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1、1生殖器疱疹患者的单纯疱疹病毒型抗原及抗体检测结果分析作者：陈少南,叶圣章，黎伟达【关键词】 生殖器疱疹；HSV摘要 目的：通过检测生殖器疱疹患者的单纯疱疹病毒型(HSV2)抗原及抗体，探讨 HSV2 抗原抗体对生殖器疱疹(GH)的临床诊断意义。方法：对性病门诊的 280 例现症 GH 患者采用 ELISA 方法进行 HSV2 抗原及抗体检测。结果：有水疱现症 GH 患者 HSV2 抗原检测阳性率为 89.7%，而 HSV2 IgG 阳性率为66.4%，HSV2 IgM 阳性率为 14.5%。对初发患者：HSV2 抗原检测阳性率为89.3%(140/156)；HSV2 IgG 阳性率为 39.
2、7%(62/156)；HSV2 IgM 阳性率为25.6%(40/156)。对复发患者：HSV2 抗原检测阳性率为 88.7%(110/124)；HSV2 IgG 阳性率为 100%(124/124)；HSV2 IgM 阳性检出率为零。结论：有水疱的现症GH 患者 HSV2 抗原检测阳性检出率较高。HSV2 IgM 作为 GH 患者的诊断指标仍需要探讨。关键词 生殖器疱疹；HSV2 抗原；HSV2 IgG；HSV2 IgM生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒型(HSV2)引起的一种常见性传播疾病。HSV2 感染发作时的症状一般是生殖器周围出现疼痛性皮肤疱疹损害和容易复发1 。当需要与其他生殖器溃
3、疡性疾病如：非感染性龟头炎、宫颈炎、梅毒等进行鉴别诊断时，实验室证据就非常重要。现在临床仍以检测 HSV2 抗原和抗体作为主要辅助诊断指标，我们对 280 例 GH 患者的 HSV2 抗原及抗体检测结果进行分析探讨。1资料和方法1.1病例来源2003 年 5 月至 2005 年 8 月，在医院门诊部 280 例有新发水疱的现症 GH 患者，其中男 170 例，女 110 例，平均年龄 36 岁，最小年龄 17岁，最大年龄 65 岁。初发患者 156 例，其中 16 例皮损不明显或结痂；复发患者124 例，其中 14 例皮损不明显或结痂，发病时间 1 d9 d，平均 3 d。1.2标本采集HSV
4、2 抗原检测用消毒棉拭子取皮损疱液或组织液，HSV2 抗体(包括 IgG 和 IgM)检测抽取静脉血，吸取血清。1.3方法HSV2 抗原检测采用丹麦 DAKO 公司生产的 ELISA 试剂盒，原理是双抗夹心法。操作步骤：将空白、阴性、阳性对照及患者标本 200 l 加入微孔中，加入酶标记物 50 l，在 37 湿盒中孵育 90 min，洗板 4 次，分别加入 100 l A、B 底物液，在 37 湿盒中孵育 30 min，加入 100 l 终止液，用 490 nm 波长读取 OD 值，以阴性对照的 OD 值+0.15 作为 cutoff 值。HSV2 抗体2检测采用美国 Trinity 公司生
5、产的 ELISA 试剂盒，操作步骤如下：在相应微孔中加入质控液、标准及经稀释的患者标本，室温孵育 60 min，洗板 4 次，加入酶标记物，室温孵育 30 min，洗板 4 次，分别加入底物液，室温孵育 10 min 后加入终止液，结果用 450 nm 波长读取 OD 值判断，以标准 OD 值矫正因子作为cutoff 值。2结果HSV2 抗原阳性检测率为 89.7%(250/280)；HSV2 IgG 阳性检出率为66.4%(186/280)；HSV2 IgM 阳性检出率为 14.3%(40/280)。在初发患者中：HSV2抗原检测阳性率为 89.3%(140/156)；HSV2 IgG 阳性
6、率为 39.7%(62/156)；HSV2 IgM 阳性率为 25.6%(40/156)。在复发患者中：HSV2 抗原检测阳性率为88.7%(110/124)；HSV2 IgG 阳性率为 100%(124/124)；HSV2 IgM 阳性检出率为零，见表 1。表 1初发患者 HSV2 抗原和 HSV2 IgG 检测结果比较（略）表 2初发患者 HSV2 抗原和 HSV2 IgM 检测结果比较（略）表 3复发患者 HSV2 抗原和 HSV2 IgG 检测结果比较（略）表 4复发患者 HSV2 抗原和 HSV2 IgM 检测结果比较（略）3讨论HSV2 是引起 GH 最常见的原因，主要通过性接触传
7、染。由于感染后具有较高的复发率，已经成为感染率最高的性传播疾病之一2 。目前实验室诊断方法主要有：病毒分离培养、IFA 方法、PCR 方法、WB 方法、抗原检测以及抗体检测，其中以病毒细胞培养作为“金标准” 3 ，可是由于其实验室条件要求严格，成本高，而且敏感性较低等原因，还不能广泛用于临床诊断，而检测抗原和抗体的ELISA 法具有快速，特异性和敏感性高的优点，成为现阶段主要的辅助诊断指标。有文献报道各阶段 GH 患者 HSV2、IgG、IgM 总阳性检出率分别为 100%和72.1%4,其结果与本实验有很大的差异，其原因可能是：所用的包被抗原为HSV1 和 HSV2 复合抗原，增加试剂的敏感
8、性；调查地区较多患者存在 HSV1 和HSV2 混合感染的现象。本实验现症 GH 患者 HSV2 抗原的阳性检出率为 89.3%，而HSV2 IgG 阳性检出率为 66.4%，因此对于现症 GH 患者 HSV2 抗原检测仍是较佳的方法。值得注意的是有 30 例皮损不明显或结痂的患者，HSV2 抗原检测全部为阴性，对于这部份患者，血清抗体检测是对抗原检测很好的补充。另外在本实验中HSV2 IgM 对于初发患者的阳性率也仅为 25.6%,而复发患者的阳性检出率为零，因此对于早期的 GH 患者，与 HSV 抗原检测相比，HSV2 IgM 阳性率明显偏低，用它作为 GH 患者的诊断指标，会出现很多漏诊
9、。GH 较容易复发，复发患者的 HSV2 IgG 阳性检出率达到 100%，因此可用于证实既往 HSV 感染，当患者的急性期血清HSV2 IgG 抗体滴度低，而恢复期血清抗体滴度增加 4 倍或 4 倍以上时才有诊断意义。HSV2 IgG 检测是发现亚临床无症状 HSV 感染者的最可行手段，对于防止GH 的性传播和母婴传播有着重要意义。HSV2 IgG ELISA 诊断方法近年来有了很大的发展，但应用于临床诊断要避免扩大化，以免给患者造成不必要的精神负担。3参考文献：1叶顺章，张木友.现代性传播疾病实验诊断技术M.广州：广东科技出版社，1997：82.2宋彪，陈祥生，李文忠，等.单纯疱疹病毒 2 型感染血清流行病学研究进展J.国外医学皮肤性病学，2003，29：45.3叶顺章.性传播疾病的实验室诊断M.北京:科学出版社，2001：95.4Gutierrez,Fernandez,vergara,et al.Comparison of several ELISA test for detecting the pressnce of IgG and IgMagainst herpes simplex virusesJ.Microbios,2000,103(405):127132.
