《浙江专用2018届高考生物二轮复习专题二十三微生物的利用与酶的应用课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《浙江专用2018届高考生物二轮复习专题二十三微生物的利用与酶的应用课件（65页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专题二十三 微生物的利用与酶的应用,内容索引,考点一 微生物的利用,考点二 酶的应用,探高考 练模拟,考点一 微生物的利用,答案,一、大肠杆菌的培养和分离 1.大肠杆菌 (1)特性：大肠杆菌是革兰氏 性、 (代谢类型)的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害，但若进入人的 系统，就会对人体产生危害。 (2)用途：是 技术中被广泛采用的工具。 2.细菌的培养和分离 (1)细菌的繁殖：以 方式繁殖，分裂速度很快，约20 min分裂一次。 (2)培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中，一般用 (工具)转移带菌的培养物。,兼性厌氧,泌尿,基因工程,分裂,接种环,阴,答案,(3)细菌分离的方法与特
2、点,划线分离,涂布分离,单菌落,3.消毒和灭菌的区别,答案,物体表面,煮沸,高压蒸汽,化学,4.大肠杆菌的培养和分离实验 (1)实验内容：将大肠杆菌扩大培养和划线分离，即用 培养基扩大培养大肠杆菌，培养后再在 培养基上划线进行分离，随后培养基上就会形成一个个单独的菌落。,答案,LB固体平面,LB液体,答案,(2)实验步骤,倒平板,接种,高压,蒸汽,三角瓶,连续划线,单个菌落,(3)大肠杆菌分离的用途：单菌落的分离是 的通用方法，也是用于筛选 菌株的最简便方法之一。 二、分离以尿素为氮源的微生物 1.菌种特点 含有 酶，可以通过降解尿素作为其生长的氮源。 2.培养基 用以 为唯一氮源的培养基培养
3、，以 培养基为对照。 3.实验原理 (1)筛选以尿素为氮源的微生物，可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择。 (2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成 ，致使pH升高，使酚红指示剂 。,答案,消除污染杂菌,高表达量,脲,LB全营养,NH3,变红,尿素,4.实验步骤 制备培养基：将已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒入两个培养皿中，摇匀，平放至凝固 制备细菌悬液：用1 g土样配制不同浓度的细菌悬液 用 分离细菌：将不同浓度的土壤稀释液分别加入到有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，并用玻璃刮刀涂布到整个平面上 培养：将培养皿倒置，在37 恒温箱中培养2448 h 观察：培养基中菌落数量,
4、答案,涂布分离法,5.反应的鉴定 在配制培养基时，加入指示剂酚红，培养时细菌将尿素分解产生碱性的氨，使培养基上菌落周围出现 。,答案,红色的环带,1.从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 ( ) 提示 异养微生物不需要光照。 2.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害、 ( ),答案,思考诊断,提示,3.下图中甲为划线分离法中最重要的环节，乙为操作的结果：,答案,提示,(1)每一次划线后都要将接种环灼烧 ( ) (2)除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端 ( ) 提示 平板划线时除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一
5、次划线的末端，而不是第一次。,答案,提示,4.筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源 ( ) 5.分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低 ( ) 提示 应为升高。,1.培养基的配制及划线分离操作的注意事项 (1)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项 倒平板的适宜温度是60 左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 (2)划线分离操作的注意事项 第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。,灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 划线时
6、最后一区域不要与第一区域相连。 划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。,2.几种消毒和灭菌方法及其适用范围,3.接种微生物的两种常用方法比较,4.分离以尿素为氮源的微生物的注意事项 (1)培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化(变红)，标志着存在脲酶分解尿素的作用，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强。 (2)本实验中配制固体培养基时应选用琼脂糖而不能选用琼脂作凝固剂。这是由于琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养基上产生
7、大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。,(3)由于尿素在高温下会分解，所以对尿素溶液的灭菌要采用G6玻璃漏斗过滤的方法。并且应在基本培养基经高压蒸汽灭菌后，冷却至60 时再加入。 (4)土样应从有哺乳动物排泄物的地方取得，这是由于动物排泄物中有一定量的尿素，在这些土壤中一般含有较多的分解尿素的细菌。,题型一 大肠杆菌的培养和分离,1,2,3,4,1.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程，请回答下列问题,A.配制培养基,B.灭菌,C.扩大培养(液体培养基,D.划线分离和培养和培养(固体培养基),E.菌种保存,解析 LB液体培养基是通用的细菌培养基，LB固体平面培养基则
