20162017版高中生物第3部分生物技术在食品加工中的应用实验10泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定教案浙科版选修

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1、实验10 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定课标解读重点难点1.进行泡菜的腌制。2.测定泡菜中亚硝酸盐的含量。1.制作泡菜过程中注意的问题。2.测定亚硝酸盐含量的操作步骤。一、实验原理1泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌。2在无氧的条件下,微生物利用菜中的糖和其他营养物进行发酵,发酵产物有有机酸和醇类物质等,其中也有亚硝酸。3亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量。二、泡菜腌制的实验步骤补充说明:若要发酵快些,可将蔬菜在开水中浸1_min后入坛,再加一些白酒;如果加入一些已经腌制过的泡菜汁更好,这相当于接种已经扩增的发酵

2、菌,可减少腌制时间。为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?【提示】有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放时间太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。三、亚硝酸盐的定量测定1样品处理过滤定容2测定3标准曲线 4计算X1(m2V1)/(m1V2),其中,X1是样品中亚硝酸盐含量;m1为样品质量;m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量;V1为样品处理液总体积;V2为测定用样品液体积。乳酸菌发酵制泡菜与酵母菌发酵生产果酒有哪些共同点?【提示】泡菜制作和果酒制作的主要原理都是利用微生物的无氧呼吸,发

3、酵过程都需要密封。泡菜的制作泡菜是利用天然微生物进行发酵而制成的,泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌。1乳酸菌及乳酸发酵(1)乳酸菌概念:指在代谢过程中能产生乳酸的细菌的总称。它们以单糖或双糖为基质,代谢产物主要是乳酸。特点:厌氧型细菌,种类多,分布极广,如空气、土壤、植物体表及人的肠道内都有分布。抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长。常见的类型:乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于制作酸奶。(2)乳酸发酵同型乳酸发酵:发酵产物中只有乳酸的发酵类型。反应式:C6H12O62C3H6O3。异型乳酸发酵:发酵产物中除乳酸外,还有其他物质,如乙醇、CO2等的发酵类型。反应式:C6H12O

4、62C2H5OH2CO2和C6H12O62C3H6O3。2泡菜发酵过程及产物(1)泡菜发酵过程及期间的亚硝酸盐含量变化发酵前期:蔬菜刚入坛时,表面带入的微生物,主要是以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等较为活跃,它们进行异型乳酸发酵和微弱的酒精发酵产生较多的乳酸、酒精和二氧化碳等,二氧化碳以气泡形式从水槽内放出,逐渐使坛内形成嫌气状态,此阶段由于硝酸盐还原菌的活动,亚硝酸盐含量有所增加。发酵中期:由于前期乳酸的积累、pH下降、嫌气状态的形成,乳酸杆菌进行活跃的同型乳酸发酵,乳酸积累,pH达3.53.8时,大肠杆菌、酵母菌、霉菌等的活动受到抑制。这一期为完全成熟阶段,泡菜有酸味且清香品质最好。此期乳酸菌

5、数量达到高峰,乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制,同时形成的亚硝酸盐又被分解,因而亚硝酸盐含量下降。发酵后期:继续进行乳酸发酵,乳酸积累达1.2%以上时,乳酸菌的活性受到抑制,乳酸菌数量下降,而硝酸盐还原菌完全被抑制,亚硝酸盐含量继续下降,发酵速度逐渐变缓甚至停止。亚硝酸盐在整个发酵过程中的含量变化趋势见下图。(2)泡菜发酵产物在无氧条件下,微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,发酵产物有有机酸和醇类物质等,其中也有亚硝酸(HNO2)。3泡菜的制作过程要制作色香味俱佳,营养卫生的泡菜,应掌握原料的性质,注意选择容器、制备盐水、搭配调料等。(1)材料的准备泡菜坛的选择:应选择火候好、釉

6、质好、无裂纹、无砂眼、吸水良好、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。原料的选择:用材广泛,原则上品种应当全,质地鲜嫩、肉厚、无虫咬、无烂痕、无斑点者为佳,品种越多,色泽风味越佳。调料:花椒、茴香、八角、胡椒粒,可增香、除异去腥。(2)制作步骤亚硝酸盐对人体健康有害,为何可作为食品添加剂?膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出,一般不会危害人体健康,只有在特定的条件下(适宜的pH、温度和一定的微生物作用),才会转变成致癌物亚硝胺。当人体摄入的亚硝酸盐总量达到0.30.5 g时,会引起中毒;当摄入总量达到3 g时,会引起死亡,维生素C、大蒜素、茶叶中的茶多酚具降低体内亚硝胺含量的作用。农

7、村制作泡菜的方法:将新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,泡菜坛一般是两头小中间大的陶器,坛口有坛沿,凡裂缝的菜坛不能用。然后加入盐水、香料及一些“陈泡菜水”,密封后置于阴凉处,最适环境温度为28 32 。(1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是_。(2)菜坛密封的原因是:_。若菜坛有裂缝,可能会出现的结果是_。(3)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是_。(4)加入一些“陈泡菜水”的作用是_。(5)制作泡菜的过程中,有机物的干重如何变化?菜坛内有机物的种类如何变化?_。【思路点拨】本题主要考查泡菜制作过程及条件控制,思路分析如下:(1)用白酒擦拭的目的是消毒、杀菌,避免

