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1、生物选修1（人教版）,专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养,要点突破,一、制备培养基,1配制原则 (1)目的明确：不同微生物需求不同，根据培养目的进行配制。 (2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。 (3)pH要适宜：为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。,栏目链接,2培养基的营养成分及功能,栏目链接,特别提醒,对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。 一些天然营养物质，如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等可为微生物提供生长因子。 不同微生物对营养的需求不同，因此，首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培
2、养基。 营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。,栏目链接,例1 下列关于微生物培养基的说法，正确的是 ( ) A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 C除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量,栏目链接,解析：对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量。CO2和N2是无机物，也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。 答案：D,栏目链接,变式训练 1不同培养基的具体配方不同，但一般都含(C) A碳源、磷酸盐和维
3、生素 B氮源和维生素 C水、碳源、氮源和无机盐 D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素,二、消毒与灭菌的比较,栏目链接,栏目链接,特别提醒,酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌能力减弱。,栏目链接,例2 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针 C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅,栏目链接,解析：高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火
4、焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种针。 答案：C,栏目链接,变式训练 2下列操作与消毒和灭菌无关的是( ) A接种前用火焰灼烧接种环 B接种前用酒精擦拭双手 C将平板倒置，放入培养箱中培养 D接种在酒精灯的火焰旁完成,解析：A、B、D都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法。将平板倒置，放入培养箱中培养与消毒、灭菌无关，是为了防止杂菌污染。 答案：C,三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌,栏目链接,2纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 (1)平板划线法中几次灼烧接种环的目的：,栏目链接,(2)稀释涂布平板法操作比较复杂，且各个细节均需保证无菌操作，应特别注意
5、： 酒精灯与培养皿的距离要适宜。 吸管头不要接触其他任何物体。 吸管要在酒精灯火焰周围使用。 涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃，注意防火。,栏目链接,特别提醒,在稀释涂布平板法操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。 每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板，作为实验重复，求平均值，若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算。 平板冷凝后，皿盖上会凝结成水珠。凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水
6、珠落入培养基造成污染。,栏目链接,例2 关于平板划线法操作的叙述正确的是( ) A使用已灭菌的接种环、培养皿，在操作过程中不需要再灭菌 B打开含菌种的试管，需通过火焰灭菌，取出菌种后，需马上塞上棉塞 C将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D最后将平板倒置，放在培养箱中,栏目链接,解析：使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程仍要灭菌；打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞；将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线后盖上皿盖；最后应将平板倒置，放入培养箱中培养。 答案：D,栏目链接,变式训练 3稀释涂布平板法是微生物培养中的
7、一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( ) A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理,栏目链接,解析：只有在稀释度足够大的菌液才能在培养基表面形成单个的菌落。 答案：C,本节小结,栏目链接,栏目链接,核心归纳 1培养基的成分一般包括水、碳源、氮源、无机盐，除此之外，还应满足微生物对pH、特殊营养物质及氧气的需求。 2获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。 3消毒和灭菌的区别是后者更彻底，是将物体表面及内部所有微生物包括芽孢、孢子全部杀死。 4微生物培养中常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，前者操作简单，后者可用于微生物计数。,
