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1、红细胞检查,红细胞（red blood cell, RBC; erythrocyte）,血液中数量最多的有形成分 主要成分：血红蛋白 主要功能：呼吸载体 直径：6.7 9.5 um，平均7.2 um 形状：双凹圆盘状,RBC,红细胞的生成,Stem cell Epo 原始红细胞 早幼红细胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 网织红细胞 成熟红细胞 释放入血,72h,48h,平均寿命120 d,红细胞计数 （red blood cell count，RBC）,定义：单位体积（每升）血液内的红细胞数量 原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池，于显微镜下计数一定体积范围的红细胞数，并换算得每升血液中
2、红细胞数(/L),红细胞稀释液,稀释液：保护计数细胞，破坏非计数细胞，同时抗 凝，要求不含杂质 红细胞稀释液：Hayem液，由氯化钠、结晶硫酸钠、 氯化高汞组成 作用： 氯化钠调节渗透压，结晶硫酸钠防止细胞 粘连，氯化高汞防腐,计数方法,手工法 ：取样 稀释 计数 计算 仪器法 ：电阻抗分析或激光分析,手工法,10 uL末梢血+2 ml稀释液 混匀稀释 充池 计数 计算,成年男性（4.0 - 5.5）1012/L 成年女性（3.5 - 5.0）1012/L 初生儿 （6.0 - 7.0）1012/L,外周血红细胞参考值,思 考,手工法VS仪器法？,血红蛋白测定,（ hemoglobin，Hb）
3、,血红蛋白的组成,珠蛋白（globin）（4条肽链）,亚铁血红素（heme）（1个）,血红蛋白,珠蛋白具有种属特异性，含有两条链和两条非链 正常成人的Hb包括： HbA 22 （90%以上） HbA2 22 （2 3%） HbF 22 （2%以下；新生儿占70%）,受激素调节 红细胞生成素：直接 雄激素：直接和间接 自身调节 血红素过多 氧化为高铁血红素,负反馈,血红蛋白的合成,血红蛋白的代谢,珠蛋白 氨基酸 血红素 胆色素（胆绿素、胆红素、 胆素原及胆素）,血红蛋白,还原血红蛋白（reduced hemoglobin，Hbred） 氧合血红蛋白（oxyhemoglobin，HbO2） 高铁血
4、红蛋白（hemiglobin，Hi） 碳氧血红蛋白（HbCO） 硫化血红蛋白（SHb）,血红蛋白的种类,血红蛋白的测定,定义 指单位体积血液中所含血红蛋白的量 参考值 成年男性： 120-160g/L 成年女性： 110-150g/L 初生儿： 170-200g/L,Hb测定方法,分光光度计比色 氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）（国际标准参考方法） 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）（次选方法） 叠氮高铁血红蛋白测定法（HiN3） 碱羟血红蛋白测定法（AHD575） 目视比色 沙利法、测铁法、测氧法、比重法、折射仪法、光谱分析法 仪器法,氰化高铁血红蛋白测定法（HiCN）,为国际标
5、准参考方法 步骤： 取样 加转化液（溶血、转化） 比色,原理： 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白，通过比色根据吸光度测得血红蛋白的浓度。,方法：,计算：有三种方法求得Hb浓度 1. A367.7 2. 得A值后，在标准曲线上直接查找 3. AK KHb / A,转化液 5ml + 血 20ul(5min)，比色读吸光度（A）(540nm),标准曲线的绘制,用一组已知浓度的HiCN参考液，在分光光度计上分别测定A值，以A为纵座标，血红蛋白参考值为横座标，绘制标准曲线。 例如：HiCN参考品 Hb
6、g/L： 50 100 150 200 A ： 0.14 0.27 0.41 0.54 如果标本A为0.32，则标本Hb = 0.32370.37 = 118.52（g/L）,KHb / A = 370.37,优点 操作简单 呈色快且稳定 除SHb外均可检测 根据吸光度直接定值,方法学评价,缺点 KCN有剧毒 HbCO转化较慢 高WBC和高球蛋白血症可致溶液浑浊,红细胞计数与血红蛋白测定的临床意义,生理变化,年龄与性别 新生儿：RBC高，两周后 下降，6-7岁最低 男性：25-30岁高峰 女性：13岁-15岁达高值， 21岁-35岁低水平，以后 渐渐增高,精神因素 肾上腺素 RBC 剧烈体力劳
7、动或运动 相对缺氧 Epo RBC 气压降低 缺氧 代偿性RBC 妊娠中后期 血液稀释 RBC 老年人 造血功能减退 RBC,病理变化,红细胞和血红蛋白增多 相对增多：血浆中水分丢失，血液浓缩所致，如呕吐、 腹泻 绝对增多： 原发性 真性红细胞增多 继发性 低氧血症 Epo （如心血管病、肺 疾病、异常血红蛋白病） 肾上腺皮质功能亢进,红细胞生成素代偿性增加,生理性： 新生儿 高原居民 病理性：严重慢性心、肺疾患、异常血红蛋白病 红细胞生成素非代偿性增加：某些肿瘤或肾脏疾患,红细胞和血红蛋白量减少,主要见于贫血：由于各种原因引起的全身血循环中红细胞总数、血红蛋白和红细胞比积减少，低于该地区、该
8、年龄及性别组的参考范围低限时称贫血。,贫血病因,生成减少 破坏过多 失血过多,1）骨髓造血功能减退 药物、物理因素、慢性肾衰、再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移 2）造血原料不足 缺铁（缺铁性贫血）、缺乏VitB12或叶酸（巨幼细胞性贫血） 3）红细胞破坏增加 溶血性贫血（输血不合、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症） 4）红细胞丢失过多 各种原因的失血（如消化性溃疡、痔疮、钩虫病）,注意问题,Hb测定对贫血程度的判断优于RBC计数 在某些病理情况下，Hb和RBC的浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量，如：急性失血、水潴留、失水等 发生大细胞贫血或小细胞低色素贫血时，RBC计数与Hb浓度不成比例,红细