8、泡菜坛中的微生物影响发酵过程(2)菜坛密封,是为了形成无氧环境,为乳酸菌提供适宜环境;若菜坛有裂缝,则会抑制乳酸菌的发酵,导致好氧微生物大量繁殖,使泡菜腐败变质(3)微生物生长需要适宜的渗透压,若外界浓度过高会使微生物失水死亡,不能完成乳酸发酵(4)“陈泡菜水”里面乳酸菌含量丰富,利于泡菜的快速发酵(5)乳酸菌在进行发酵时,消耗有机物中的能量,同时将大分子物质分解成许多小分子物质【答案】(1)消毒、杀菌(2)乳酸菌是严格厌氧型生物抑制乳酸菌发酵,导致好氧微生物大量繁殖,使发酵失败(3)盐的浓度过高,使乳酸菌失水死亡,没有生成乳酸,或产生乳酸过少(4)提供乳酸菌菌种,使其在短时间内形成菌种优势(

9、5)有机物干重减少,种类增多1某人利用乳酸菌制作泡菜时由于操作不当,泡菜腐烂。下列原因中正确的是()罐口密闭缺氧,抑制了乳酸菌的生长繁殖罐口封闭不严,氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖罐口封闭不严,氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖罐口封闭不严,促进了需氧腐生菌的生长和繁殖A BCD【解析】本题主要考查对乳酸菌发酵原理的掌握。乳酸菌是厌氧细菌,在有氧时它的发酵过程受到抑制,氧气促进了需氧腐生菌的生长和繁殖,这时需氧型微生物分解泡菜的有机物而使泡菜腐烂。【答案】B亚硝酸盐含量的测定1.测定原理亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,其产物与N-1-奈基乙二胺偶联,形成紫红色产物。亚硝酸盐溶液的浓度不同,呈

10、现的颜色深浅不一:溶液浓度高,颜色深些,浓度低,颜色浅些,可用光电比色法予以定量。2涉及的溶液(1)氯化铵缓冲液(pH为9.7);(2)硫酸锌溶液;(3)NaOH溶液;(4)对氨基苯磺酸溶液;(5)N-1-萘基乙二胺溶液;(6)显色剂(为对氨基苯磺酸溶液与N-1-萘基乙二胺溶液等体积混合液);(7)亚硝酸钠标准溶液(储液);(8)亚硝酸钠样品溶液(测定用液)。3测定步骤 请补充下列实验空缺内容:(1)测定亚硝酸盐含量时操作的步骤为_、_、_、_。(2)进行亚硝酸盐含量测定时,无论是亚硝酸钠标准溶液,还是样品溶液,均需与_、_和_(由_和_等体积混合而成)混合并静置25 min,然后,用_cm的

11、比色杯在_nm处测定光密度值。(3)绘制标准曲线时,取_、_、_、_和_mL亚硝酸钠标准溶液,分别测定其光密度值,然后以_为横坐标,以_为纵坐标,绘标准曲线。【思路点拨】测定亚硝酸盐含量的步骤可分为:样品处理测定绘标准曲线计算,进行测定时被测定液中应加入氯化铵缓冲液、乙酸溶液、显色剂等,并用光程为1 cm的比色杯在550 nm处测定光密度值。绘制标准曲线时应以亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度值为纵坐标绘制。【答案】(1)样品处理测定绘标准曲线计算(2)氯化铵缓冲液乙酸溶液显色剂对氨基苯磺酸溶液N-1-萘基乙二胺溶液1550(3)00.51.03.05.0亚硝酸钠质量光密度值2(2016湖州检测)

12、某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究,操作如下:选取1、2、3号三只相同的泡菜坛,在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6 kg,再分别倒入相同量的煮沸并冷却的10%的盐水,将坛密封,置于同一环境中。封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量,后来定时测定。(1)在腌制过程中,会出现坛中溶液量增加,这是由于_。(2)测定亚硝酸盐含量的方法是光电比色法,其原理是:在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后,与N-1-萘基乙二胺溶液结合形成_色产物。然后,用光电比色法定量。(3)制作泡菜时要将实验材料分成3组,除了实验材料的重量相同外,还要保证每组泡菜的_相同。(4)从第三天开始,定期测定泡菜中的亚硝酸盐含量,请帮助该小组设计一个用于实验记录的表格。【答案】(1)外界溶液浓度过高使植物细胞渗透失水;微生物的呼吸作用也可产生水(2)重氮化紫红(3)制作(或培养、发酵)条件(4)表格如下1号坛2号坛3号坛第3天第5天第7天1乳酸菌与酵母菌从结构上相比较,后者最显著的特点是()A无细胞器B有成形的细胞核C无DNAD不能进行无氧呼吸【解析】乳酸菌为细菌,属于原核生物,而酵母菌为真菌,属于真核生物。【答案】B2要使泡菜制作成功最主要的条件是()A缺氧环境 B有氧环境C加盐D加香辛料【解析】乳酸菌是厌氧型细菌,必须在无氧环境下发酵产生乳酸。制作泡菜成功的关键是保持缺氧环

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