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1、基因工程练习题1.(2018成都模拟)请回答有关如图的问题：(1)图甲中-所示的生物工程为_.(2)图甲中序号所示过程叫做_，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是_(请将模板碱基写在前).(3)从雌性动物卵巢内获取的卵母细胞需要培养到_期才能完成受精作用，此时细胞中的染色体组数是_(图甲中雌性、雄性动物均为二倍体).为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性动物体内注入_激素.(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号1代表的是_；且在图甲中过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体_(填“X”或“Y”)的精子.2.(2017奉贤区二模)回答基因工程的相
2、关问题：如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题：限制酶BamHBclSau3AHind识别序列及切割位点(1)用图1、2中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用BclI酶和_酶切割，酶切后的质粒和目的基因片段，通过_酶作用后获得重组质粒.(2)若用上述限制酶获得的目的基因长度为1.0kb(1kb=1000对碱基)，质粒长度为3.2kb，则获得重组质粒的长度为_.A.4.2kbB.4.2kbC.=4.2kb(3)重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅在10-7，为了筛选出导入了重组质粒的大肠杆菌，在导入完成后，将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青
3、霉素的培养基中培养，大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是_，可能性最大的是_.A.在含氨苄青霉素的培养基上能正常生长，在含四环素的培养基上不能正常生长B.在含四环素的培养基上能正常生长，在含氨苄青霉素的培养基上不能正常生长C.在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都能正常生长D.在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生长(4)用Sau3AI限制酶_(填能或不能)识别并切割BamHI酶的识别序列，若用Sau3AI限制酶完全切割图1质粒时，可获得_种大小不同的DNA片段.(5)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒导入至山羊的_细胞中，那么上述过程属于_
4、.A.人类基因工程B.动物基因工程C.植物基因工程D.微生物基因工程.3.(2018春和平区校级月考)在荧光素酶中加入相应的荧光素底物就可以发荧光。荧光素酶及其基因在生物研究中有着广泛的应用。请回答下列问题：(1)荧光素酶基因的获取方法有多种：可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成；也可以从_中获取；还可利用PCR技术扩增。PCR技术利用了_的原理，其中用到的两种引物是根据_合成的。(2)限制酶是切割DNA的工具酶，主要从_中分离纯化出来。下表为4种限制酶的识别序列和酶切位点，如图为含有荧光素酶基因的DNA片段及其中的限制酶切点。切取荧光素酶基因时，若选用表中的某一种限制酶，应选用_；若选
5、用两种限制酶，应选用_，该方法的优点是_。限制酶MspBamHMboSma酶切位点(3)荧光素酶基因也可以作为目的基因导入某些动植物细胞中表达，产生荧光素酶。将目的基因导入哺乳动物受精卵中常用的技术是_，之后再经过_等技术流程，可以得到转基因动物。(4)将荧光素酶基因导入双子叶植物细胞中，常用的技术是农杆菌转化法。该技术中操作人员需要将目的基因需插入到_中，进而借助农杆菌的作用能够获得导入荧光素酶基因的植物细胞，之后再经过_技术可获得转基因植株。在转基因植株中，荧光素酶基因可指导相应蛋白质的合成，参与该过程的RNA有_。4.(2018天津)甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。我国科
6、学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。(1)改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用_技术扩增，并将其中某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的_，因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。(2)构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与(1)中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸(Uaa)。将该基因与_连接后导入宿
7、主细胞。提取宿主细胞的_进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。(3)利用转基因宿主细胞制备疫苗。将(1)中的重组质粒导入(2)中的转基因宿主细胞，并在补加_的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是_(单选)。A.病毒的DNA聚合酶B.宿主的DNA聚合酶C.病毒的RNA聚合酶D.宿主的RNA聚合酶(4)上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖，没有致病性，因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比，该病毒活疫苗的优势之一是可引起_免
8、疫，增强免疫保护效果。5.(2018天津模拟)为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。请回答问题：(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因中获取转运肽基因，所含限制酶(Cla、Sac、Xba)的酶切位点如图甲所示。若用_和_酶处理酶D基因和转运肽基因后，可得到_端与_端(填图中字母)相连的重组基因。(2)将上述重组基因进一步处理，插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建_并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落，再利用液体
9、培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过_技术，可培育成转基因油菜植株。6.(2018厦门二模)羊乳中的p-乳球蛋白(BLC)是引起人体过敏反应的主要过敏原之一。人乳铁蛋白具有促进铁吸收、抗氧化等多种功能，是一种理想的食品添加剂。我国科学家利用基因编辑技术将人乳铁蛋白基因(hLF)插入山羊BLC基因的外显子中，结合核移植技术获得了乳汁中含有人乳铁蛋白的转基因山羊，部分研究如图所示。请回答：(1)与基因组文库相比，cDNA文库中获取的人乳铁蛋白基因(hLF)不含_(填结构)。可以利用特定的引物
10、对hLF进行扩增，设计引物时应注意_(写出一点即可)。(2)实验中所使用的成纤维细胞应取自_(公羊/母羊/公羊、母羊皆可)，原因是_。(3)细胞B应在体外培养至_期再进行去除细胞核的操作。细胞C在体外培养发育至_时期可移入受体母羊子宫。(4)可以采用_的方法检测转基因山羊乳汁中是否含有人乳铁蛋白和BLG.结果表明，转基因山羊乳汁中不含BLG，原因是_。7.(2018黄石模拟)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长.质粒上有Pst、Sma、Hind、Alu等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中是
11、转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，、表示相关结构或细胞.请据图作答：(1)在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割.为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶_分别对_，_进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_种.(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有_作为标记基因.(3)研究人员通常采用_法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.通常采用_技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质.(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞
12、培育成植株.图中、依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的_，_过程.8.(2018南充模拟)普通牛奶赖氨酸含量低，为了提高牛奶中赖氨酸的含量，吉林大学农学部利用现代生物工程技术培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”，预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸.如图为培育转基因克隆动物的技术流程图，请回答：(1)获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用技术扩增细胞.“织女”牛进入泌乳期后，可通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为_.(2)实施基因工程的核心操作步骤是_，实现过程的常用方法是_.(3)在目的基因的检测与鉴定过程中，检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是_.(4)获得重组细胞时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是_.9.(2018河南二模)普通棉花中含-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2)，能在纤维细胞中特异性表达，产生的-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短.为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细
