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1、1干化学检测乙醇抗脂浊干扰性能评价【摘要】目的：初步评价干化学乙醇脱氢酶法检测血液乙醇浓度（BAC）抗脂浊干扰能力。方法：用 VITROS250 测定 76 例严重脂浊标本超高速离心前后BAC 结果，并测定高、低临界浓度乙醇的不同脂浊度的自制溶液乙醇结果。结果：脂浊标本超高速离心前后 BAC 测定结果差异无显著性（P0.05） 。不同 TG 浓度下，乙醇(ALC)测定结果差异不大，ALC 与 TG 无相关性（r 为 0.13 和 0.09） 。结论：标本脂浊对干化学法测定乙醇无明显影响。 【关键词】血液乙醇浓度脂浊干化学酒后驾车 乙醇（alcohol,ALC）是影响中枢神经系统的一种麻醉药物，
2、饮用过量后会削弱人从事精细工作的能力，如驾驶车辆。酒后驾车（driveundertheinfluenceofalcohol,DUI）是引起交通事故的重要原因之一，交警处理事故时，常要求对驾驶员进行血液乙醇浓度（bloodalcoholconcentration,BAC）检测。浙江省规定酒后驾车和醉酒驾车BAC 界值为 0.2mg/ml 和 0.8mg/ml。由于国人饮酒时多伴高脂饮食，加上标本采集随时性，举证标本常有不同程度的脂性浑浊。我们采用 VITROS250 干化学乙醇脱氢酶法测定血液中乙醇浓度，对其抗脂浊干扰能力进行了初步评价。 1 材料与方法 1.1 仪器试剂 强生 VITROS25
3、0 干化学分析仪及原装 ALC 干片（LOT：55160014） 。试剂经calibratorkit8（LOT：0875）定标及liquidperformanceverifier、(LOT：A6259、B6260)确认成功。日立7600020 生化分析仪，TG 试剂由北京利德曼公司提供。 1.2 乙醇测定原理 VITROSALC 试剂是一种干燥、多涂层的化学干片。将 10l 样品滴于干片上，经 BaSO4 扩散层渗入试剂层，在 pH8.75TRIS 缓冲系统中与乙醇脱氢酶及 NAD+辅酶反应，37温育 5min 后，干片反射光在 340nm 测量，根据仪器响应值与定标软件自带的“终点比色法”数
4、学模型即可确定样品 ALC 浓度。 1.3 研究对象 2006 年 4 月至 2007 年 5 月期间由交警带至我院采血的驾驶员 340 例，男性323 例，女性 17 例，年龄 22 岁54 岁。经碘伏消毒皮肤，采取静脉血 5ml 于真空试管。凝固后 3000rpm 离心 5min10min，吸取血清立即上机测定 BAC，并用带盖离心管保存于-20冰箱。外观明显浑浊标本加测 TG，并经恒温超高速离心机 12000rpm 离心 10min，弃去上层乳糜漂浮物，取中层血清再测 BAC。 1.4 模拟含 ALC 脂浊溶液的制备 取 100ml 容量瓶，加超纯水定容，再加入 50l 无水 ALC，充
5、分混匀配成ALC4.0mg/ml 高值标准液。再用超纯水稀释成 ALC1.0mg/ml 低值标准液。先将脂肪乳剂用超纯水稀释成 TG 约 30mmol/L 的浑浊溶液。再将此液用超纯水按10，10.5，11，11.5，12，13，14，15 稀释。将高、低值 ALC标准液分别与稀释好的脂肪乳以 14 混合，以超纯水代脂肪乳作对照。充分混匀后测定 ALC 与 TG 浓度。1.5 统计学处理 2用 SPSS 11.5 软件对实验结果进行统计学分析。2 结果2.1 340 例标本测定 BAC 结果BAC=0.4981.24，其中 BAC（0.20.79）mg/ml 102 例,占30%；BAC0.8
6、0 mg/ml 58 例，占 17%；BAC 最高值 3.1 mg/ml。2.2 340 例标本中外观明显脂浊标本 204 例，占 60%；其中 TG10 mmol/L 76 例，占 22.4%； TG 最高值 22.5 mmol/L。2.3 76 例严重脂浊标本经超高速离心前后 BAC 结果 离心前 BAC=0.620.98，离心后 BAC=0.610.95；经配对 t 检验，P0.05,表明离心前后 BAC 测定结果差异无显著性。2.4 不同 TG 浓度下高低值 ALC 脂浊溶液 ALC 结果 见表 1。表 1 不同 TG 浓度下两种标准品（略）两组 ALC 结果分别与 TG 进行相关性分
7、析，相关系数 r 分别为 0.13 和0.09，表明 ALC 测定结果与 TG 无相关性。3 讨论血清脂浊主要是由悬浮在标本中的极低密度脂蛋白（VLDL）引起的，一般在餐后 1 h2 h 达到高峰。本文分析的 340 例血清标本中，60%伴脂性浑浊。可见脂浊现象在酒后驾车举证所提取的样本中较为常见。脂浊对生化反应的干扰主要有两方面：一是改变被测物质在血清中的分布，二是脂浊引起入射光的散射而影响比色结果。目前临床湿式生化检验中，常用双波长、双试剂法或设置标本空白来消除脂浊干扰，而这些方法在 VITROS 干化学检测系统较难实现。另外如有机溶剂抽提、超滤和高速离心等预处理程序由于操作繁琐也已较少使
8、用。VITROS 干化学分析仪采用多层薄膜技术，ALC 干片最上面一层是 BaSO4 扩散层，起到类似分子筛功能，能将大部分脂肪颗粒阻隔使其无法渗入试剂层。相当于测定前自动对脂浊标本进行了超滤预处理，将干扰减至最低。本文分析了76 例严重脂浊标本，经超高速离心处理前后 BAC 结果无明显差异，因此可以认为脂浊对测定结果无显著影响，ALC 干片试剂有良好的抗脂浊干扰能力。在含高、低临界浓度乙醇的自制脂浊溶液检测中，虽然 ALC 测定结果与 TG 无相关性，但当 TG12 mmol/L 时,ALC 有偏高的趋势,可能有小部分脂肪颗粒渗入试剂层影响反射光检测。因此，临床检验中遇到严重脂浊且 BAC 在 0.2 mg/ml 或 0.8 mg/ml 临界范围的标本时，最好经超高速离心处理后再检测，以保证检验结果的准确。【参考文献】1张红霞,张先国.我国酒后驾车 BAC 标准及检测程序等问题的探讨J.中国司法鉴定,2004,2:3638.2黄瑞勋,黄慧萍.应用 EP10A 文件对乙醇测定方法的初步评价J.齐鲁医学检验,2005,16(5):1617.3徐晓杰,胡云良,丁红香.总蛋白干化学法测定消除脂浊的干扰J.温州医学院学报,2004,2(1):6566.
