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1、44文件编号：LABOPMY020第 页，共 页 版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 医院检验科免疫室分析项目作业指导书 Elecsys E 170/E 411乙甲状旁腺素1. 分析原理采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。 第1步：50l标本、生物素化的抗PTH 单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗PTH单抗混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自
2、动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。2. 标本要求血清：按标准常规方法采集。血浆：EDTA-K3抗凝。建议用血浆，因为比血清稳定。标本在1525度可稳定2天，在28度可稳定3天，-20度可稳定6个月。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控液禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。.3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂：M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒
3、子。含防腐剂。R1：生物素化的抗PTH抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度2.3mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.0。含防腐剂。R2：钌（Ru）标记的抗PTH抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度2.0mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.0。含防腐剂。校准品：Elecsys PTH定标液（PTH CalSet）货号质控品：Elecsys 骨质控品（PreciControl Bone）货号其他所需材料： Elecsys1010、2010或E170分析仪 Elecsys1010/2010分析仪需要 Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988 Elecsys 测量
4、池清洗液（CleanCell）货号11662970 Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346 Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean) ）货号11933159 Elecsys 1010反应杯（Assay Cup) 货号11706829Elecsys 2010反应杯（Assay Cup) 货号11706802 Elecsys 2010吸样头（Assay Tip) 货号11706799E170分析仪需要 Elecsys系统缓冲液（ProCell M）货号12135019 Elecsys测量池清洗液（CleanCell M）货号12135027
5、 Elecsys系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）货号03023141 Elecsys反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M)货号12102137 Elecsys废物盒(wasteliner)货号03023150 Elecsys系统清洗液支架(SysClean Adapter M) )货号03027651各种分析仪均适用的材料 Elecsys 系统清洗液（SysClean） 货号112985004. 仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：
6、每批PTH试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用PTH定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：E170/Elecsys2010： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒）Elecsys1010： 每一试剂盒做一次 7天（室温2025 度） 3天（室温2532 度）各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。5. 操作方法按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无
7、法阅读条形码，可以手工输入15位数字。E170/Elecsys2010：将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。Elecsys1010：将冷藏试剂预温到2025度后放置于仪器的样品/试剂盘上（室温2025度），避免产生泡沫。使用前手工打开试剂瓶盖，使用后手工关闭试剂瓶盖并放回28 度。6. 质量控制Elecsys骨质控品l、2和3以及其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24工作时、每个试剂盒或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的 具 体 要 求。检 测 值 应 落 在 确 定 的 范 围 内，如 出 现 质 控 值 落
8、 在 范 围 以 外，应 采 取校正措施。7. 计算方法对每一个标本，仪器会自动计算含量，单位是pg/ml或pmol/l。换算方法是pmol/l9.43=pg/ml或pg/ml0.106=pmol/l8. 参考范围15-65pg/ml或1.6-6.9pmol/l，如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。9. 分析性能检测范围：1.205000pg/ml或0.127-530pmol/l10. 干扰因素该方法不受黄疸（胆红素65mg/dl）、溶血（血红蛋白1.5g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）生物素5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子（1
9、500U/ml）干扰。PTH浓度高达17000pg/ml也不出现钩状效应。16种常用药物经试验对本测定无干扰。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。Elecsys PTH测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。11. 结果解释12. 临床意义甲状旁腺素（PTH）由甲状旁腺合成并分泌入血流中。完整的PTH由一条肽链组成，含84个氨基酸，分子量为9.5KD。具有生物活性的N端片段半衰期只有几分钟。因此，有选择地检测完整的甲状旁腺素，可以直接了解甲状旁腺体的分泌活性。PTH与维生素D和降钙素一起，动员骨骼系统的钙和磷酸，增加小肠对钙的吸收和肾脏对磷的排泄。PTH和降钙素的相互作用维持血
10、钙水平的稳定性。血钙升高抑制PTH的分泌，血钙降低则促进PTH的分泌。甲状旁腺体机能紊乱引起的PTH分泌改变，进而导致血钙水平的升高或降低（高钙血症或低钙血症）。检查甲状旁腺机能低下症要求灵敏的试验，以便检测低于正常范围的PTH水平。甲状旁腺机能功能亢进症导致PTH分泌上升，主要由甲状旁腺腺瘤引起。继发性的甲状旁腺机能功能亢进症中，血钙低下，这是由于其它病理状态引起的。目前，对甲状旁腺机能亢进的诊断中，PTH和血钙含量测定更加引起重视，在甲状旁腺腺瘤切除手术前后测定PTH能帮助外科医生了解手术效果，完全切除可使PTH快速下降。PTH测定法采用双抗体夹心法原理，生物素化的单抗与N端结合（1-37），钌标记的单抗与C端结合（38-84）。对应的抗原决定簇氨基酸序列在26-32和55-64区域。13参考文献编写： 审核： 批准：批准日期： 年 月 日
