艾滋病快速检测ppt

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1、艾滋病快速检测,曲靖市艾滋病确证实验室 2009年5月,艾滋病检测工作管理办法,实验室的设置 国家艾滋病参比实验室:中国CDC 艾滋病确证中心实验室:省CDC 艾滋病确证实验室：州（市）级CDC 艾滋病筛查中心实验室:地(市)级CDC 艾滋病筛查实验室：县CDC 艾滋病检测点：县级医院、乡（卫生院）,艾滋病检测工作管理办法,实验室必备条件 人员条件 国家艾滋病参比实验室:略 艾滋病确证中心和确认实验室 至少由5名医技人员组成, 高级卫生技术人员至少1名、中级2名或以上,负责确认实验的人员需具有3年以上从事HIV抗体初筛工作经验、接受过国家级或确证中心实验室的技术培训,并获得合格证书. 筛查中心

2、实验室和筛查实验室 至少由3名医技人员组成，具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的人员需具有2年以上从事血清学检测工作经验，接受过省确认中心实验室的技术培训，并获得合格证书。 艾滋病检测点 2名检测技术人员，且经过确认中心实验室培训，并获得合格证书。,艾滋病检测工作管理办法,建筑条件和设备条件 国家艾滋病参比实验室（略） 艾滋病确认中心和确证实验室（略） 艾滋病筛查中心实验室和筛查实验室(略) 艾滋病检测点 有独立实验用房或专用检测台。 配备快速检测试验所需设备，包括移液器、普通冰箱、离心机；消毒与污物处理设备；安全防护用品。,艾滋病检测工作管理办法,实验室的任务 国家艾滋病参比实验

3、室（略） 艾滋病确认中心实验室和确证实验室（略） 艾滋病筛查中心实验室（略） 艾滋病筛查实验室 (1)承担本地区艾滋病抗体筛查任务。 (2)负责接收各艾滋病检测点的阳性反应标本复检,仍为阳性反应的直接送确证实验室确证。 (3)按规范要求开展检测前后咨询。 艾滋病检测点 1、承担前来就诊艾滋病快速检测任务。 2、负责快速检测抗体阳性标本送县CDC筛查实验室。 3、按规范要求开展前后咨询。,艾滋病检测工作管理办法,艾滋病检测点的审批 1、在人员条件和实验室硬件均符合全国艾滋病检测工作规范要求的前提下，拟申请艾滋病检测点的单位，须填写艾滋病检测点申请表，一式三份，报当地卫生行政部门签署意见后，交市疾

4、病预防控制中心确证实验室。 2、市CDC组织相关2人进行现场考核与验收，如符合申报条件则会形成意见报市级卫生行政部门。 3、经市级卫生行政部门批准后方可成为艾滋病检测点。,艾滋病检测的方法,HIV抗体检测 HIV快速抗体检测 HIV抗体筛查检测 HIV抗体确证检测（免疫印迹试验） HIV核酸检测 核酸序列依赖性扩增（NASBA） HIV定量逆转录PCR系统（RTPCR） HIVRNA定量检测的分支测定法（bDNA),艾滋病检测的方法,严格执行中国疾病预防控制中心全国艾滋病检测技术规范(2004年版) 严格遵照艾滋病快速检测操作技术规程。,艾滋病检测的方法及意义,HIV抗体检测 HIV抗体筛查检

5、测 1、快速检测 由于方法的局限性，阳性反应须采标本送筛查实验室复核，告知结果“怀疑感染HIV”，出具报告“HIV抗体待复查”需要进一步检查 2、复核 筛查实验室对快速检测的样本复核仍为阳性反应，只能出具“抗体待复查”的检验报告，并将标本送确证实验室确证 HIV抗体的确证实验(免疫印迹试验) HIV/AIDS诊断的唯一依据,市CDC确认实验室负责全市HIV阳性及可疑标本的确证。,我国常用的HIV抗体检测试剂,HIV抗体筛查试剂 酶联免疫：筛查实验室的常用基本试剂。 明胶颗粒凝集 快速诊断试剂：未建立艾滋病筛查实验室的县级医院、妇幼保健院、乡镇卫生院快速检测点或经过培训的技术人员在规定的场所使用

6、。 HIV抗体确证试剂 免疫印迹试剂,快速检测试剂的优缺点,硒标记法和金标记法与ELISA相比 优点 所需时间短。 操作简便，不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。,国家对HIV抗体检测试剂的要求,筛查试剂 筛查试剂必须是HIV1+2混合型的、经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检验合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。,方法及生物学原理,本试剂是利用免疫层析法原理定性测定血样中HIV-1/2抗体 加样本入反应条,样品迁移通过结合物包被处,与硒胶抗体-抗原结合物混合重组结合,此混合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的病人结果窗口 如果

7、样品中含有HIV-1/2抗体,硒胶体-抗原结合,并在病人窗口被固相包被的合成肽和重组抗原所捕捉固定,形成一条红线,方法及生物学原理,如果样品中不含有HIV-1/2抗体,硒胶体-抗原结合物将会通过病人窗口而不与固相被包被的合成肽和重组抗原结合,则没有一条红线形成 为了确保结果有效,在反应条中含有质控条带,HIV抗体检测程序及流程图,1、快速检测 阴性反应出具阴性报告，阳性反应采集样品筛查实验室复检 2、筛查试验 标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如呈阴性反应，报告为HIV抗体阴性；对呈阳性反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂重复检测，如两种试剂