8、用于划线分离形成单菌落。氯化钠的作用是维持培养基的渗透压。调节好酸碱度后才能进行灭菌，若灭菌后再进行酸碱度调节，又会产生新的污染。,1,2,3,4,(1)A过程配制的是通用细菌培养基，称为_培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持_。对培养基酸碱度的调节，应该在B过程的_(填“前面”或“后面”)。,前面,LB液体,渗透压,(2)D过程与C过程相比，培养基中增加的物质是_，E过程所需的温度是_。,解析 在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂可形成固体培养基。菌种应置于4 C冰箱中保存。,4 ,琼脂,解析答案,1,2,3,4,(3)D过程后，一个菌体便会形成一个_，这
9、种分离方法是_的通用方法，也是筛选特定菌株的最简便方法之一。,解析 通过划线分离后，一个菌体就会繁殖出一个菌落。,消除污染杂菌(或纯化菌种),(单)菌落,(4)植物组织培养时，先配制MS培养基，再加入一定比例的植物激素，当生长素相对较多时，可促进_。,解析 植物组织培养中生长素相对较多时，有利于生根，而细胞分裂素相对较多时，则有利于生芽。,生根,解析答案,1,2,3,4,(5)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是( ) A.接种环和镊子 B.三角瓶和广口瓶 C.发芽培养基和生根培养基 D.用于培养的幼茎和幼芽,解析 高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等的灭菌，而
10、用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何灭菌操作，否则会导致细胞死亡。,解析,2.检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题： (1)要测定饮用水中大肠杆菌的数量，常采用_法，通常将水样进行一系列的梯度_，然后将上述的水样用玻璃刮刀分别涂布到_的表面进行培养，记录菌落数量。用该方法统计样本菌落数时_(填“是”或“否”)需要对照组。原因是：_。,1,2,3,4,需要判断培养基使用之前是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格),涂布分离,稀释,LB固体培养基,是,答案,(2)下面所示的四种菌落分布图中，不可能由上述方法得到的是_。,1,2,3,4,(3)大肠杆菌的培养条
11、件是无菌，培养基配制时需加入氯化钠，以维持_。配制培养基时先_后_。 A.调节pH B. 灭菌 C.消毒 D.调节温度,渗透压,答案,3.请回答微生物培养和分离的有关问题： (1)欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基，用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_，则说明分离成功。,1,2,3,4,题型二 分离以尿素为氮源的微生物,解析 分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红作指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的反应，证明菌株可以以尿素为氮源。,涂布分离(或涂布),尿素,酚红,红,解析答案,(2)
12、分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分_。 A.前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖 B.两者都含有琼脂 C.前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂 D.两者都不含琼脂和琼脂糖,1,2,3,4,解析 分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。,解析,4.要获得能够分泌脲酶的细菌的菌种，某生物兴趣小组的同学设计了以下培养和筛选的途径： (1)获得菌种：要获得较多的能够分泌脲酶的细菌，最好取525 cm处的浅层土样，说明这类细菌的细胞呼吸方式为_，在生态系统中属于_(成分)。,1,2,3,4,分解者,需氧呼吸,答案,(2)将土样
13、加入无菌水中配制成悬液，并配制如图所示的培养基，其中尿素在培养基中必须是作为保证微生物生长的唯一_。向培养基中添加尿素的方法是待其他成分灭菌冷却后， 加入尿素溶液，而该尿素溶液要事先用 _过滤，使之无菌。从物理 性质看，该培养基属于_。,1,2,3,4,葡萄糖：0.05 g NaCl：0.24 g K2HPO4：0.24 g 琼脂糖：1.0 g 酚红：0.5 g 水：30 mL 尿素：20 mL(含2 g脲),固体培养基,氮源,G6玻璃漏斗,答案,(3)利用酚酞指示剂可检测出细菌是否能分泌脲酶，原理是脲酶能使_，结果菌落周围培养基呈红色。 (4)为获取能分泌脲酶的单菌落，必须将土壤样液进行稀释
14、，并取少量稀释土壤液用_接种于培养基上，培养皿在培养箱中培养时必须倒置，原因是_。,1,2,3,4,培养基中的尿素分解为NH3，使周围的pH升高,防止冷凝后的水珠从皿盖上落入培养基，造成污染,涂布分离法,答案,(5)若要分离土壤中的尿素分解菌，对于采集和处理土壤样品，下列叙述错误的是( ) A.最好选择在肥沃湿润、动物排泄物多的土壤中取样 B.采集的土样需经高温灭菌后，才可以用于制取土壤稀释液 C.制备土壤稀释液时，要用无菌水 D.用于制备土壤稀释液的各种器具要经过灭菌,返回,1,2,3,4,考点二 酶的应用,一、果汁中的果胶和果胶酶 1.果胶 (1)果胶是 的主要成分，它由_ 组成。 (2)果胶与果汁加工：果胶不仅影响出汁率，还会使果汁浑浊。 2.果胶酶 (1)来源：黑曲霉、苹果青霉等。 (2)组成：果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，主要包括果胶酶和 酶。,答案,植物细胞壁,半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯,果胶甲酯,(3)作用：将果胶分解成可溶性的分子，使出汁率提高，也使浑浊的果汁变得澄清。 3.探究利用苹果或山楂匀浆制作果汁的最佳条件的实验 (1)实验原理,答案,果胶酶的活性受温度(或pH
