】 微量法： WHO推荐的常规方法 CLSI推荐的参考方法 血液分析仪法： 目前的常用方法,【质量保证】 1、操作规范化 2、注意干扰因素 【参考区间】 男性：0.400.50 女性：0.370.48,【临床意义】 与红细胞计数相似，HCT降低是贫血诊断的指标。表2-19。 主要应用价值： 1、临床补液量的参考 2、真性红细胞增多症诊断指标 3、红细胞平均指数计算的基础数据,五、红细胞平均指数,包括： 红细胞平均体积（MCV） 红细胞平均血红

10、蛋白量（MCH） 平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC） 应用： 红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征，为贫血的鉴别诊断提供线索。,【检测原理】 1、手工法： 根据RBC、Hb、Hct测定结果计算而来。,2、血液分析仪法： MCV：仪器直接测定 MCH：Hb/RBC MCHC：Hb/（RBCMCV）,【方法学评价】 手工法红细胞平均指数由RBC、HGB、HCT测定后计算而来，因此，必须采用同一抗凝血标本，且所检测的结果必须准确。仪器法红细胞平均指数的测定同样依赖于RBC、HGB和MCV测定的准确性。 【参考区间】 注意成年人,【临床意义】 有助于贫血形态学分类及提示贫血的可能原因。,六、网织红细

11、胞计数, 网织红细胞（Ret，RET）： 介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，略大于成熟红细胞，胞质中残存有嗜碱性物质RNA，经碱性染料活体染色后，呈现蓝色或紫色的点粒状或丝网状结构，故名网织红细胞。 网织红细胞自骨髓释放到外周血后仍具有合成血红蛋白的能力，约1-2天后，过渡为成熟红细胞（新鲜标本检测）。,网织红细胞检测的目的： 鉴别贫血的类型（增生性、非增生性、增生增高性）。 检查骨髓的功能。 检测贫血的治疗效果。 评估骨髓移植后、再生障碍性贫血细胞毒药物诱导治疗后或EPO治疗后的红细胞造血情况。,【检测原理】 1、普通显微镜法： 活体染料（新亚甲蓝或煌焦油蓝）的碱性着色基团（+）

12、可与Ret中RNA的磷酸基（-）结合，形成蓝色的点状、线状或网状结构。 2、仪器法： 流式细胞仪、Ret计数仪、血液分析仪等,【方法学评价】,【质量保证】 以手工计数法为重点。 1、染料选择 2、正确辨认Ret：具2个及以上网织颗粒,且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞。 3、Ret计数方法：Miller窥盘计数法 显微成像系统：HFR，MFR，LFR,？,【参考区间】 Ret%：成人和儿童：0.5%1.5% 新生儿：2.0%6.0% Ret绝对值： 成人：（2484）109/L,【临床意义】 反映骨髓造血功能的重要指标。 1、评价骨髓增生能力，判断贫血类型 1）Ret增多：造血功能旺盛，见于各种增

13、生性贫血，溶贫尤为显著 2）Ret减少：无效红细胞造血的指征，见于非增生性贫血、慢性病性贫血（再障）。 3）贫血鉴别：,2、评价疗效 1）观察贫血疗效：随访项目之一 2）骨髓移植后的监测： 3、放、化疗的监测 可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。 4、药物影响,七、嗜碱性点彩红细胞计数,【检测原理】 【参考区间】0.03% 【临床意义】 升高主要见于重金属（铅、汞等）、硝基苯、苯胺中毒； 溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤也可见升高,八、红细胞沉降率测定,红细胞沉降率（ESR）简称血沉： 指在规定条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。,【检测原理】 1、魏氏（

14、Westergren）法： 2、自动血沉仪法： 【方法学评价】 魏氏法：传统方法，国内的规范方法 自动血沉仪法：快 【参考区间】男性0-15mm/h 女性0-20mm/h,【临床意义】 常规的筛查试验，缺乏特异性，主要用于观察病情的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤等。 1、生理性：新生儿较慢；女性高于男性；经期、妊娠增快；50岁后增快。 2、病理性增快：组织损伤如严重创伤、术后、心梗；恶性肿瘤；炎症疾病如风湿病、结核病的活动期；自身免疫病如SLE、类风关；高球蛋白血症如MM、巨球蛋白血症、肝硬化等；高胆固醇血症如动脉粥样硬化、DM等。 3、病理性减慢：真性红细胞增多症、RB

15、C形态异常等,第二节 白细胞检查,白 细 胞 分 类,白细胞 （LEU）,粒细胞(GRAN),淋巴细胞(L),单核细胞(M),中性分叶核粒细胞(Nsg),中性杆状核粒细胞(Nst),嗜酸性粒细胞(E),嗜碱性粒细胞(B),N,粒细胞增殖动力学各阶段,分裂池,成熟池、 贮存池,循环池 （50%）,边缘池 （50%）,组织 固有池,1/20,什么情况下要进行白细胞检查？,一、白细胞计数,定义： 指测定单位容积的外周血中各种白细胞的总数。 【检测原理】 显微镜计数法 血液分析仪法,【方法学评价】 表2-35。 【质量保证】 注意标本要求及质量保证 【参考区间】 成 人：（410）109/L 儿 童：

16、（512）109/L,【临床意义】 WBC高于10109/L称为白细胞增多； WBC低于4109/L称为白细胞减少； 低于2.5109/L肯定异常。,二、白细胞分类计数,白细胞分类计数（DLC）： 在显微镜下观察染色后的血涂片上白细胞的形态，并进行分类计数，求得各种白细胞的比值（百分率）和绝对值。,DLC的目的： 1、观察白细胞增多症、减少症，感染、中毒、恶性肿瘤、白血病和其他血液系统疾病的白细胞变化情况。 2、同时评估红细胞和血小板形态。,【检测原理】 显微镜分类计数法和血液分析仪法。 显微镜分类计数法：制备血涂片，经Wright染色后，在油镜下根据白细胞形态特点逐个分类计数（100-200个），同时观察其形态的变化，然后求得各种白细胞的比值（百分率）。再根据WBC计数结果计算各种白细胞的绝对值。 绝对值WBC数该白细胞的百分率,【方法学评价】,【质量保证】 【参考