9、胞形态检查,红细胞形态观察,大小及均匀程度 红细胞形状 血红蛋白含量 细胞内结构,红细胞大小改变,直径 例如 小红细胞 10um 巨幼细胞贫血 巨红细胞 15um 巨幼细胞贫血 大小不均 增生性贫血,A,C,B,A： normal B： megalocyte C： anisocytosis,红细胞形状改变,球形红细胞 遗传性或获得性 椭圆形红细胞 遗传性 靶形红细胞 珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病 口形红细胞 遗传性 镰形红细胞 异常血红蛋白S（HbS） 棘形红细胞 遗传性或获得性-脂蛋白缺乏症 新月形红细胞 阵发性睡眠性血红蛋白尿症 泪滴形红细胞 贫血、骨髓纤维化症 缗钱状形成 纤维蛋白原和
10、球蛋白增高 裂红细胞 DIC、微血管病性溶血性贫血 红细胞形态不整 巨幼细胞性贫血,spherocyte,Elliptocyte,人为假椭圆红细胞,Target cell,stomatocyte,Sickle cell,镰形红细胞,acanthocyte,meniscocyte,Tear drop cell,Rouleaux formation,schistocyte,poikilocytosis,血红蛋白含量改变,正常色素性 急性失血、再障、白血病 低色素性 缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血 高色素性 巨幼细胞性贫血 嗜多色性 溶血性或急性失血性贫血 细胞着色不一 铁粒幼红细胞性贫血,nor
11、mochromic,hypochromic,hyperchromic,polychromatic,人为面包圈红细胞,铁粒幼红细胞性贫血,细胞内的异常结构, 嗜碱性点彩红细胞：RNA， 铅中毒 染色质小体（豪焦小体）：核残余物，巨幼细胞贫血、 脾切除后 卡波环：脂蛋白变性，巨幼细胞贫血、铅中毒 寄生虫：疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫 有核红细胞： 溶血性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移 性肿瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后,Basophilic stippling cell,Howell Jollys body,Cabot ring,疟原虫（malarial parasite）,有核红细胞,红细胞
12、的各种改变,红细胞比容测定 （Hematocrit，HCT）,定义： 抗凝血在一定条件下离心沉淀，求出单位体积血液中红细胞占的体积百分比（L/L）。 与红细胞数量以及红细胞大小有关,温氏法（常量，中速离心） 微量法首选常规方法 放射性核素法参考方法 折射计法、黏度法、比重法、电阻抗法（仪器）,测定方法,参 考 值,温氏法：男性0.4 0.54 女性0.37 0.47 微量法：男性0.42 0.52 女性0.37 0.48 仪器法：男性0.40 0.52 女性0.37 0.48,离 心 法,EDTA抗凝 离心 Plasm PLT WBC RBC-red RBC-O2,诊断贫血并判断其严重程度，结
13、合有关指数变化可推断贫血病因，并对贫血进行分类； 评估血浆容量有无增减或稀释浓缩程度，有助于补液量的控制。 增高：血液浓缩、原发性或继发性红细胞增多症 降低：贫血、稀释血症（充血性心力衰竭、妊娠、 输液过多）,临床意义,红细胞平均指数,通过RBC计数、Hb测定、HCT测定可计算出红细胞平均指数,定义：每个红细胞的平均体积。以飞升（fL）为单位 计算：MCV = HCT / RBC 例如：RBC为3.501012 / L，Hct为0.36，则： MCV = 0.36 3.501012 / L = 103 fL 参考值：手工法 80 92 fL 仪器法80 100 fL,红细胞平均容积 （mean
14、 corpuscular volume, MCV）,红细胞平均血红蛋白量 （mean corpuscular hemoglobin，MCH）,定义：每个红细胞内所含平均血红蛋白的量，以皮克 （pg）为单位 计算：MCH = Hb / RBC 例如：RBC为3.501012 / L，Hb为120 g/L，则： MCH = 120 g/L 3.501012 / L = 34.20 pg 参考值：手工法 27 31 pg 仪器法 27 34 pg,红细胞平均血红蛋白浓度 (mean corpuscular hemoglobin concentration, MCHC）,定义：单位容积红细胞的平均血红
15、蛋白浓度， 以g/L为单位 计算：MCHC = Hb / Hct 例如：Hb为120 g/L，Hct为0.36，则： MCHC = 120 g/L 0.36 = 333 g/L 参考值：320 360 g/L,临床意义,MCV、MCH、MCHC可从不同侧面反映红细胞的病理变化，有利于分析病人红细胞形态特征，进行贫血分类、诊断和鉴别诊断。,贫血的红细胞形态学分类,红细胞体积分布宽度 （RBC Volume Distribution Width，RDW）,定义 红细胞体积分布宽度是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出，反映周围血红细胞体积异质性的参数，是反映红细胞大小均一程度的客观指标，常用变异系数（CV）或标准差（S）表示。,临床意义,与MCV结合进行贫血分类：这种分类法更能反映贫血的病理变化，对贫血的鉴别诊断有一定的价值。 诊断缺铁性贫血：IDA的病人95%以上RDW增高，可与-珠蛋白生成障碍
