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1、第九章 微生物的控制与菌种的保藏,9.1 消毒与灭菌 9.2 菌种保藏,9.1 消毒与灭菌,9.1.1 基本概念 9.1.2 常用的消毒方法 9.1.3 常用的灭菌方法,课后习题,1、何谓灭菌、消毒、防腐？ 2、常用的灭菌、消毒方法有哪些？各种方法的原理、适用范围是什么？,9.1.1 基本概念,1、灭菌：采用强烈的理化因素杀死或清除任何物体内外所有微生物的方法，其结果是无菌。实践中灭菌可以分为杀菌和溶菌。前者使菌体死亡，但形体尚存；后者使细菌裂解而消失。,高压蒸汽灭菌锅,紫外线灭菌,2、消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部部分微生物(有害微生物)，而对被消毒的对象基本无害的措施。
2、生活中消毒通常指杀死病原微生物； 工业上则指消除杂菌，除去引起感染的微生物。,3、防腐：能够防止或抑制微生物的生长，但不能杀死微生物群体的方法。 防腐剂：那些可以抑制微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学试剂。,低温,干燥（晒干）,干燥（烤干、烘干）,除氧,高渗（糖）,高渗（盐）,桐油,油漆,防腐剂,方便面、饼干、火腿肠、榨菜、咸菜、膨化食品、各种罐头、腌渍食品等都各类含有防腐剂！ 倡导绿色消费！ 关注新型的天然防腐剂！如葡萄糖氧化酶、鱼精蛋白、溶菌酶、乳酸菌、果胶分解物等。,9.1.2 常用的消毒方法,1、煮沸消毒法 2、巴斯德消毒法 3、利用消毒剂处理,1、煮沸消毒法 物品在水中煮沸
3、15min，可杀死绝大多数微生物所有的营养细胞和一部分芽孢。 一般用于饮用水的消毒。,2、巴斯德消毒法 主要针对不宜长时间高温灭菌的液体食品，能杀死无芽孢的病原菌，又能保持食品的风味。 方法：待消毒的液体食品置于6085下处理15s30min，然后迅速冷却。,3、利用消毒剂处理,化学消毒剂：凡是可以抑制或杀灭微生物的化学药品。用量少时称为防腐剂。,（1）酸碱类 酸类 作用机制：破坏微生物的细胞膜和蛋白质。 代表： 无机酸如硫酸、盐酸等杀菌力虽强，但腐蚀性大，实际上不宜作消毒剂。一般以醋酸用于房间熏蒸消毒。 某些有机酸如苯甲酸可用作防腐剂。,碱类 作用机制：强碱能水解蛋白质和核酸。 代表：石灰水
4、、氢氧化钠、碳酸钠等。 强碱由于其毒性大，其用途局限于对排泄物及仓库、棚舍等环境的消毒。,（2）重金属盐类 作用机制：重金属离子使蛋白质变性或沉淀。 代表：作用最强的是Hg、Ag、Cu等。,汞溴红（红汞）：2红汞水溶液即红药水，常消毒皮肤、黏膜及小创伤，不可与碘酒共用。,硫酸铜：对真菌和藻类有强杀伤力。 波尔多液：由约500克的硫酸铜、500克的生石灰和50千克的水配制成的天蓝色胶状悬浊液。广泛用于防治蔬菜、果树、棉、麻等的多种病害。,（3）氧化剂 作用机制：能放出游离氧或使其他化合物放出氧，通过氧化菌体蛋白的活性基因使其失活。 代表 高锰酸钾：0.1%的该溶液用于皮肤、水果、饮具的消毒。 0
5、.01%0.02%的溶液用于食物或药物中毒时洗胃。 过氧化氢（双氧水）：常用3%的溶液进行伤口消毒。其缺点是化学性质极不稳定，容易分解失效。,漂白粉,84消毒液,（4）有机化合物 醇类 作用机制：醇类是脱水剂、蛋白质变性剂，也是脂溶剂，可使蛋白质脱水、变性，损害细胞而具杀菌能力。 代表：70%75的乙醇杀菌效果最好，常用于皮肤及器械的消毒。,醛类 作用机制：主要是使蛋白质烷基化，改变酶或蛋白质的活性，使微生物的生长受到抑制或死亡。 代表：甲醛，因有刺激性和腐蚀性，不宜在人体使用，常以2甲醛溶液浸泡器械，10甲醛溶液进行熏蒸以消毒厂房、无菌室或者传染病患者的家具、房屋等。 福尔马林：3740甲醛
6、溶液，常用于制作生物标本。其稀溶液(0.10.5)农业上可用来浸种，给种子消毒。,福尔马林浸泡的动物标本,福尔马林浸泡的种子,表面活性剂 作用机制：降低表面张力，改变细胞的透性和稳定性，使细胞内物质逸出，菌体死亡。 代表： 肥皂 一种阴离子表面活性剂，但一般认为肥皂的作用主要是机械地移去微生物，微生物附着于肥皂泡沫中被水冲洗掉。 新洁尔灭 0.050.1新洁尔灭溶液用于皮肤、黏膜和器械消毒。,1、高温灭菌 2、过滤除菌 3、辐射灭菌,9.1.3 常用的灭菌方法,1、高温灭菌 作用机制：高温使菌体蛋白质、核酸、酶等细胞重要物质发生凝固或变性失活，从而导致微生物死亡。 代表：高压蒸汽灭菌,火焰灼烧
7、法 干热灭菌法 烘箱内热空气灭菌法 高温灭菌 分开灭菌法 常压下 湿热灭菌法 间歇灭菌法 低压下 低压灭菌法 加压下 高压蒸汽灭菌法,湿热灭菌效果比干热灭菌效果好,（1)干热灭菌法 火焰灼烧法 此法灭菌彻底，迅速简便，但使用范围有限。常用于接种工具、污染物品以及实验动物尸体等废弃物的处理。,火焰灼烧法,烘烤灭菌法 主要在干燥箱中利用热空气进行灭菌。通常160处理12h便可达到灭菌的目的。此法只适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。其优点是可保持物品干燥。,烘箱,（2）湿热灭菌法,高压蒸汽灭菌 是湿热灭菌中最好的方法，通常在0.1MPa的压力下,此时温度是121,处理1530min。,要排冷
8、空气，否则会形成假压，虽然压力达到要求，温度却达不到相应高度，而影响灭菌效果。,食用菌高压蒸汽灭菌,间歇灭菌法,是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。 主要用于不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物等。 方法是将待灭菌物品置于蒸锅内加热到沸腾维持1530min杀死营养细胞，取出冷却后在37恒温培养24小时，使芽孢萌发，再用此法灭菌，反复三次，即可达到灭菌目的。,分开灭菌 培养基中糖类等不耐高温的成分； 培养基中含有Ca2+，Fe3+成分与磷酸盐等成分,以免形成沉淀。 低压灭菌 葡萄糖经过112灭菌15min，只会破坏0.6%。 降低灭菌温度或缩短灭菌时间。,2、过滤除菌 作用机制：通过过滤器滤除空气或不耐热液体中微生物的方法。 代表：膜滤器、超净工作台,膜滤器,超净工作台,3、辐射 作用机制：能量以电磁波传递的物理现象称为辐射。以电磁辐射产生的电磁波杀死微生物的方法为辐射杀菌。 代表：紫外线、电离辐射、强可见光。,紫外线灯管,
