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1、外周血细胞形态检验,赣州市妇幼保健院 丁克文, 外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检;外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常;点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化;异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化;寄生虫,讲 授 内 容,外周血细胞检验程序,血涂片的制备, 器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。 操作 在玻片近一端1/3处,加一滴血液,握住另一张边缘光滑的推片,以3045角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。, 注意事项 血膜呈舌状,头、体、尾分明 空气中晃动,尽快干燥;37
2、恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小(1020l)与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片;EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h内涂片,血涂片染色, 原理 瑞氏(Wright)染色法(经典染色法) 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理 吸附作用。 试剂 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇 (AR) 60ml,pH6.8磷酸盐缓冲液(pH6.46.8) 磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.2g 加少量蒸馏水溶解,再加至1000ml。, 操作 加瑞氏染液数滴,固定血膜约1min。 滴加约等量的缓冲液与染液混
3、合, 室温下染色510min。 用流水冲去染液,待干燥后镜检。, 注意事项 PH对细胞染色有影响。 未干透的血膜不能染色。 染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。 不能先倒掉染液,用流水冲去。 血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。,先在低倍镜下浏览全片,了解染色好坏和 细胞分布情况,观察有无异常细胞。 选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在 油镜下计数100个白细胞,按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。,血 涂 片 镜 检, 注意事项 分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动,计数使不能重复和遗漏。 白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。 分类见有核红细胞,不
4、计入100个白细胞内,以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告,并注明所属阶段。,除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。 分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况,注意有无寄生虫和其他异常所见。 白细胞形态变化较大,遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实,以减少错误。,异常红细胞形态检查,大小异常,正常红细胞大小较为一致,直径69um 在各种贫血时,红细胞可出现大、小不 一。直径10um为大红细胞,15um为 巨红细胞,常见于巨幼贫、肝脏疾
5、病等, 直径6um为小红细胞,多见于缺铁性贫 血等。 直径相差1倍以上为大小不均 右图:大红细胞(上) 小红细胞(下) (中央苍白区扩大),形 态 异 常,RBC直径通常2.6 um,呈小圆形,细胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症(25%以上)、自身免疫性溶贫和异常Hb病(HBS、HBC病等)。,球形红细胞,红细胞呈椭圆形,横短,长大,有时呈畸形。正常人可见到, 15%。 见于以下疾病: 1、遗传性椭圆性RBC增多症,高 于 2550%才有诊断价值。 2、大细胞性贫血时可达25%。 3、其他各类贫血有不同程度的 增多。,椭圆形红细胞,比正常红细胞扁薄,中心有少许血红蛋白,部分
6、可与周围的血红蛋白连接,边缘部染色较中央深,故呈靶状。主要见于以下疾病: 1、珠蛋白生成障碍性贫血 2、严重缺铁性贫血 3、一些血红蛋白病(血红蛋白C、D、E、S病) 4、肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。,靶形红细胞,细胞狭长似镰刀,也可呈麦粒状或冬青叶样,主要见于遗传性镰形红细胞增多症,镰形红细胞,红细胞淡染区呈裂口状狭孔,正常4%。增多见于以下疾病 : 1、口形红细胞增多症 2、急性乙醇中毒,口形红细胞,棘形红细胞是一种带刺状的红细胞,刺呈针刺状或尖刺状,见于以下疾病: 1、棘细胞增多症:遗传性血浆脂蛋白缺乏症时,棘形红细胞可高达70%80% 2、 严重肝病或制片不当,棘形红细胞,锯齿细胞也
7、称短棘形细胞。细胞突出较棘细胞短,但分布均匀。主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙铜酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。,锯齿细胞,裂红细胞,红细胞中心淡染区扩大,多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病,着色过浅,染 色 异 常,中心淡染区不见,着色较深,多见于溶血性贫血及大细胞性贫血,着色过深,红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色、灰红色、淡灰色,包体较正常红细胞稍大,这是一种尚未完全成熟的网织红细胞,多染性物质是核糖体,随着细胞的成熟而逐渐消失,主要见于各种增生性贫血,嗜多色性红细胞,结 构 异 常,用亚甲蓝染色,成熟红细胞内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒,外周血中点彩红细胞增多,表示贫血
8、时骨髓再生旺盛或有紊乱现象,某些重金属中毒时可大量出现,嗜碱性点彩红细胞,成熟红细胞内有染成紫红色的细线状环,呈圆形或 8 字形,可能是残留核膜 所致,见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。,卡波环,成熟红细胞中含有紫红色圆形小体,大小不等(12m),数量不一,可能是残留的核染色质微粒。见于增生性贫血、脾切除后、巨幼红细胞性贫血、恶性贫血等。(注意与血小板区别),豪乔氏小体(染色质小体),有核红细胞,正常成人血片中不会出现,新生儿出生1周内可能有少量有核红细胞出现。溶贫、急、慢性白血病、红白血病、髓外造血及严重缺氧等常见有核红细胞(主要是晚幼红)。 右图:中幼红(上) 晚幼红(下),异常白细胞形
9、态检验,中性粒细胞的异常变化,核象变化 包括核左移和核右移,反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现,它与分叶核细胞之间的比值约为1:13。,核左移,外周血液中出现不分叶粒细胞(指杆状核粒细胞,正常:15%、幼稚粒细胞,正常:不出现) 5%。常见于感染(特别是急性化脓性感染)、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移,多见于类白血病反应或白血病。,具体表现为: 伴白细胞总数增高的核左移称再生性移,常见于急 性化脓性感染,如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移, 常见于严重感染、机体抵抗力低下时,如伤寒、感 染中毒性休克的败血症等
10、。,中性粒细胞核出现4、5叶(正常时多为3叶,占5070%)或更多,其百分数 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外,在疾病进行期突然出现核象右移,提示预后不良。,核右移,毒性变化,严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等,中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为: 细胞大小不均:为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 中毒颗粒:细胞质中部分或全部颗粒变粗,着色深,颗粒的分布及大小等,可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致,可在细胞质或核中出现,常为多个,被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。,空 泡,细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨
11、形或云雾状,可能为核浆发育不平衡所致,为细胞严重毒性变的表现,杜勒小体,胞核有各种形态的芽状突出,临床意义尚不明确,可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。,核棘突,退行性变,表现为胞体肿大,结构模糊,边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化,退行性变是细胞衰老死亡的表现。,淋巴细胞的异常变化,异形淋巴细胞:细胞大小为1025l,形态各异,呈圆形,卵圆形或不规则形。细胞核形各异,呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形,核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒;副染色质无或少量,核仁无或偶见,大小和染色性各异。细胞质中等至大量;染灰色、淡蓝色或深蓝色;可见细胞边缘染色深,核周淡染;浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝;有时可见细小嗜天青颗粒;偶见空泡。,异形淋巴细胞可见于各种病毒感染,如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外,可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为型: I型:空泡型或浆细胞型 II型:不规则型或单核细胞型 III型:幼稚型,欢迎批评指正 谢 谢!,