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1、生物技术实践（B）一、选择题1.下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是（ ）A.先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度B.实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度C.相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D.衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果【答案】B【解析】本实验的自变量是洗衣粉的种类，因变量是洗涤效果，无关变量有温度、pH、衣物质地(因为酶具有专一性)、洗衣粉的用量等，探究实验中除自变量外应给予相同且适宜的其他条件，才能排除无关变量对实验结果的干扰，根据上述分析，符合题意的是B，热水溶解洗衣粉可能使酶失活，只有适宜pH条件中加酶洗衣粉才有好的洗涤
2、效果，故A、C、D均不符合题意。2.某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定-淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见表(加入试管中的固定化淀粉酶量与普通-淀粉酶量相同)。实验表明1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是（ ） A.实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性B.淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶接触C.水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉水解D.实验程序出现错误，试管中应先加入碘液后保温【答案】B【解析】由于固定化淀粉酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物质，它不能通过琼脂与酶充分接触，导致淀粉不能被水解。3.如图是用已除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置
3、，下列有关叙述不正确的是（ ） A.首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较大的杂质B.图乙装置的试管收集到的液体中最先得到的是相对分子质量较大的蛋白质C.用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5 mL，连续收集D.图丙装置用于电泳法分离提纯血红蛋白的操作中【答案】A【解析】本题考查血红蛋白的提取和分离实验，意在考查考生获取信息的能力和理解能力。用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质。采用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，相对分子质量较大的蛋白质先从层析柱中洗脱出来。4.下列有关DNA粗提取和鉴定实验的叙述不正确的
4、是（ ）A.利用鸡血细胞在低渗溶液中涨破的原理制备含DNA的滤液B.利用在不同浓度的NaCl溶液中溶解度差别粗提取和纯化DNAC.利用DNA溶于乙醇的性质进一步纯化DNAD.利用DNA与二苯胺溶液的显色反应对样本中的DNA进行鉴定【答案】C【解析】利用鸡血细胞在低渗溶液中涨破的原理制备含DNA的滤液；利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的差别粗提取和纯化DNA；可利用DNA不溶于乙醇的性质进一步纯化；可利用DNA与二苯胺溶液的显色反应对DNA进行鉴定。5.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使
5、目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是（ ） A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变【答案】C【解析】PCR技术是人工合成DNA方法，原料是脱氧核苷酸而不是核糖核苷酸。二、非选择题6.红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题。(1)实验前取新鲜的血液，
6、要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。以上所述的过程为样品处理，它包括 、 、收集血红蛋白溶液。(2)收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是 ；透析的原理是 。(3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的方法是 。加入SDS可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于 。【答案】（1）防止血液凝固 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放（2）去除分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内（3）凝胶色谱法 分子的大小【解析】本题考查
7、凝胶色谱法分离蛋白质的原理。凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，凝胶是由多糖类化合物构成的，其内部有很微细的多孔网状结构，小分子蛋白质可以进入凝胶内部，路程较长，移动速度慢，而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，路程较短，移动速度快，因此在洗脱中先分离出。选用不同种凝胶，其立体网状结构不同，孔隙大小不同，因此可分离的分子大小也不同，故应相关。凝胶一般对分离的物质无吸附作用，所有要分离的物质都应该被洗脱出来，这是凝胶色谱法与一般层析法的不同。7.某同学进行苹果汁制作实验，工艺流程如图所示： (1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是 。黑曲霉提取液中含有的 可分解果胶，从
8、而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过 方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 。(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为 。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是 。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的 混合，如果出现 现象，说明果胶还没有被完全分解。为使果胶完全分解，应将流速调 。(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被 使用。【答案】 (1)消毒 果胶酶 吸附 未被固定的酶等物质 (2)AB 阀1 乙醇 浑浊(沉淀) 慢 (3)重复【解析】(1)在制作工艺中必须对原材料
9、消毒，这样才能保证后续实验的成功。KMnO4是强氧化剂，可以起到对苹果的消毒作用。可使果胶分解的物质是果胶酶。在制备固定化酶时，石英砂具有吸附作用。为了除去未被固定的酶等物质，需用蒸馏水洗涤固定化柱。(2)实验中应先制备好固定化酶，再对苹果进行榨汁处理，否则易使果汁污染。在苹果汁澄清过程中，应将调节阀1关闭，否则在产物中会混入较多的果胶酶。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的乙醇混合，如果出现浑浊或沉淀的现象(乙醇对果胶有凝聚作用)，说明果胶还没有被完全分解。为使果胶完全分解，应将流速调慢，以便反应充分进行。(3)固定化酶的最大优点是可回收重复使用。8.请回答下
10、列生物技术有关问题：(1)DNA变性后，当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，称为 。PCR技术利用了DNA的 原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。(2)在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止 。如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明固定的酵母细胞数目 。(3)若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至 期的花药培养成功率最高。【答案】(1)复性 热变性 (2)高温杀死酵母菌 较少 (3)单核【解析】(1)DNA热变性后可以再恢复到原来的双链状态，所以PCR技术可以利用DNA热变性的原理，通过控制温度来
11、控制DNA的解聚和结合。(2)因为制备海藻酸钠溶液需要加热，所以制备完毕要冷却后才能使用，否则会杀死酵母细胞。凝胶珠的颜色深浅与被固定的酵母细胞数量呈正相关，即固定的细胞越多则颜色越深，所以凝胶珠的颜色过浅，说明固定的酵母细胞太少。(3)花药离体培养时一般选择发育至单核期的花粉为材料。9.菊花的组织培养的大致过程如图所示。请回答下列问题： (1)外植体的消毒：选取生长旺盛的嫩枝，冲洗干净。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的 中摇动23次，持续67 s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗。吸干表面水分，放入质量分数为0.1%的 中24 min取出后，在无菌水中至少清洗3次，其
12、目的是 。(2)菊花组织培养过程中，启动细胞分裂、B (填名称)、再分化的关键激素是 。通过B过程产生的愈伤组织细胞与枝条韧皮部细胞形态结构 (填“相同”或“不同”)，其根本原因是 。(3)该实验操作成功的关键是 ，所以要对外植体、超净工作台等消毒，对 等灭菌，实验操作过程都要在 旁进行。试管幼苗的获得证明菊花体细胞具有 性。【答案】(1)酒精 氯化汞溶液 漂净消毒液 (2)脱分化 细胞分裂素、生长素 不同 基因的选择性表达 (3)无菌操作或无菌技术 培养基或培养器具 酒精灯的火焰 全能【解析】(1)外植体的消毒过程：用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的酒精中摇动23次，持
13、续67 s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗，吸干表面水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24 min，取出后，在无菌水中至少清洗3次，其目的是漂净消毒液。(2)在植物组织培养过程中，形成愈伤组织的过程是脱分化；启动脱分化和再分化过程的激素主要是生长素和细胞分裂素；愈伤组织和外植体的细胞形态、结构差别很大，根本原因在于不同细胞内基因的选择性表达。(3)植物组织培养的关键在于无菌技术，所以培养基的灭菌、外植体的消毒和无菌操作都很严格；实验操作过程要在酒精灯火焰旁进行，试管苗的获取体现了植物细胞的全能性。10.玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下： （1）玉
14、米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用 法或稀释涂布平板法计数。（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用 法或 法从玉米胚芽中提取。（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用 技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的 催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、 和 三步。【答案】（1）碳源 显微镜直接计数 （2）压榨 萃取（注：两空可颠倒）（3）固定化酶（4）（Taq）DNA聚合酶 （低温）复性（或退火）（中温）延伸【解析】（1）纤维素的水解