8、复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确证实验室进行确证。,快速试验的流程图,样 品,ELISA复检,快速检测,阳性反应,重复检测,均阳性反应,一阴一阳,送确证实验室 进行确证,均阴性反应,阴性报告,阴性反应,原有试剂加 另一种筛查试剂,阳性反应,HIV抗体筛查结果的报告和处理,快速检测呈阴性反应，出具HIV抗体阴性报告（提示应考虑窗品期的可能） 快速检测呈阳性反应，可出具“HIV待复查”报告，填写HIV阳性标本送检单，送筛查实验室复核 筛查试验呈阴性反应，出具HIV抗体阴性报告（提示应考虑窗口期的可能）。 筛查试验仍呈阳性反应，应尽快用两种试剂进行复测

9、，如结果均阳性或一阴一阳,同时尽快进行以下处理： 填写HIV阳性标本送检单，并随标本送上级确证验室确证。 可出具“HIV待复查”报告，不能出阳性报告。 阳性标本必须送市确证，筛查实验室不能随意处理。 做好检测后的咨询,安全注意事项,对于那些含有感染源和怀疑含有感染源物质应有合适的生物安全保证程序，下列为有关注意事项，但不仅限于此： 带手套处理样品和试剂 不要用嘴吸样 不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理无形眼镜 用消毒剂对溅出的样品进行消毒，比如用0.5%次氯酸钠(废弃物或溢出物)和其它消毒剂效果更好，污染桌面消毒可用0.2%次氯酸钠、2%戊二醛、75%洒精,安全注意事项,按照有

10、关条例来消毒和处理所有标本、试剂和潜在污染物 试剂和消毒剂在正当处理和保存的情况下直至有效期内保持稳定，不能使用过期的试剂盒 快速诊断试剂盒及缓冲液在摄氏2-30度以下保存直到有效期,样品的采集和保存,样品采集 采集静脉血清、血浆和全血 静脉采集人的血清、血浆和全血必须在无菌条件下，并避免样品溶血 末梢全血的采集 在采集末梢人血样品前，在清洁处备有干棉球、吸血管 1、对成人或一岁以下的儿童可选择中指、食指或无名指，用湿热毛巾或热水来温暖手增加血液循环,样品的采集和保存,2、用酒精消毒采血手指 3、手掌向上，将穿刺针置于指尖，紧靠手指并刺破皮肤，将穿刺针头丢弃于尖锐危险品容器里 4、用无菌棉花擦

11、弃第一滴血 5、将手指的高度低于肘部，间歇性的挤压穿刺手指部位数次，用吸血管吸取血样约50ul,样品的采集和保存,样品保存 1、用一次性注射器或真空采血管抽取一定量的静脉血（3-5ml)，室温下自然放置1-2小时，待血液凝固后、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用 2、需要抗凝的采用有抗凝试剂的真空管，采集方法同上 3、样本采集后，血清或血浆7天内检测，放置在摄氏2-8度保存，超过7天须低于零下20度冷冻保存,艾滋病快速检测操作步骤,10条一组的样品反应条带可折断分开单独使用,注意:分使用时必须从右边开始,左边有试剂的批号和有效期 去掉每个测试条上的外包装 对血清或血浆

12、样品 用加样器加50ul样品于样品反应堑中(箭头所指处) 15-25分钟肉眼读取结果(最长60分钟),艾滋病快速检测操作步骤,对全血样品(静脉血) 用加样器加50ul样品于样品反应堑中(箭头所指处) 直至血液吸入样本堑后加入1滴缓冲液 至少等15-25分钟读取结果(最长60分钟) 对全血样品(手指血) 用加样器加50ul样品于样品反应堑中(箭头所指处) 直至血液吸入样本堑后加入1滴缓冲液 至少等15-25分钟读取结果(最长60分钟),艾滋病快速检测质量控制,为确保结果有效,测试条带上有“Control”的控制线，当分析结束后质控线没有变红，测试条带无效，必须重测,艾滋病快速检测结果判断,阳性（

13、二条红线） 病人条带（标有“Patient”）和质控线(标有“Control”)都呈红色认为是阳性，如果有任何可见的红色在病人条带上，也解释为阳性 阴性（一条红线） 病人条带（标有“Patient”）无色而质控线(标有“Control”)呈红色认为是阴性,艾滋病快速检测结果判断,无效（没有红线） 病人条带和质控线都无色被认为结果无效，（即使病人条带有红线），需要重试，如果问题持续，请与试剂供应商或支持中心联系 注意 即使病人条带线色深过质控线，结果为阳性 如果无效结果重复出现，停止使用,方法的局限性,雅培HIV-1/2的设计仅限用于病人血清、血浆和全血检测HIV-1和HIV-2抗体，其它体液混合样品可能得不到准确结果 病人条色深浅程度与样品中的抗体效价不一定有关 阴性结果不排出受HIV病毒感染的可能，造假阴性的情况归类为： 当感染者抗体水平低于产品的测试灵敏度极限时 当特殊HIV病毒变异株感染样本抗体不与此产品包被的抗原起反应 标本污染或标本质量不高 阳性结果建议用酶联复核后送确证检测,谢 谢,本文来自网络，请不要使用盗版文档，尊重作者的辛苦劳动，谢谢 G 我爱朱丹老婆 20100808080808080808080808080808080808080808080808080808080808080,Lvdd我爱你ZDLP,