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1、医学免疫学实验,病原生物学与免疫学教研室 Tel: 姓名,第一讲 抗原抗体反应 antigen-antibody reaction,什么是抗原抗体反应？,抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应。抗原抗体反应既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发生，也可在体外作为免疫学实验的结果出现。在体内，可表现为溶菌、杀菌、促进吞噬或中和毒素等作用，有时亦可引起免疫病理损伤，在体外，依相应抗原物理性状 (颗粒状或可溶性)以及反应的条件 (电解质、补体等)不同，可出现凝集、沉淀、细胞溶解和补体结合等反应。,抗原抗体反应的特点,1. 特异性,Ab 1 Ab2 Ab3,抗原抗体反应的特点,2.比例 性
2、,抗原抗体反应的特点,3.可逆性,体外抗原抗体反应的影响因素,电 解 质,温 度,酸 碱 度,作用时间,抗原抗体反应类型,可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应 颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应 抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应 免疫标记的抗原抗体反应。,凝集反应,-ABO血型的鉴定,实 验 目 的,1. 熟悉凝集反应的定义及血型鉴定实验的原理。 2. 掌握血型鉴定实验的操作及结果的正确观察与判断。 3.了解血型鉴定实验的用途。,凝集反应,定义：在一定浓度的电解质环境中，颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等）和相应抗体反应能够产
3、生肉眼可见的凝集块 直接凝集 间接凝集 间接凝集抑制试验 抗球蛋白试验,间接凝集反应,间接凝集抑制,抗球蛋白法检测IgG抗体的原理,抗球蛋白可以和IgG反应,通过搭桥作用使红细胞凝集,概 述,血型系统 Blood group system,1901年发现的人类第一个血型系统- ABO血型系统发现者-奥地利科学家 Karl Landsteiner,ABO血型系统的发现,【实验原理】,血型是指红细胞的血型，是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂）来确定的，这种抗原或凝集原是由遗传决定的,Y,+,实验器材,1：载玻片、采血针、牙签等,2：A型和B型标准血清、酒精棉球,操
4、作步骤,1.取载玻片，酒精消毒正面，在背面标记A和B两区 2.酒精消毒指端皮肤和采血针后，用采血针刺破皮肤，挤出少量血液，涂在玻片A、B两区，并立即用无菌干棉球压迫止血 3.在两区分别滴加一滴抗A定型试剂和抗B定型试剂，立即用牙签混匀 4.静置3分钟，观察凝聚现象，判定实验结果,实验结果,ABO血型检查临床意义,1.输血：输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血完全相合才能输血。 2.母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病，主要是依靠血型血清学检查来诊断。 3.器官移植时受者与供者也必须ABO血型相符合才能移植，血型不符极易引起急性排异反应、导致移植失败。 4.ABO血型与疾病之间
5、的联系也有一些报道，某些看来造血系统无关的疾病实际上可能与红细胞血型抗原有关。,沉淀反应,-对流免疫电泳,沉淀反应,可溶性抗原在有适量电解质存在的条件下与相应的抗体结合，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应 类型：,单向扩散,单向扩散,双向扩散,即将抗原和抗体分别加入琼脂对应的孔中，二者会向四周扩散， 在形成白色沉淀线。,二者比例合适处,双向扩散,电 泳,定义：即带电颗粒在电场的作用下向着相反的电极移动，称为电泳。 原理：蛋白质分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒，并可在电场内移动，其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH
6、值，携带的静电荷不尽相同，致使它们在电场中的迁移率各异，从而达到分理的目的。,火箭免疫电泳,火箭免疫电泳,对流免疫电泳,对流免疫电泳实质上是由电泳定向加速的双向扩散 抗原在电泳时从负极向正极移动 抗体由正极向负极移动,实验器材,1：载玻片、打孔器、三角烧瓶、移液管、洗耳球、10%的琼脂、记号笔,2：酒精灯、火柴、电炉、电泳仪、电泳槽,3：微量加样器、抗原及抗体样品,操作步骤,制板,打孔,封底,加样,电泳,34ml琼脂,孔间距3mm,约7ul,切割火焰23次,总电流4mA/cm x 2.5cm(板宽) x N(板数）30分钟,对流免疫电泳实验结果,对流免疫电泳,思 考 题,1、对流免疫电泳试验中
7、如果抗原、抗体的正极和负极放反了是否会出现沉淀线？为什么？ 2、抗原抗体反应检测的临床意义有哪些？,实验操作录像,实验操作录像,实验报告,实验原理 实验方法 实验结果及分析 思考题,参考书籍及网站,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or comput
8、er, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,
